1.人類上游結(jié)合因子hubf的dna結(jié)合結(jié)構(gòu)域hmgbox5的晶體結(jié)構(gòu)及其與細(xì)胞周期調(diào)節(jié)因子taf1tbp相關(guān)因子的相互作用2.枯草桿菌中5氨基酮戊酸脫水酶的初步晶體學(xué)與功能的研究

1、圍講學(xué)技I ，l | ：大學(xué)U N I V E n S i T Y O F S C I E N C E A N D T E C H N O L O G Y O F C H I N A博士學(xué)位論文論文題胃：| ．． 萋麴幽塑堡董墮至至△星l 魚蕉咝堡旦，鍵莖盤煎生壘鰱煎兇熊醚受絲蕉瞳墨焦攫壹望絲煎疊盎作者姓名 二 ：二鰲：：鱉 二． 。學(xué)科專業(yè)． 苧蘭．苧堂皇竺要蘭蘭蘭．．．．導(dǎo)師蛙奢 ．， ±壅塞墼絲．豎鰱生．塾楚一． 一完成

2、時(shí)聞 。 墨一殳旦．．．查．．至：主，．墨。。．。 一中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)博| ：論文 摘要衍射能力較差，無(wú)論是在本實(shí)驗(yàn)室還是在北京高能所，衍射最高分辨率都只能在2 ．8A 左右，且鑲嵌度很高，在初步獲得的晶體結(jié)構(gòu)中，溫度因子平均達(dá)到8 0 A 2以上，并且在一些重要的環(huán)區(qū)域的氨基酸電子云密度極差，整體結(jié)構(gòu)顯示，晶體有明顯缺陷，還需要進(jìn)一步優(yōu)化晶體生長(zhǎng)，以期獲得堆積效果更好的蛋白質(zhì)晶體。同時(shí)，有文獻(xiàn)報(bào)道，原卟啉九是A L A D 酶的重要抑

3、制物，考慮到人類一系列與血卟啉相關(guān)的疾病都與A L A D 的酶失活相關(guān)，而原卟啉九正是這一代謝途徑下游的中間產(chǎn)物，推測(cè)原卟啉九可能在此系列疾病中有相關(guān)的致病機(jī)制，為此，我們還需要獲得A L A D 的酶與原卟啉九的復(fù)合物晶體結(jié)構(gòu)。這個(gè)酶的最適p H 范圍比較寬，熱穩(wěn)定性較好。測(cè)序結(jié)果顯示的酶活中心含有保守的C y s 和H i s 殘基，推測(cè)此酶為Z n 依賴性酶，在酶液中加入E D T A 后完全喪失酶活，加入C u 2 + 和H

4、9 2 + 顯著地抑制了酶活，這些都迸一步證明枯草桿菌A L A D 是Z n 依賴性酶，而K + 、L i + 、M ，+ 、M n 2 + 和F e n 都顯著地增加了酶活力，表明無(wú)論是單價(jià)還是三價(jià)的金屬離子都可以增加該酶活力。由于枯草桿菌A L A D 是含有C y s 殘基的酶，所以加入B ．巰基乙醇后酶活有所增加，但是隨著加入的二硫蘇糖醇濃度的增大酶活卻逐漸減弱，推測(cè)它影響酶活中心半胱氨酸和金屬離子的結(jié)合，這一點(diǎn)與所報(bào)道的其它

5、物種的A L A D 的性質(zhì)有很大的差別。A b s t r a c t1 ．C r y s t a lS t r u c t u r eo f H u m a n U p s t r e a mB i n d i n g F a c t o rH M G D o m a i n5a n dS i t ef o r t h eC e l l C y c l e R e g u l a t o r yF a c t o r T A F I

6、 B i n d i n gT h ef i f t hH M G b o xd o m a i ni nh u m a n u p s t r e a m b i n d i n gf a c t o r c o n t r i b u t e st or R N As y n t h e s i sb yR N A p o l y m e r a s eI ( p o lI ) ．H e r e ，t h e 2 ．0A r e s

7、 o l u t i o nc r y s t a ls t r u c t u r eo ft h i sp r o t e i nh a s b e e ns o l v e du s i n gs i n g l e w a v e l e n g t ha n o m a l o u sd i s p e r s i o nm e t } I o d( S A D ) ．T h ec r y s m ls t r u c t u

8、 r ea n d t h er e p o r t e dN M R s t r u c t u r eh a v er ．m ．s ．d e v i a t i o no f2 ．1 8 ．3 ．0 3 A f o rt h eC 。a t o m s ．H o w e v e r , t h e r e a r es i g n i f i c a n td i f f e r e n c e sb e t w e e n t h

9、 et w os t r u c t u r e s w i t hl a r g e s t d i s p l a c e m e n tu pt o 9 ．0 A ．C o m p a r e dw i t ho t h e rH M Gb o x e s s t r u c t u r e s ，t h e L m ．s ．d e v i a t i o n sf o rC oa t o m sb e t w e e n h U