hbv能夠通過增強raf1的啟動子活性提高其在hepg2.2.15細胞中的表達

1、重慶醫(yī)科大學碩士學位論文HBV能夠通過增強Raf1的啟動子活性提高其在HepG2.2.15細胞中的表達姓名：田園園申請學位級別：碩士專業(yè)：臨床檢驗診斷學指導教師：湯華201105重慶醫(yī)科大學碩士研究生學位論文的表達。將設計好的干擾質(zhì)粒轉染H e p G 2 ．2 ．1 5 ，利用R T - P C R 檢測干擾質(zhì)粒的干擾效果；利用W e s t e r nb l o t 檢測干擾質(zhì)粒對R a f t 表達的影響。結果1 ．R T - P

2、 C R 結果顯示，R a i l 在H e p G 2 ．2 ．1 5 細胞中的表達量是其在H e p G 2 細胞中的2 ．1 6 倍，W e s t e r nb l o t 結果顯示R a f t 在H e p G 2 ．2 ．1 5 細胞中的表達量比其在H e p G 2 細胞中表達量明顯增加。2 ．成功構建了R a i l 啟動子的蟲熒光素酶報告質(zhì)粒，證明了該啟動子有明顯活性。將R a f t 啟動子的蟲熒光素酶報告質(zhì)粒與H

3、 B V 表達質(zhì)粒共轉H e p G 2 細胞時，發(fā)現(xiàn)H B V 能提高熒光素酶活性4 ．6 5 倍( 與對照相比) 。3 ．用H B V 四種表達蛋白與尺卵轉染轉H e p G 2 細胞時，發(fā)現(xiàn)H B s和H B x 對月卅啟動子活性影響最為明顯，相對熒光素酶活性分別是對照組的3 ．6 2 倍和2 ．9 2 倍，而H B c 、H B p 對啟動子活性沒有影響。與此同時，W e s t e r nb l o t 檢測也發(fā)現(xiàn)轉染了H B

4、 s 和H B x 表達質(zhì)粒轉H e p G 2細胞時中，R a f t 的蛋白表達水平與對照組相比明顯增加。4 ．轉染了H B s 和H B x 干擾質(zhì)粒的H e p G 2 ．2 ．1 5 細胞中H B s 和H B x的表達量明顯下降，且此兩種質(zhì)粒分別轉染時，對其余三種蛋白的表達沒有影響。W e s t e mb l o t 檢測證明轉染了H B s 和H B x 干擾質(zhì)粒后，R a f t 的蛋白表達水平明顯與對照組相比明顯降低