β-半乳糖苷酶酶活性酶的固定化

1、摘要I摘要從土壤中篩選出一株產(chǎn)β半乳糖苷酶的枯草芽孢桿菌，并對菌株和其產(chǎn)生的β半乳糖苷酶進行了測定。單菌落的最佳生長時間是10h，最佳接種量是2.0%，最佳培養(yǎng)時間24h；該菌株產(chǎn)生的β半乳糖苷酶的最適pH是6.5，最適生長溫度為37℃，酶的穩(wěn)定性較高，4h后相對酶活仍能維持85%以上；Mg2對酶活性的促進作用最強，當(dāng)濃度為10mmolL時，酶活力可達112.24％，Cu2對酶活性抑制作用最強，少量Cu2（1mmolL）就可使酶失活。本

2、實驗還進行了β半乳糖苷酶的固定化實驗。以海藻酸鈉為栽體、戊二醛為交聯(lián)劑，對乳糖酶進行固定化。研究了海藻酸鈉濃度、氯化鈣濃度、戊二醛濃度、固定化時間對酶固定化的影響，并對固定化酶酶促反應(yīng)的最適pH、溫度等進行了測定。結(jié)果表明，4％的海藻酸鈉，在溫度37℃、pH6~7、氯化鈣濃度1％、戊二醛濃度0.1%下對乳糖酶的固定化率最高。酶促反應(yīng)特性測定結(jié)果表明，固定化后乳糖酶的穩(wěn)定性增強，最適溫度范圍較非固定化乳糖酶大，最適pH范圍與非固定化乳糖酶

3、大致相同。但固定化酶珠體機械強度較差，尚待改進。關(guān)鍵詞：β半乳糖苷酶酶活性酶的固定化目錄III目錄摘要................................................................................................................................................IAbsract.................

4、..............................................................................................................................II目錄..........................................................................................

5、....................................................III第1章緒論......................................................................................................................................11.1研究背景..................

6、...........................................................................................................11.2課題研究目的和意義....................................................................................................

7、.....21.3國內(nèi)外研究現(xiàn)狀和發(fā)展趨勢.............................................................................................21.4β半乳糖苷酶的來源及其特性.........................................................................................

8、.41.4.1細菌產(chǎn)生的β半乳糖苷酶.....................................................................................41.4.2酵母菌產(chǎn)生的β半乳糖苷酶.................................................................................41.4.3霉菌產(chǎn)生的β半乳糖苷酶.

9、....................................................................................41.5β半乳糖苷酶在食品工業(yè)中的應(yīng)用..................................................................................51.5.1水解牛乳和其它乳制品中的乳糖...............

10、...........................................................51.5.2生產(chǎn)低聚半乳糖(Galactooligosacide)..............................................................61.5.3分析食品中乳糖含量...................................................

11、...........................................71.5.4β半乳糖苷酶在制藥工業(yè)中的應(yīng)用.......................................................................71.5.5β半乳糖苷酶在酶聯(lián)免疫反應(yīng)(EIA)中的應(yīng)用......................................................7第2

12、章材料和方法..........................................................................................................................82.1材料......................................................................................

13、...............................................82.1.1材料與試劑..............................................................................................................82.1.2儀器與設(shè)備.........................................

14、.....................................................................82.1.3培養(yǎng)基......................................................................................................................82.2產(chǎn)β半乳糖苷酶菌的篩選.........

15、.......................................................................................92.2.1菌株篩選方法..........................................................................................................92.2.2分離純化.....

16、.............................................................................................................92.2.3菌種生理生化鑒定.................................................................................................

17、.92.2.4β半乳糖苷酶粗酶液制備.......................................................................................92.2.5鄰硝基苯酚（ONP）標(biāo)準(zhǔn)曲線..............................................................................92.2.6β半乳糖苷酶酶活力測定

18、.....................................................................................102.3β半乳糖苷酶酶學(xué)性質(zhì)....................................................................................................102.3.1菌種生長曲線測定.....

19、...........................................................................................102.3.2培養(yǎng)時間對菌株產(chǎn)酶能力的影響........................................................................102.3.3接種量對菌株BGJ222產(chǎn)酶能力的影響..........

20、...................................................102.3.4pH值對β半乳糖苷酶活力和穩(wěn)定性的影響......................................................102.3.5溫度對β半乳糖苷酶活力和穩(wěn)定性的影響。...................................................112.3.6不同金屬離

21、子及離子濃度對β半乳糖苷酶的影響。.......................................11第3章β半乳糖苷酶酶學(xué)性質(zhì).....................................................................................................123.1高產(chǎn)β半乳糖苷酶細菌的篩選..............................

22、........................................................123.2鄰硝基苯酚（ONP）標(biāo)準(zhǔn)曲線.......................................................................................123.3菌株生長曲線測定.............................................

23、..............................................................133.4培養(yǎng)時間對菌株產(chǎn)酶能力的影響...................................................................................143.5接種量對菌株產(chǎn)酶能力的影響......................................