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1、Bifidobacteriumbreve203在棉子糖為誘導(dǎo)物的培養(yǎng)基中培養(yǎng),其無細(xì)胞粗酶液經(jīng)NativegradientPAGE(4-15﹪線生梯度膠)后活性染色,表明只含有一種α-半乳糖苷酶.經(jīng)硫酸銨分級沉淀、DEAE-SeparoseFastFlow柱層析、GigapiteK-100S柱層析和sephadexG-150柱層析分離純化后,酶蛋白在垂直板SDS-PAGE和NativegradentPAGE(4-15﹪線性梯度膠)中,均
2、為一條帶,證明已得到B.breve203α-半乳糖苷酶電泳純.純酶的比活為113.8units/mg,純化倍數(shù)為64.7倍,得率為0.8﹪.酶的N-端氨基酸序列為NH<,2>-A-I-M-D-F-H-G-R-S-T.NativegradentPAG結(jié)果顯示酶的分子量約為156KDα,SDS-PAGE顯示單個亞基的分子是約為78KDa,由此表明該酶是一個雙亞基蛋白質(zhì).該文的研究工作為研究α-半乳糖苷酶催化的轉(zhuǎn)糖基作用及其區(qū)域選擇性,酶法進(jìn)
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