天然多胺修飾物ST-01抗肝癌藥效學研究.pdf

1、目的：天然多胺綴合物因具有良好的靶向抗腫瘤作用已引起了人們的廣泛關注。本文以本實驗室篩選出活性較好的新型天然多胺修飾物ST-01為研究對象，采用人肝癌細胞系Hep G2、SMMC-7721及荷瘤小鼠等模型，評價其體內(nèi)外抗肝癌作用及分子機制。
　　方法：采用MTT法檢測不同濃度ST-01對人肝癌細胞Hep G2和SMMC-7721增殖的影響；利用生物倒置顯微鏡觀察ST-01對肝癌細胞形態(tài)的影響；采用MDC熒光染色法及多維全景流式細胞

2、儀檢測ST-01對肝癌Hep G2和SMMC-7721的細胞自噬及細胞周期的影響；免疫印跡法檢測對自噬相關蛋白BECN1、p62和LC3，細胞周期相關蛋白Cyclin B1，Cdc2和p-Cdc2表達的影響；基于荷瘤小鼠模型，評價ST-01對荷瘤小鼠生存時間的影響。
　　結(jié)果：ST-01作用人肝癌Hep G2和SMMC-7721細胞24h及48h后，呈劑量及時間依賴性地抑制細胞增殖，24h時IC50分別為(12.97±2.18)μ

3、M和(12.46±2.31)μM；48h時IC50分別為(4.66±0.53)μM和(4.46±0.25)μM。形態(tài)學觀察、MDC熒光染色檢測及流式細胞儀檢測均表明ST-01可誘導肝癌細胞發(fā)生自噬，且細胞周期阻滯于G2/M期；此外，自噬抑制劑3-MA可逆轉(zhuǎn)ST-01對肝癌細胞增殖的抑制作用。免疫印跡實驗表明ST-01可誘導自噬標記性蛋白BECN1、LC3-II表達上調(diào)，p62表達下調(diào)；自噬抑制劑3-MA可部分逆轉(zhuǎn)上述蛋白表達。此外，ST