牛卵母細(xì)胞的體外受精及受精誘導(dǎo)的胞質(zhì)內(nèi)ca39;2的變化

1、內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文牛卵母細(xì)胞的體外受精及受精誘導(dǎo)的胞質(zhì)內(nèi)Ca的變化姓名：連俊海申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：動物遺傳育種與繁殖指導(dǎo)教師：周歡敏20060501I nV i t r o F e r t i l i z a t i o no f B o v i n e O o c y t e s a n d C h a n g e o fI n t r a c y t o p l a s m i cF r e e —C a 2 + I n

2、 d u c e d b y F e r t i l i z a t i o nA b s t r a c tI n t r a c y t o p l a s m i cf r e e - C a 2 + o f b o v i n e e m b r y o W a S m e a S u r e d t o i n v e s t i g a t e t h ee f f e c to fC a 2 + b ye a l c i

3、u mf l u o r e s c e n tp r o b eF u r a - 2 ／A M ．a(chǎn) n dC a 2 + s p a t i a lp r o p e r t y b yc a l c i u mf l u o r e s c e n t p r o b e F l u o 一3 ／A M a td i f f e r e n ts t a g e d u r i n gf e r t i l i z a t i

4、o ni nv i t r o ．E f f e c t so ft h eo o c y t ei nv i t r om a t u r e c u l t u r et i m e ，t h ed i f f e r e n td e n s i t yc a f f e i n e i nB O ，d i f f e r e n t t i m et h es p e r mW a Si n d e v e l o p m e

5、n tm e d i u m t h a t t h ee m b r y o c l e a v a g er a t ew e r e s t u d i e d ．T h er e s u l t ss h o w e d t h a to o c y t e sc u l t u r e df o r2 2 h w e r ef e r t i l i z e d ；B Om e d i u mc o n t a i n i n

6、 g2 0 m g ／m lB S A a n d8 9 l ／m lh e p a f i ns o d i u ma d d e d w i t h 1 0m M t h ec a f f e i n e ；C a p a c i t a t i o no ft h es p e r m 5h i nv i t r o ，c a nr e c e i v et h es a t i s f a c t o r yr e s u l

7、t , t h ec l e a v a g e r a t em a y a c h i e v e6 5 ．4 ％．E m b r y oi nv i t r oc u l t u r eC a nd e v e l o p et ot h es t a g eo fp r o n u e l e u se m b r o ya f t e r 15 kj u d g e db ym o r p h o l o g i c a lc

8、 r e t i r e ao fn u c l e u sc h r o m o s o m es t a i n e dw i t ho r c e i n ．A n dw em e a S u r e di n t r a c y t o p l a s m i cf r e e —C a 2 + c o n c e n t r a t i o ni s8 4 ．9 9 n m o l ／Ld u r i n gt h eM I

9、Ie g g ；I n t r a c y t o p l a s m i c f r e e —C a 2 + c o n c e n t r a t i o n i n d e v e l o p e m e n t m e d i u mw i t h c a l c i u m t oc u l t u r e dO h 、c u l t u r e d2 h 、t h ep r o n u c l e u se m b r y

10、 o 、2 - c e l l se m b r y o a r e1 2 0 ．0 5u m o l ／L 、2 2 9 ．0 9n m o l ／L 、1 0 8 ．7 3n m o l ／L 、1 1 1 ．1 7n m o l ／L ，r e s p e c t i v e l y ；I n t r a c y t o p l a s m i cf l e e —C a 2 +c o n c e n t r a t i o n

11、i n d e v e l o p e m e n t m e d i u m w i t h o u t c a l c i u m t o c u l t u r e 2 h i s 4 1 ．9 2n m 0 1 ／L ，T h ee m b r y oi n v i t r oc u l t u r ei nt h e ．d e v e l o p e m e n tm e d i u m w i t h o n tc a l

12、c i u m w e r en o t a b l e t o a p p e a r p r o n u c l e u s e m b r y o ．I n t m c y t o p l a s m i c f r e e - C a 2 + o fM I I e g g i sI n t r a c y t o p l a s m i c ．i s f a i n t a n d i n t r a c y t o p l a

13、 s m i c f r e e —C a z + c o n c e n t r a t i o n i s l o w ；I n t r a c y t o p l a s m i cf r e e —C a 2 + a f t e rf e r t i l i z a t i o n i sc l u s t e r sa tt h ec o r t e x ；2 hl a t e r , f l u o r e c e n ti

14、 n t e n s i o ni s h e i g h t e n e do b v i o u s l y , i n t r a c y t o p l a s m i cf r e e —c d + c o n c e n t r a t i o n i sh i g h e ra n di n t r a c y t o p l a s m i cf r e e ．．C a 2 + s p r e a d s t ot h

15、ec e n t r eo f t h e c e l l ；I n t r a c y t o p l a s m i cf r e e ．．C a 2 + o ft h ep r o n u c l e u sd i s t r i b u t e st h e w h o l ec e l l ．T h e r e f o r e ，r e s e a r c hr e s u l t s h o w st h eb o v i

16、n eo o c y t ei nv i t r om a t u r a t i o na n d e a r l ye m b r y od e v e l o p m e n ti nV i t r oa r ec o r r e l a t i v ew i t hC a 2 + a n d t h e y a r e c a 2 + d e p e n d e n t ，K e yw o r d s ：B o v i n e

17、, O o c y t e ；腮c d +D ir e c t e d b y ：P r o f ． Z H O UH u a n m i nA p p I i c a n t f o rM a s t e r d e g r e e ：k lA N J u n h a i f A Ⅱi m a lg e n e t i c s b r e e d i n g & r e p r o d u c t i o n )( C o l