五甲基槲皮素對脂多糖誘導(dǎo)的小鼠巨噬細(xì)胞系raw264.7抗炎作用的研究

1、華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文五甲基槲皮素對脂多糖誘導(dǎo)的小鼠巨噬細(xì)胞系RAW264.7抗炎作用的研究姓名：馬莉娜申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：藥理學(xué)指導(dǎo)教師：金滿文20090501華 中 科 技 大 學(xué) 碩 士 學(xué) 位 論 文華 中 科 技 大 學(xué) 碩 士 學(xué) 位 論 文 3第二部分 第二部分 PMQ 對 LPS 誘導(dǎo) 誘導(dǎo) RAW264.7 釋放 釋放 NO 的影響 的影響 目的 目的：研究 PMQ 對 LPS 誘導(dǎo) RAW264.7 釋放 NO

2、 的影響。方法 方法：采用硝酸還原酶法檢測培養(yǎng)基中亞硝酸鹽的含量來間接反映 NO 的量。藥物作用 24 h，實驗分組：溶劑對照組，LPS 模型組（1 µg/ml） ，藥物干預(yù)組：LPS+PMQ 0.1, 0.3, 1 µM。結(jié)果 結(jié)果：1 µg/ml LPS 作用 24 小時后, 培養(yǎng)基中 NO 含量從 3.53±0.50 增至 55.84±1.72 ( P<0.01)； LPS

3、1 µg/ml 和 PMQ 0.1～1 µM 共同處理細(xì)胞 24 小時, PMQ 0.1, 0.3， 1 µM組的 NO 含量分別為 51.56±2.34， 42.10±3.46， 40.05±3.45， 與 LPS 模型組 （55.84±1.72）比，藥物組 PMQ 0.3, 1 µM 的 NO 的量均減少( P<0.01)；PMQ 0.3, 1 &

4、#181;M 對 NO 的抑制率分別達到 25.42±4.99%，29.00±6.05%。 第三部分 第三部分 PMQ 對 LPS 誘導(dǎo)的 誘導(dǎo)的 RAW264.7 iNOS, COX-2, TNF-α, IL-6 mRNA 表達的影響 表達的影響 目的： 目的：研究 PMQ 對 LPS 誘導(dǎo)的 RAW264.7 iNOS, COX-2, TNF-α, IL-6 mRNA表達的影響。方法 方法：采用

5、半定量 RT-PCR 方法，以目的條帶與 β-action 內(nèi)參條帶的光密度比值分析目的基因的表達水平。藥物作用 6 小時，實驗分組：溶劑對照組，LPS 模型組 （1 µg/ml） ， 藥物干預(yù)組： LPS+PMQ 0.1, 0.3, 1 µM。結(jié)果 結(jié)果： ①LPS 1 µg/ml處理細(xì)胞 6 小時后，與溶劑對照組比，各目的基因的表達明顯增強(P<0.01)。②LPS 1 µg/ml 和

6、PMQ 0.1, 0.3, 1 µM 共同處理細(xì)胞 6 h 后， 與 LPS 模型組比，PMQ 0.1, 0.3 µM 明顯抑制 iNOS mRNA 表達，抑制率分別為 44%(P<0.05)、37%(P<0.05)。③PMQ 0.3, 1 µM 明顯抑制 COX-2 mRNA 的表達，抑制率分別為 42%(P<0.01)、29%(P<0.05)。 ④PMQ 0.1, 0.3