fkbp12.6對(duì)fk506所致成年雄性小鼠不育的保護(hù)作用及其機(jī)制

1、分類號(hào)： 密級(jí)： U D C ： 學(xué)號(hào)：

2、407304414028 南 昌 大 學(xué) 碩 士 研 究 生 學(xué) 位 論 文 FKBP12.6 對(duì) FK506 所致 所致成年 成年雄性 雄性小鼠 小鼠不育 不育的保護(hù) 保護(hù)作用及其機(jī)制 作用及其機(jī)制 Protection and mechanisms of FKBP12.6 on FK506-induced infertility in adult male mice 曾智雄 培養(yǎng)單位（院、系） ： 生命科學(xué)院 指導(dǎo)教師姓名、職

3、稱：辛洪波（教授） 申請(qǐng)學(xué)位的學(xué)科門類：理學(xué)碩士 學(xué)科專業(yè)名稱： 動(dòng)物學(xué) 論文答辯日期： 2017 年 06 月 答辯委員會(huì)主席： 洪葵 評(píng)閱人： 盲審 2017 年 06 月 摘要 II 摘要 摘要 研究背景與目的 研究背景與目的 根據(jù) WHO 的標(biāo)準(zhǔn)定義，不育是指夫妻同居一年以上，在未采取主動(dòng)避孕而致女方不能懷孕的情況。近年來，隨著工業(yè)化進(jìn)程的加速，人們的生活方式也在發(fā)生改變，如過重的心里

4、壓力、不健康的飲食、惡化的環(huán)境等因素均可導(dǎo)致夫妻不孕不育，這一現(xiàn)象已引起社會(huì)的高度關(guān)注。目前，男性不育約占整個(gè)人類不孕不育的 40%，但其發(fā)病原因及其機(jī)制尚不清楚。研究表明，F(xiàn)K506 通過抑制鈣調(diào)磷酸酶（calcineurin）活性，可引起未成熟精子的中端僵化，從而導(dǎo)致雄性小鼠不育。FKBP12.6 是 FK506 結(jié)合蛋白家族中的一個(gè)重要成員，研究表明，該蛋白可與 FK506 結(jié)合，即可通過直接抑制 calcineurin 活性發(fā)揮

5、免疫抑制作用，同時(shí)又可通過調(diào)節(jié)鈣離子釋放通道（ryanodine receptor 2, RyR2）而調(diào)控 calcineurin 活性。因此，本課題借助 FKBP12.6 敲除小鼠，旨在研究FKBP12.6 在 FK506 所致雄鼠不育過程中的作用及其機(jī)制，從而為治療男性不育提供新的靶點(diǎn)。 方法與結(jié)果 方法與結(jié)果 1. 敲除 FKBP12.6 基因可明顯緩解 FK506 引起的成年雄性小鼠不育：為了確定 FKBP12.6 在 FK50

6、6 所致雄鼠不育中的作用，我們首先將成年野生型（WT）和 FKBP12.6 基因敲除（FKBP12.6KO）雄性小鼠皮下注射 FK506，結(jié)果顯示，給予 WT 小鼠 FK506 后，精子發(fā)生中端僵化，受精比率急劇下降，而 FKBP12.6KO 鼠給藥后與 WT 相比精子中端僵化明顯減少，受精情況顯著改善。結(jié)果表明 FKBP12.6 缺失在 FK506 所致雄鼠不育過程中起重要保護(hù)作用。 2. FKBP12.6 在睪丸組織內(nèi)質(zhì)網(wǎng)高表達(dá)：睪

7、丸是精子發(fā)生的場(chǎng)所，為了明確 FKBP12.6 或 FKBP12 在雄性成年鼠睪丸中對(duì)精子發(fā)生發(fā)育的影響，我們分別提取雄性小鼠的睪丸總蛋白和微粒體（microsome，主要為內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白） ，并檢測(cè)其表達(dá)情況。Western blot 檢測(cè)，結(jié)果顯示：雖然 FKBP12 在睪丸中的表達(dá)較 FKBP12.6 更為豐富，但 FKBP12.6 在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的相對(duì)表達(dá)量顯著高于FKBP12。表明 FKBP12.6 在睪丸鈣離子調(diào)控中可能起重要作用。