飼料中串珠鐮刀菌素高效液相色譜檢測(cè)法的建立.pdf

1、串珠鐮刀菌素(Moniliformin，MON)是一種廣泛存在于世界各國(guó)的玉米，大米，小麥等糧食和飼料原料中的水溶性的毒素。串珠鐮刀菌素對(duì)動(dòng)物的心臟、免疫系統(tǒng)等多種組織器官均有損害，造成畜禽食欲不振、生長(zhǎng)緩慢，甚至引起死亡，嚴(yán)重危害畜牧業(yè)生產(chǎn)。因此，飼料中串珠鐮刀菌素的限量標(biāo)準(zhǔn)問題已經(jīng)提上日程。為配合該限量標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)施，需要建立相應(yīng)的檢測(cè)方法。
　　 本研究旨在建立一種標(biāo)準(zhǔn)化的檢測(cè)飼料原料和飼料產(chǎn)品中串珠鐮刀菌素含量的高效液相色譜

2、法，并用此方法測(cè)定我國(guó)部分飼料原料及產(chǎn)品中的串珠鐮刀菌素含量。主要研究結(jié)果如下:
　　 樣品的提取程序:飼料樣品粉碎后過40目篩并混勻，樣品中的串珠鐮刀菌素用四丁基硫酸氫銨溶液提取并配對(duì)，配對(duì)后的串珠鐮刀菌素即可用二氯甲烷萃取，萃取液在氮?dú)獗Ｗo(hù)下35℃濃縮近干。殘?jiān)昧鲃?dòng)相重定溶，定溶液經(jīng)強(qiáng)陰離子交換固相萃取柱凈化后以0.05mol/L磷酸二氫鈉溶液洗脫并過濾，過濾液即可上機(jī)檢測(cè)。
　　 高效液相色譜條件及參數(shù):C18反

3、相色譜柱（4.6×150mm，粒徑5μm），流動(dòng)相為含有離子對(duì)改性劑的乙腈-水(8+92)，流速1.0mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)227nm，柱溫35℃，進(jìn)樣量20μL。串珠鐮刀菌素的保留時(shí)間在11-13min之間，毒素濃度在0.01-4.0μg/mL時(shí)與峰面積的線性方程為y=306948x+7376.3，R2=0.9998。本方法對(duì)于串珠鐮刀菌素純品的檢出限為0.0025μg/mL，對(duì)于玉米樣品中的串珠鐮刀菌素的檢測(cè)定量限為0.025mg/

4、kg。精密度試驗(yàn)表明平行性變異系數(shù)在7.33％-9.40％之間，重現(xiàn)性變異系數(shù)在7.89％-12.8％之間，再現(xiàn)性變異系數(shù)在4.01％-9.01％之間?？傮w回收率在0.025-4mg/kg水平時(shí)為75.3％-93.4％，變異系數(shù)為1.13％-12.9％。
　　 飼料樣品中串珠鐮刀菌素的檢測(cè)結(jié)果:共搜集了205個(gè)飼料樣品，測(cè)得串珠鐮刀菌素陽(yáng)性率為47.3％，平均含量為0.113mg/kg。其中豬配合飼料的陽(yáng)性率最高，達(dá)75.9％，