實驗二 顯微鏡的使用

1、微生物學(xué)實驗微生物學(xué)實驗微生物實驗室規(guī)則及要求微生物實驗室規(guī)則及要求?實驗前要預(yù)習，寫好預(yù)習報告。?保持室內(nèi)整潔，不要隨意走動。?如若發(fā)生意外，及時報告老師。?作好實驗記錄，寫好實驗報告。?對于實驗材料，寫好姓名組號。?牢記無菌概念，保持清潔衛(wèi)生。?上課認真聽講，課后積極討論。?上課不許閑聊，不得隨意走動。?注意實驗安全，祝你實驗順利。實驗二、顯微鏡的使用以及細菌形態(tài)觀察實驗二、顯微鏡的使用以及細菌形態(tài)觀察一、目的要求：學(xué)習并掌握油鏡的

2、原理和使用方法二、材料用具：顯微鏡擦鏡紙香柏油標本三、顯微鏡的構(gòu)造及工作原理三、顯微鏡的構(gòu)造及工作原理（一）顯微鏡的構(gòu)造微生物學(xué)研究用的顯微鏡物鏡通常有：低倍物鏡(16mm，10?)高倍物鏡(4mm，4045?)油鏡(1.8mm，95100?)普通光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造可分為兩大部分：一為機械裝置，一為光學(xué)系統(tǒng)，這兩部分很好的配合，才能發(fā)揮顯微鏡的作用。1.光學(xué)部分:接目鏡、接物鏡、照明裝置(聚光鏡、虹彩光圈、反光鏡等).它使檢視物放大造成物

3、象.2.機械部分:鏡座、鏡臂、鏡筒、物鏡轉(zhuǎn)換器、載物臺、載物臺轉(zhuǎn)移器、粗調(diào)節(jié)器、細調(diào)節(jié)器等部件.它起著支持調(diào)節(jié)固定等作用.(1)光源光源(2)聚光器聚光器聚光器在載物臺下面，它是由聚光透鏡、虹彩光圈和升降螺旋組成的。（3）物鏡）物鏡安裝在鏡筒前端轉(zhuǎn)換器上的接物透鏡利用光線使被檢物體第一次造像，物鏡成像的質(zhì)量，對分辨力有著決定性的影響。物鏡的性能取決于物鏡的數(shù)值孔徑（numericalapeature簡寫為NA），每個物鏡的數(shù)值孔徑都標在

4、物鏡的外殼上，數(shù)值孔徑越大，物鏡的造的象。3、放大率：、放大率：顯微鏡放大物體，首先經(jīng)過物鏡第一次放大造象，目鏡在明視距離造成第二次放大象。放大率就是最后的象和原物體兩者體積大小之比例。因此，顯微鏡的放大率（V）等于物鏡放大率（V1）和目鏡放大率（V2）的乘積，即：V=V1V24、焦深：、焦深：在顯微鏡下觀察一個標本時，焦點對在某一象面時，物象最清晰，這象面為目的面。在視野內(nèi)除目的面外，還能在目的面的上面和下面看見模糊的物象，這兩個面之

5、間的距離稱為焦深。物鏡的焦深和數(shù)值孔徑及放大率成反比：即數(shù)值孔徑和放大率愈大，焦深愈小。因此調(diào)節(jié)油鏡比調(diào)節(jié)低倍鏡要更加仔細，否則容易使物象滑過而找不到。四、操作步驟1、取鏡2、調(diào)節(jié)光源3、低倍鏡觀察4、高倍鏡觀察5、油鏡觀察油鏡觀察油鏡觀察油浸物鏡的工作距離（指物鏡前透鏡的表面到被檢物體之間的距離）很短，一般在0.2mm以內(nèi)，再加上一般光學(xué)顯微鏡的油浸物鏡沒有“彈簧裝置”，因此使用油浸物鏡時要特別細心，避免由于“調(diào)焦”不慎而壓碎標本片并

6、使物鏡受損。使用油鏡按下列步驟操作：1、先用粗調(diào)節(jié)旋鈕將鏡筒提升（或?qū)⑤d物臺下降）約2cm，并將高倍鏡轉(zhuǎn)出。2、在玻片標本的鏡檢部位滴上一滴香柏油。3、從側(cè)面注視，用粗調(diào)節(jié)旋鈕將載物臺緩緩地上升，（或鏡筒下降），使油浸物鏡浸入香柏油中，使鏡頭幾乎與標本接觸。4、從接目鏡內(nèi)觀察，放大視場光闌及聚光鏡上的虹彩光圈（帶視場光闌油鏡開大視場光闌），上調(diào)聚光器，使光線充分照明。用粗調(diào)節(jié)旋鈕將載物臺徐徐下降（或鏡筒上升），當出現(xiàn)物像一閃后改用細調(diào)節(jié)

7、旋鈕調(diào)至最清晰為止。如油鏡已離開油面而仍未見到物象，必須再從側(cè)面觀察，重復(fù)上述操作。注意事項注意事項?使用顯微鏡時應(yīng)據(jù)不同的物鏡而調(diào)節(jié)光線?油鏡使用完畢，取下標本片。先用擦鏡紙擦去鏡頭上的油，然后再用擦鏡紙沾少量二甲苯擦去鏡頭上殘留油跡，最后再用擦鏡紙擦去殘留的二甲苯。切忌用手或其他紙擦鏡頭，以免損壞鏡頭，可用綢布擦凈顯微鏡的金屬部件。?將各部分還原，將接物鏡轉(zhuǎn)成八字形，再向下旋。罩上鏡套，然后放回鏡箱中。五、實驗報告五、實驗報告1、結(jié)

8、果分別繪出你在油鏡下觀察到的金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、大腸桿菌的形態(tài)，同時標明物鏡的放大倍數(shù)和總放大率2、思考題：P18（1）用油鏡便于觀察細菌的依據(jù)是什么？用油鏡便于觀察細菌的依據(jù)是什么？（2）使用油鏡應(yīng)特別注意哪些問題？在載玻片和鏡頭之間加滴什么油？起什么作用？）使用油鏡應(yīng)特別注意哪些問題？在載玻片和鏡頭之間加滴什么油？起什么作用？（3）當物鏡從低倍鏡轉(zhuǎn)到高倍鏡和油鏡時，對照明度有何要求？應(yīng)如何調(diào)節(jié)？）當物鏡從低倍鏡轉(zhuǎn)到高倍鏡和