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1、中文 中文 2750 字Journal of Ocean University Of China ISSN 1672-5182,4 卷,第 卷,第 3 期, 期,7.30,2005,pp.248-251高效液相色譜檢測(cè)法對(duì)鯉魚肌肉中甲基睪酮?dú)埩粑锏某醪津?yàn)證摘要 摘要:在中國(guó),將合成代謝類固醇甲基睪酮(MT)為生長(zhǎng)促進(jìn)劑是被明文禁止的。食物中對(duì)甲基睪酮?dú)埩舻姆治鼋Y(jié)果表明殘留物是不可缺少的。用高效液相色譜法(即三氯甲烷 - 甲醇與液 - 液
2、萃取的方法)檢測(cè)鯉魚肌肉組織的初步驗(yàn)證結(jié)果參照以下參數(shù):恢復(fù)性(準(zhǔn)確度)在 1,5 和 10mg/kg 之間,組間和組內(nèi)檢測(cè) CV 值(重復(fù)性,也被稱為相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD) )以及檢測(cè)限制之間?;謴?fù)性在 80%以上,肌肉組織及組間和組內(nèi) CV 值低于 10%,檢測(cè)限值為0.05mg/kg。關(guān)鍵字: 關(guān)鍵字:甲基睪酮、液-液萃取、高效液相色譜法、驗(yàn)證1.前言甲睪酮(MT)是一種合成的促蛋白合成類固醇,且已作為一種促生劑廣泛適用于畜牧業(yè)和
3、水產(chǎn)養(yǎng)殖。然而,甲基睪酮引起的人類食品安全問題仍然是一個(gè)懸而未決的問題。人類長(zhǎng)期接觸甲睪酮對(duì)健康會(huì)帶來(lái)不利的影響,如肝中毒(韋斯特比等人,1977 年; 盧西,1987 年; 哈特勒布,1990 年)和胎兒毒性(格倫巴赫,1960 年; 沙爾丁,1980 年) 。因此,人類攝入有甲基睪酮?dú)埩粑锏聂~類時(shí),會(huì)對(duì)自身健康帶來(lái)很大的危害。歐洲共同體的國(guó)家使用甲基睪酮(如甾體激素)以達(dá)到使牛育肥的目的,而這自 1988 年以來(lái)已被禁止。1999
4、年,我國(guó)就已經(jīng)禁止將甲基睪酮作為生長(zhǎng)促進(jìn)劑。然而,在水產(chǎn)品中并沒有對(duì)甲基睪酮?dú)埩粑锏姆治鰳?biāo)準(zhǔn)。因此,我們很有必要對(duì)這些已經(jīng)禁令產(chǎn)品的使用做一次篩選分析和調(diào)查。為了保證肉類產(chǎn)品的安全,人們已在廣泛研究甲基睪酮?dú)埩粑锏臋z測(cè)方法。肉類等合成代謝類固醇的檢測(cè)比其他常用基體(比如尿液和血漿)更加復(fù)雜。ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn))一般是用作篩查尿液的一個(gè)更加快捷的方法中蒸發(fā)至干。殘留物溶解在 2 毫升流動(dòng)相和 20μL 每個(gè)樣品注入到高效液相色譜
5、系統(tǒng)。2.5 2.5 甲睪酮高效液相色譜檢測(cè)方法 甲睪酮高效液相色譜檢測(cè)方法色譜系統(tǒng)包括所有從安捷倫以下組件(安捷倫,HP1100 型,美國(guó)):C18 反相色譜柱(4.6mm×250 mm,柱填料粒徑 5μm) ,泵系列系統(tǒng),G1314AVWD 探測(cè)器覆蓋范圍為 190 - 600 nm 的調(diào)整,以 254 nm 和 20μL 循環(huán)噴油。柱溫為 30 ° C.流動(dòng)相為甲醇(70%)/水(30%) 。流速為
6、 0.8 mL min - 1 的。進(jìn)樣量為 20μL。2.6 2.6 驗(yàn)證 驗(yàn)證確定恢復(fù)參數(shù)的檢測(cè)方法的準(zhǔn)確性。用甲基睪酮標(biāo)準(zhǔn)溶液回收率實(shí)驗(yàn)確保在 10.00g 鯉魚肉里分別 1 mg kg-1,5 mg kg-1 和 10 mg kg-1。同時(shí),制備空白樣品。之間的運(yùn)行和內(nèi)部運(yùn)行 CV 值的重復(fù)性參數(shù)精密的檢測(cè)方法是確定的。三種魚肉樣品進(jìn)行分析時(shí)確保每個(gè)設(shè)防水平之間的運(yùn)行 CV 值在 1 mg kg-1, 5
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