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1、天津大學(xué)碩士學(xué)位論文產(chǎn)核黃素基因工程菌B.subtilis RH44代謝物組學(xué)的初步研究姓名:干玉申請學(xué)位級別:碩士專業(yè):生物化工指導(dǎo)教師:趙學(xué)明20070701A B S T R A C TI nt h i s p a p e r , t h em e t a b o n o m i c so fB a c i l l u ss u b t i l i s R H 4 4w e r ei n v e s t i g a t e dp
2、r i m a r i l y .T h r o u g hc o m p a r i s o no fm a s sg r a p h i c s ,t h eb o i le t h a n o le x t r a c tm e t h o d sw a sc o n f i r m e d ;t h e c o m p a r i s o no f s e p a r a t i o nr e s u l t s ,t h e
3、o p t i m a lm o b i l e p h a s e sa n ds e p a r a t e g r a d i e n t w e r e c o n f i n e d :A :I m l V l H C O O N H 4 ,B :8 0 %m e t h a n o l( c o n t a i nl m M H C O O N H 4 ) ;g r a d i e n tW a s 0 - - 一1 0 m
4、 i n A :9 8 %一4 0 %,1 0 - - 。2 0 m i n A -4 0 %.2 4 %。T h e m e t a b o l i t e sc o n t r a s tu n d e r d i f f e r e n tn i t r o g e ns o u r c e sa n d c u l t u r et i m ew e r es t u d i e d ,a n da l s ot h ec o
5、m p a r i s o no f B a c i l l u ss u b t i l i s 16 8a n d B a c i l l u s s u b t i l i sR H 4 4s t r a i n s .A c c o r d i n g t ot h ef o r e —s t u d y , t h e b e s tp r o p e r n i t r o g e no f B a c i l l u s
6、s u b t i l i sR H 4 4w a sN a N 0 3 a n d N H 4 N 0 3 ,b u ts o m ep a p e r su s e d ( N H 4 ) 2 S 0 4 a sn i t r o g e ns o u r c e .T oi n v e s t i g a t e t h e e f f e c t s o fn i t r o g e n s o u r c e o nm e t
7、 a b o l i t e s ,w h e n u s eN A N 0 3 a n dN H 4 N 0 3 ,N A D H a n d N A D P H c o n t e n tw e r el o w e r t h a n ( N H 4 ) 2 S 0 4 ; C o m p a r i n g o fd i f f e r e n t c u l t u r e t i m e s :w h e n12 h ,t
8、h es t r a i n s w a s i nl o g a r i t h m g r o w t h p h a s e ,a n d t h es y n t h e s i z e r a t eo f r i b o f l a v i nw a s h i g h ,S Ot h em e t a b o l i t e s c o n t e n t o f P P p a t ew a s l o w ;w h e
9、 n 2 4 h ,t h es t r a i n sW a si ns t a b l ep h a s e ,t h es y n t h e s i z er a t eo f r i b o f l a v i nW a sl o w ,t h em e t a b o l i t e s c o n t e n ta c c u m u l a t e d ;C o m p a r i n go f d i f f e r
10、e n t s t r a i n s :t h em e t a b o l i z ep a t eo f B .s u b t i l i s16 8d o e sn o tp r o d u c e r i b o f l a v i n ,S Ot h em e t a b o l i t e sc o n t e n to f P Pp a t ew a sl o w , ‘a(chǎn) n dt h em e t a b o l i
11、 t e sc o n t e n t o f T C A a n dE M P p a t e sw a sh i g h ; B .s u b t i l i sR H 4 4 p r o d u c e s r i b o f l a v i n ,t h em e t a b o l i t e s c o n t e n to f P P p a t ew a s h i g h e r .K E Y W O R D S :m
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