核桃分心木水提液化學成分及抗腫瘤活性分析.pdf

1、分心木（Diaphragma juglandis Fructus)是胡桃科植物核桃果核內的干燥木質隔膜，也是一種傳統(tǒng)中藥材，《中藥大辭典》記載其主要用于治療腎虛、尿頻、痢疾等疾病，現(xiàn)代醫(yī)學研究表明分心木具有抑菌、補腎、抗氧化、抗腫瘤等藥理功能。在日常生活中，人們常用來泡茶飲用。目前針對核桃分心木水提液化學成分及生理活性方面的研究鮮有報道。本文以核桃分心木水提液為研究對象，系統(tǒng)的研究了其易揮發(fā)性成分，建立了液質聯(lián)用分析核桃分心木水提液化學

2、成分的新方法，同時評價了分心木水提物體外抗腫瘤活性，并對其誘導癌細胞凋亡的分子機制進行了初步探索。主要研究內容及結論如下：
　?。?）對核桃分心木水提液易揮發(fā)性成分進行了分析
　　對核桃分心木水提液中易揮發(fā)性成分在4種不同萃取特性的固相微萃取頭上的富集條件進行了選擇，并對其在2種色譜柱（HP-5和RTX-WAX）上的分離條件進行了優(yōu)化，建立了頂空固相微萃取（HS-SPME）和氣相色譜-質譜聯(lián)用（GC-MS）的分析方法，并討論

3、了不同色譜柱和萃取頭對分析其易揮發(fā)性成分的影響。通過對4種萃取頭上的富集物經(jīng)2種色譜柱分離后的質譜結果分析，確定結構的化合物共115種，其中醇類化合物21種、酯類化合物18種、酮類化合物15種、芳香族化合物14種、烴類化合物13種、醛類化合物12種、酸類化合物6種、酚類化合物5種、醚類化合物2種、其他類型化合物9種。主要易揮發(fā)性成分是乙酸、乙酸乙酯、2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚、薄荷醇、雪松醇、2,3-丁二醇、1-己醇、苯乙醇、3-叔

4、丁基-4-羥基苯甲醚、己醛、甘菊藍。
　?。?）對核桃分心木水提液難揮發(fā)物進行了液質聯(lián)用分析
　　對核桃分心木水提液難揮發(fā)物的液相色譜分離條件進行了選擇，利用液相色譜-串聯(lián)超高分辨率的精確質量四級桿-飛行時間質譜(HPLC-Q-TOF-MS)對核桃分心木水提液中難揮發(fā)、高沸點以及熱穩(wěn)定性差的化學成分進行了分析，建立了分心木化學成分分析的新方法。確定結構的有：沒食子酸、兒茶素、槲皮苷、4-甲基傘形酮-β-D-葡萄糖苷和鞣花酸5

5、種化合物。其中：槲皮苷、4-甲基傘形酮-β-D-葡萄糖苷、鞣花酸均為首次報道；該分析方法操作簡單，靈敏度高，結果可靠。
　?。?）對分心木水提物體外抗腫瘤活性及分子機制進行了初步探討
　　利用MTT法、流式細胞術評估了分心木水提物體外抑制HCT-116人直結腸癌細胞增殖的能力，結果表明：分心木水提物在濃度50~400μg/mL范圍內，對癌細胞增殖抑制效果顯著，且該效果呈劑量依賴性，其IC50值為（208.78±4.22）μg