在線固相萃取_液質(zhì)聯(lián)用法測(cè)定地下水中痕量苯胺和聯(lián)苯胺

1、2015年5月第34卷第5期分析試驗(yàn)室ChineseJournalofAnalysisLabatyVol34No5541～544收稿日期:20150216Email:alicezhy@163comDOI:10.13595jcnkiissn10000720.2015.0120在線固相萃取－液質(zhì)聯(lián)用法測(cè)定地下水中痕量苯胺和聯(lián)苯胺張雁，陳振賀，柯建明，

2、閆磊(北京市環(huán)境保護(hù)科學(xué)研究院，城市環(huán)境污染控制工程技術(shù)研究中心，北京100037)摘要:建立了在線固相萃取－液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定地下水中的痕量苯胺和聯(lián)苯胺的方法。水樣經(jīng)HLB柱富集，HSST3高效液相色譜柱分離，乙腈和0.1%的甲酸水溶液梯度洗脫，串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)，外標(biāo)法定量。在進(jìn)樣量為5mL時(shí)，苯胺在50.0ngL～20.0μgL，聯(lián)苯胺在5.0ngL～2.0μgL范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)R均為0999，苯胺和聯(lián)苯胺的檢出限

3、分別為10.0，0.20ngL。實(shí)際水樣的回收率，苯胺為65%～86%，聯(lián)苯胺為85%～98%。方法可用于地下水中痕量苯胺和聯(lián)苯胺的檢測(cè)。關(guān)鍵詞:苯胺聯(lián)苯胺在線固相萃取超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法地下水中圖分類號(hào):O65763文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):10000720(2015)05054104在線固相萃?。合嗌V法已廣泛應(yīng)用于環(huán)境樣品中農(nóng)藥［1］、微囊藻毒素［2］、內(nèi)分泌干擾物［3］、鄰苯二甲酸酯類［4］、酚類化合物［5］、藥物［6］等的

4、分析測(cè)定。苯胺類化合物的廣泛應(yīng)用造成環(huán)境污染，我國(guó)也將苯胺列為環(huán)境優(yōu)先控制污染物之一。地表水和飲用水標(biāo)準(zhǔn)均對(duì)苯胺類化合物做了限定。目前，環(huán)境中苯胺類化合物的監(jiān)測(cè)方法主要有N(1－萘基)－乙二胺偶氮分光光度法［7］、流動(dòng)注射光度法［8］、熒光法［9］、電化學(xué)法［10］和色譜法［11～16］等。由于環(huán)境水體中的苯胺類化合物含量較低，特別是飲用水源地水和地下水，常以μgL級(jí)存在，所以常常需要采用液液萃取［17］或固相萃?。?8～21］對(duì)水樣進(jìn)

5、行濃縮。本方法將水樣中的苯胺和聯(lián)苯胺經(jīng)過濾后用在線固相萃取與串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀測(cè)定，實(shí)現(xiàn)定性和外標(biāo)法定量分析。與傳統(tǒng)的離線固相萃取的方法相比，本法具有前處理簡(jiǎn)單，可直接進(jìn)樣、重現(xiàn)性好、快速、高靈敏等特點(diǎn)。1實(shí)驗(yàn)部分1.1儀器與試劑在線固相萃取超高效液相色譜串聯(lián)四極桿質(zhì)譜系統(tǒng)(2777C－Acquity，UltraPerfmanceLCXevoTQD，美國(guó)Waters公司)色譜柱:ACQUITYBEHShieldRP18(2.1mm50mm，

6、1.7μm)，AcquityUPLCBEHC18柱(2.1mm50mm，1.7μm)，AcquityUPLCHSST3(2.1mm50mm，1.8μm)(美國(guó)Waters公司)固相萃取柱:WatersOasisHLBDCHP(2.1mm30mm，20μm，可重復(fù)使用)0.22μm聚醚砜(PES)水相針式濾頭(上海安譜公司)。1000mgL的聯(lián)苯胺標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、5000mgL的苯胺標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(純度9999%，美國(guó)AccuStard公司)甲醇、乙

7、腈、正己烷(色譜純，德國(guó)MERCK公司)丙酮(色譜純，韓國(guó)DUKSAN公司)蒸餾水(屈臣氏)。1.2標(biāo)準(zhǔn)溶液配制將5000mgL的苯胺標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)依次用乙腈定容至0.010～10.0mgL標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，將1000mgL的聯(lián)苯胺標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)依次用乙腈定容至0.0010～10.0mgL標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，臨用時(shí)用蒸餾水分別將苯胺及聯(lián)苯胺標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液稀釋成10ngL～20.0μgL和0.10ngL～2.0μgL的標(biāo)準(zhǔn)系列使用液。1.3樣品采集及處理用1000mL

8、棕色玻璃瓶采集滿瓶水樣，不留頂空，采集后儲(chǔ)存于4℃暗處，當(dāng)天分析，水樣經(jīng)0.22μm水相濾頭過濾后備用。1.4分析條件1.4.1色譜條件在線富集泵的流動(dòng)相A，B為第5期張雁等:在線固相萃取－液質(zhì)聯(lián)用法測(cè)定地下水中痕量苯胺和聯(lián)苯胺2.3流動(dòng)相緩沖鹽的優(yōu)化選擇甲酸作為流動(dòng)相緩沖鹽，考察了聯(lián)苯胺和苯胺在0.01%，0.05%，0.1%和0.2%甲酸水溶

9、液中的色譜峰響應(yīng)值。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，當(dāng)甲酸水溶液的體積分?jǐn)?shù)為0.1%時(shí)，聯(lián)苯胺及苯胺的色譜峰峰形較尖銳，響應(yīng)值較大。2.4流動(dòng)相初始梯度的優(yōu)化考察了聯(lián)苯胺和苯胺在水相與有機(jī)相比例分別為85∶15，90∶10，92∶8和95∶5時(shí)的色譜峰響應(yīng)值。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，隨著水相比例的增加，保留時(shí)間逐漸延長(zhǎng)，響應(yīng)值也逐漸增大。在水相和乙腈的比例為92∶8時(shí)，聯(lián)苯胺及苯胺色譜峰有最佳響應(yīng)，將該比例作為兩相的初始梯度比。2.5色譜柱的優(yōu)化實(shí)驗(yàn)比較了聯(lián)苯胺及

10、苯胺在AcquityUPLCBEHshieldRP18，AcquityUPLCBEHC18和AcquityHSST33種色譜柱上的響應(yīng)區(qū)別。3種色譜柱中，AcquityHSST3色譜柱的極性最強(qiáng)，從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出聯(lián)苯胺和苯胺在HSST3色譜柱的響應(yīng)優(yōu)于在其他兩種色譜柱上的響應(yīng)，且AcquityHSST3色譜柱能夠耐受100%的水相，所以最終選擇AcquityHSST3色譜柱作為聯(lián)苯胺和苯胺的分析柱。2.6水樣的上樣條件考察了水樣富集時(shí)

11、富集泵A相分別為1%甲酸水溶液，2%NH3H2O水溶液和純水中3種上樣條件下的色譜圖。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，純水上樣時(shí)，聯(lián)苯胺及苯胺有最佳的響應(yīng)值，所以本實(shí)驗(yàn)選擇純水上樣。2.7線性范圍配制苯胺質(zhì)量濃度為10ngL到20.0μgL，聯(lián)苯胺質(zhì)量濃度為0.1ngL到2.0μgL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。采用上述優(yōu)化后的在線固相萃取和分析條件，進(jìn)樣5mL，聯(lián)苯胺的出峰時(shí)間為4.87min，苯胺的出峰時(shí)間為4.89min。以聯(lián)苯胺和苯胺的濃度及所得的響應(yīng)峰面積做定量

12、校準(zhǔn)曲線，以峰面積對(duì)濃度進(jìn)行線性擬合，聯(lián)苯胺在5ngL～2.0μgL范圍內(nèi)線性良好，線性方程為y=8.27103ρ54.6，相關(guān)系數(shù)R為0.999。苯胺在50ngL～20.0μgL范圍內(nèi)線性良好，線性方程為y=1.35103ρ17.2，相關(guān)系數(shù)R為0.999。2.8精密度和檢出限采用上述的分析條件，將0.20μgL的聯(lián)苯胺和2.0μgL的苯胺標(biāo)準(zhǔn)溶液每組分別平行測(cè)定6次，計(jì)算得出聯(lián)苯胺和苯胺的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為4.5%和7.4%。將聯(lián)苯

13、胺和苯胺的標(biāo)準(zhǔn)溶液逐級(jí)稀釋，當(dāng)聯(lián)苯胺的質(zhì)量濃度為0.20ngL，苯胺的濃度為10.0ngL時(shí)色譜峰的信號(hào)噪聲比大于3(SN＞3)，故將聯(lián)苯胺的檢出限定為0.20ngL，苯胺的檢出限為10.0ngL。2.9樣品測(cè)定分別取北京某地2個(gè)點(diǎn)位的地下水，用0.22μm濾膜過濾后按照1.4節(jié)檢測(cè)條件進(jìn)行測(cè)定。每個(gè)樣品均測(cè)定3次，在所測(cè)樣品中均未檢出聯(lián)苯胺及苯胺。地下水的加標(biāo)回收率如表3所示。表3加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)結(jié)果Tab.3Recoverytestso

14、fthemethod水樣苯胺加標(biāo)量ρ(μgL)測(cè)得量ρ(μgL)回收率%聯(lián)苯胺加標(biāo)量ρ(μgL)測(cè)得量ρ(μgL)回收率%0.100.068680.0100.009090地下水11.00.80800.100.0929210.08.6861.00.98980.100.065650.0100.008585地下水21.00.72720.100.0909010.08.1811.00.93933次測(cè)定的濃度平均值。3結(jié)論本文采用在線固相萃取與超高