去除卵丘細胞的小鼠卵母細胞體外成熟、體外受精的研究.pdf

1、本研究以去除卵丘細胞的小鼠卵母細胞為研究對象，比較了不同成熟培養(yǎng)液對其成熟率、受精率、胚胎發(fā)育率的影響；利用透明帶下的精子注射探討了透明帶對去除卵丘細胞的小鼠卵母細胞受精的影響；利用透射電子顯微鏡技術在亞細胞結構上研究了去除卵丘細胞的小鼠卵母細胞在體外成熟過程中超微結構的變化。 一、去除卵丘細胞的小鼠卵母細胞的體外成熟、體外受精初步研究 本實驗探討了不同成分明確的成熟培養(yǎng)液對去除卵丘細胞的小鼠卵母細胞的體外成熟、體外受精

2、和胚胎的體外發(fā)育的影響。結果表明： (1) 對于常規(guī)的成熟培養(yǎng)液M199、α-MEM而言，去除卵丘細胞的卵母細胞成熟率要極顯著低于卵丘卵母細胞復合體。 (2) 選用不同的成熟培養(yǎng)液，可以顯著提高去除卵丘細胞的卵母細胞的成熟率。 (3) 去除卵丘細胞的小鼠卵母細胞在受精時存在著明顯的障礙。 (4) 在成熟培養(yǎng)前去除卵丘細胞對植入前胚胎發(fā)育沒有影響。 二、精子注入去除卵丘細胞的小鼠卵母細胞的體外受精

3、 利用透明帶下精子注射技術，研究透明帶對受精的影響。結果表明： (1) 利用精子帶下注射技術可以極顯著的提高去除卵丘細胞的卵母細胞的受精率，表明透明帶結構的改變是去除卵丘細胞的卵母細胞存在受精障礙的重要原因之一。 (2) 對于常規(guī)的成熟培養(yǎng)液M199和α-MEM而言，去除卵丘細胞的卵母細胞的帶下受精率仍然低于卵丘卵母細胞復合體，表明尚有其他不明因素影。響去除卵丘細胞的卵母細胞的受精過程。 (3) 在成熟培養(yǎng)

4、前，卵丘細胞的去除對帶下受精胚胎的發(fā)育沒有影響。 三、去除卵丘細胞的卵母細胞在體外成熟過程中的超微結構變化 去除卵丘細胞會降低小鼠卵母細胞的成熟質量。本章利用透射電子顯微鏡技術觀察去卵丘細胞的小鼠卵母細胞體外成熟過程中的超微結構變化，目的是在亞細胞水平上尋找由于卵丘細胞的去除而導致卵母細胞質量降低的原因。 (1) 去除卵丘細胞的小鼠卵母細胞在體外成熟過程中微絨毛由細長到短粗，由倒伏到直立均與卵丘卵母細胞復合體成熟