微囊藻毒素對(duì)小鼠肝毒性和抗氧化系統(tǒng)的影響.pdf

1、本文主要研究了經(jīng)腹腔注射和口服染毒微囊藻毒素對(duì)小鼠的亞慢性肝毒性和對(duì)小鼠抗氧化系統(tǒng)的影響。 實(shí)驗(yàn)所用微囊藻采自河南省南灣水庫(kù)，水樣鏡檢結(jié)果表明，南灣水庫(kù)微囊藻的主要種類為銅綠微囊藻，用MA培養(yǎng)基進(jìn)行大量培養(yǎng)；采用水浴法提取獲得微囊藻細(xì)胞抽提物，經(jīng)HPLC分析，細(xì)胞抽提物中微囊藻毒素的總含量為1.581μg/mg干重培養(yǎng)物，其中微囊藻毒素LR的含量為1.51μg/mg干重培養(yǎng)物，微囊藻毒素YR含量為0.008μg/mg干重培養(yǎng)物。

2、24小時(shí)急性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，微囊藻細(xì)胞抽提物對(duì)小鼠腹腔注射的LD50為33.34μgMCs/kg，灌胃口服染毒的LD50為1.8815mgMCs/kg。 首先研究了低劑量微囊藻毒素的亞慢性肝毒性。將昆明雄性小鼠隨機(jī)分為4組，每組5只(3個(gè)處理組和1個(gè)對(duì)照組)，設(shè)一個(gè)重復(fù)。處理組每天分別經(jīng)腹腔注射單位體重微囊藻毒素3.33，4.76，6.67μg/kg，對(duì)照組注射等量生理鹽水，連續(xù)注射四周。取材后觀察小鼠血清乳酸脫氫酶、谷丙轉(zhuǎn)氨

3、酶和堿性磷酸酶活性和肝臟病理學(xué)變化。結(jié)果表明乳酸脫氫酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶在3.33μgMCs/kg出現(xiàn)了統(tǒng)計(jì)學(xué)上的升高，在4.76，6.67μgMCs/kg劑量下更為明顯。堿性磷酸酶在低劑量(3.33μgMCs/kg)下沒(méi)有改變，在中劑量(4.76μgMCs/kg)和高劑量下(6.67μgMCs/kg)時(shí)才出現(xiàn)顯著增加。處理組的小鼠肝臟組織出現(xiàn)了病理?yè)p傷，低劑量組的癥狀主要是細(xì)胞連接變得疏松，中劑量組還出現(xiàn)Kuffer細(xì)胞和嗜堿性細(xì)胞增多，高

4、劑量組變形細(xì)胞、凋亡細(xì)胞增多，同時(shí)還發(fā)現(xiàn)了組織出血。這一結(jié)果表明，血清酶的變化和肝損傷的程度有相關(guān)性，人們可以把檢測(cè)血清酶活性的變化作用檢測(cè)微囊藻毒素是否對(duì)人體肝臟造成損害的一個(gè)輔助指標(biāo)。 在研究腹腔注射對(duì)小鼠亞慢性肝毒性的同時(shí)，還采用灌胃法研究了微囊藻毒素亞慢性染毒對(duì)小鼠抗氧化防御系統(tǒng)的影響。將雄性昆明小鼠隨機(jī)分為2組，每組20只(1個(gè)處理組和1個(gè)對(duì)照組)，設(shè)一個(gè)重復(fù)。處理組每天通過(guò)灌胃口服暴露210μg/kg微囊藻毒素(大約

5、為L(zhǎng)D50的1/10)，對(duì)照組灌等量的生理鹽水。結(jié)果表明，谷胱甘肽含量從第二周開(kāi)始出現(xiàn)明顯下降。谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶活性在第四周時(shí)發(fā)生顯著性升高，提示GST作為解毒Ⅱ相酶催化的微囊藻毒素和GSH結(jié)合速率的增高，從而加快了機(jī)體對(duì)微囊藻毒素的清除。CAT活性在第三周和第四周下降，而SOD活性在第四周升高，表明微囊藻毒素處理后導(dǎo)致H2O2積累，使得氧化損傷加強(qiáng)。在本實(shí)驗(yàn)中未發(fā)現(xiàn)小鼠肝臟脂質(zhì)過(guò)氧化發(fā)生明顯變化。這一結(jié)果表明，微囊藻毒素處理小鼠后，小