液相微萃取前處理結(jié)合高效液相色譜法在農(nóng)藥殘留分析中的應(yīng)用.pdf

1、樣品預(yù)處理,是分析過程中最重要、最關(guān)鍵的步驟,尤其是分析復(fù)雜基質(zhì)樣品中痕量組分時,樣品預(yù)處理技術(shù)往往成為分析成功與否的關(guān)鍵。樣品預(yù)處理的目的不僅是從樣品中分離出目標(biāo)分析物,從而減少或消除其他組分的干擾,同時還要對分析物進(jìn)行濃縮以實現(xiàn)痕量測定。傳統(tǒng)的樣品前處理技術(shù)如液液萃取、固相萃取,存在操作繁瑣耗時,需要使用大量的對人體和環(huán)境有毒或有害的有機(jī)溶劑等缺點。所以多年來人們致力于建立省時、高效、有機(jī)溶劑使用量少的樣品前處理技術(shù)。液相微萃取(L

2、iquid phase microextraction,LPME)是近年來發(fā)展起來的一種操作簡單、成本低、有機(jī)溶劑用量少、環(huán)境友好的樣品前處理新技術(shù),受到國內(nèi)外研究工作者的廣泛關(guān)注。
　　 本論文將液相微萃取與高效液相色譜(High performance liquid chromatography,HPLC)技術(shù)相結(jié)合建立了水樣、土樣和蔬菜等樣品中多種農(nóng)藥殘留的檢測方法。在系統(tǒng)查閱有關(guān)文獻(xiàn)資料的基礎(chǔ)上,主要進(jìn)行了以下研究工作:

3、
　　 (1)由于農(nóng)藥的廣泛使用而造成的水污染問題,已經(jīng)成為一個嚴(yán)重的全球環(huán)境問題,監(jiān)測水環(huán)境中的農(nóng)藥殘留對保障人類健康和保護(hù)環(huán)境都具有重要意義。本文將分散液液微萃取(DLLME)與高效液相色譜聯(lián)用建立了水樣中的4種氨基甲酸酯類農(nóng)藥(呋喃丹、西維因、抗蚜威和乙霉威)殘留的測定方法。對影響DLLME的實驗條件進(jìn)行了優(yōu)化,包括萃取劑和分散劑的種類及其用量、萃取時間和鹽濃度等。在優(yōu)化實驗條件下4種氨基甲酸酯類農(nóng)藥的富集倍數(shù)可達(dá)101～

4、145倍,線性范圍為5～500ng／mL,線性相關(guān)系數(shù)為0.9978～0.9998。檢出限(S／N=3)在0.4～1.0 ng／mL之間,該方法成功的應(yīng)用于實際水樣中4種氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留的測定,加標(biāo)回收率在76.0％～94.0％之間,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSDs為4.7％～6.5％(n=5)。
　　 (2)將分散液液微萃取與高效液相色譜熒光檢測(HPLC-FD)相結(jié)合,建立了一種測定水樣和土樣中多菌靈和噻菌靈的方法。在該方法中,將含

5、有0.75 mL四氫呋喃(作為分散劑)和80.0μLCHCl3(作為萃取劑)的混合溶液用微量進(jìn)樣器快速注入5.00 mL樣品溶液中。在此過程中,水相中的待測物被萃取到CHCl3的小液滴中,然后離心分離,將萃取劑轉(zhuǎn)移到另一個錐形試管中,室溫下氮?dú)獯蹈?用1.5.μL甲醇將殘余物溶解,取10.0μL進(jìn)行色譜分析?？疾炝烁鞣N實驗參數(shù)的影響,如萃取劑和分散劑的種類、體積,萃取時間,鹽濃度的影響等。在最佳的實驗條件下,該方法對多菌靈和噻菌靈的富集

6、因子分別為149和210,絕對回收率分別為50.8％和70.9％,線性范圍分別為5～800 ng／mL(水樣),10～1000 ng／g(土樣),線性相關(guān)系數(shù)(r)介于0.9987至0.9997之間。檢出限(LOD,S／N=3)分別為0.5～1.0 ng／mL(水樣),1.0～1.6 ng／g(土樣),相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSDs為3.5％～6.8％(n=5),加標(biāo)回收率在82.0％～94.0％之間,且所建立的方法已被用于實際水樣和土樣的分析。

7、
　　 (3)將分散液液微萃取與高效液相色譜二極管陣列檢測(HPLC-DAD)聯(lián)用,建立了測定水樣中四種磺酰脲類除草劑(甲磺隆、氯磺隆、芐嘧磺隆、氯嘧磺隆)的新方法。考察了各種實驗參數(shù)的影響,如萃取劑和分散劑的種類、體積,萃取時間,鹽濃度的影響等。在最佳的實驗條件下,該方法對四種磺酰脲類除草劑的富集因子在102～216之間,線性范圍為1.0 ng／g～100 ng／g,線性相關(guān)系數(shù)為0.9982～0.9995,檢出限為0.2 n

8、g／g～0.3 ng／g,該方法已成功應(yīng)用于水樣(河水、溪水和井水)中四種除草劑的分析,并得到了滿意的分析結(jié)果。
　　 (4)將分散固相萃取(DSPE)結(jié)合分散液液微萃取(DLLME)與高效液相色譜二極管陣列檢測聯(lián)用建立了測定土壤中四種磺酰脲類除草劑(甲磺隆、氯磺隆、芐嘧磺隆、氯嘧磺隆)‘的新方法。在DSPE-DLLME方法中,首先用丙酮-0.15 mol／L碳酸氫鈉(2:8,v／v)為提取液,從土壤中提取磺酰脲類除草劑,然后對

9、提取液進(jìn)行DSPE凈化處理,即直接在提取液中加入吸附劑C18,搖動并過濾,用2 mol／L的HCl調(diào)節(jié)濾液的pH為2.0,取濾液5.0 mL,并加入60μL氯苯(用作萃取劑)進(jìn)行分散液液微萃取。濾液中的丙酮起分散劑的作用。在最優(yōu)條件下,對四種磺酰脲類除草劑的富集因子在102～216之間,該方法的線性范圍為5.0 ng／g～200 ng／g,線性相關(guān)系數(shù)為0.9967～0.9987,檢出限為0.5 ng／g～1.2 ng／g,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差

10、為5.2％～7.2％(n=5)。加標(biāo)濃度分別在6.0,20.0和60.0 ng／g時,相對回收率在76.3％～92.5％之間,該方法已成功應(yīng)用于土壤樣品中四種除草劑的分析,并得到了滿意的分析結(jié)果。
　　 (5)將分散固相凈化與分散液液微萃取相結(jié)合,采用高效液相色譜法建立了測定蔬菜中四種煙堿類殺蟲劑(噻蟲嗪、吡蟲啉、啶蟲咪、噻蟲啉)的新方法。在DSPE-DLLME中,首先用乙腈為提取液,從蔬菜中提取煙堿類殺蟲劑,然后對提取液進(jìn)行D

11、SPE凈化處理,即直接在提取液中加入吸附劑伯仲胺(PSA)和多壁碳納米管(MWCNTs)進(jìn)行凈化處理,然后取上清液2.5 mL,加入到含有10 mL水,0.8 gNaCl和200μL氯仿(用作萃取劑)的離心管中進(jìn)行DLLME。在最優(yōu)條件下,對四種煙堿類殺蟲劑的富集因子在110與243之間,該方法的線性范圍為5.0 ng／g～300ng／g,線性相關(guān)系數(shù)為0.9989～0.9998,檢出限為0.5 ng／g～1.0 ng／g,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差

12、為3.6％～5.8％(n=5)。該方法已成功應(yīng)用于黃瓜和西紅柿樣品中四種煙堿類殺蟲劑的分析,四種煙堿類殺蟲劑在加標(biāo)10.0和50.0 ng／g的添加水平范圍內(nèi),相對回收率在76.3％～97.5％(n=5)之間。
　　 (6)建立了超聲乳化液相微萃取(USAEME)與高效液相色譜聯(lián)用測定土樣中5種三嗪類除草劑(西瑪津、阿特拉津、撲滅通、莠滅凈和撲草凈)的新方法?？疾炝擞绊慤SAEME萃取效率的諸因素:萃取劑的種類和用量、溶液pH值

13、、鹽的濃度、超聲乳化萃取的溫度和時間等。在優(yōu)化的實驗條件下,該方法對五種三嗪類除草劑的富集倍率為148～225,檢出限為0.1～0.5 ng／g(S／N=3)。西瑪津在5～200 ng／g,阿特拉津、撲滅通、莠滅凈和撲草凈在1.0～200.0 ng／g范圍內(nèi)線性良好,線性相關(guān)系數(shù)為0.9991～0.9998,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.8％～3.6％(n=5)。在土壤中加標(biāo)5.0和50.0ng／g的水平范圍內(nèi),平均回收率在82.6％～92.0％之

14、間,該方法已成功應(yīng)用于土壤樣品中5種三嗪類除草劑的分析,結(jié)果表明該方法簡單、快速、高效且對環(huán)境友好。
　　 (7)將表面活性劑輔助超聲乳化液相微萃取(UASEME)與高效液相色譜二極管陣列檢測聯(lián)用,建立了測定水樣中的六種氨基甲酸酯類農(nóng)藥(速滅威、呋喃丹、西維因、抗蚜威、異丙成和乙霉威)的新方法。在UASEME技術(shù)中,Tween20為乳化劑,氯苯和氯仿為二元萃取劑,不使用任何分散劑?？疾炝擞绊戄腿⌒实母鞣N實驗參數(shù)的影響,如萃取劑

15、的種類和體積、表面活性劑的種類和濃度、超聲乳化時間、鹽濃度的影響等。在最佳的實驗條件下,富集因子在170～246之間,檢出限為0.1～0.3ng／mL,定量限為0.3～0.9 ng／mL。速滅威,西維因,抗蚜威和乙霉威在0.3～200 ng／mL,呋喃丹在0.6～200 ng／mL,異丙威在0.9～200 ng／mL范圍內(nèi)線性良好,線性相關(guān)系數(shù)為0.9982～0.9998,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.2％～4.8％。水樣中加標(biāo)1.0,10.0,5

16、0.0和100.0 ng／mL時,目標(biāo)分析物的加標(biāo)回收率為81.0％～97.5％,該方法已成功應(yīng)用于實際水樣(河水,水庫水和井水)中六種氨基甲酸酯類農(nóng)藥的測定,結(jié)果表明該方法簡單、實用且環(huán)境友好。
　　 (8)應(yīng)用分散懸浮凝固化液相微萃取與高效液相色譜二極管陣列檢測聯(lián)用技術(shù),建立了水樣中四種三唑類農(nóng)藥(腈菌唑、戊唑醇、三唑醇、己唑醇)的分析測定方法。實驗考察了影響萃取效率的各種實驗參數(shù)的影響,如萃取劑、分散劑的種類和體積、萃取時