堅果中還原型谷胱甘肽(GSH)和蛋白巰基(P-SH)含量的測定.pdf

1、概述了堅果中含有的營養(yǎng)成分和現(xiàn)階段對堅果的研究情況，介紹了細胞內巰基化合物在生物體內的重要作用及其常用的分析檢測方法，并提出堅果中谷胱甘肽等含半胱氨酸殘基的巰基化合物的測定方法及其研究的重要意義，概述了本研究的選題思路和主要研究內容。
　　HPLC法測定四種食用堅果種子中還原型谷胱甘肽(GSH)和蛋白巰基(P-SH)含量
　　用5，5'-二硫雙-2-硝基苯甲酸(DTNB)為柱前衍生化試劑，在細胞超聲破壁的同時立即與衍生化試劑

2、反應，做到同步提取，HPLC梯度洗脫法測定了開心果、巴旦木、澳洲堅果、腰果干品中谷胱甘肽(GSH)和含半胱氨酸殘基的蛋白巰基(P-SH)含量。結果發(fā)現(xiàn)四種堅果均含較豐富的GSH和P-SH巰基，其含量分別為，開心果:GSH=1.2303μmol/g，P-SH=3.5414μmol/g，巴旦木:GSH=0.3069μmol/g，P-SH=1.9541μmol/g，澳洲堅果:GSH=1.5708μmol/g，P-SH=0.5905μmol/g

3、，腰果:GSH=0.3373μmol/g，P-SH=2.2458μmol/g。在優(yōu)化的選定條件下，測定方法的回收率為99.37％～101.45％，GSH和P-SH測定檢測限分別為0.1386μmol/g和0.2184μmol/g。本研究對堅果活性成分的構成及其巰基化合物在保健防病作用研究及其功能性食品開發(fā)均提供了有用的參考數據。
　　光譜法測定四種食用堅果種子中谷胱甘肽(GSH)和總巰基(-SH)的含量
　　利用鄰苯二甲醛(

4、OPA)和5，5'-二硫雙-2-硝基苯甲酸(DTNB)為衍生化試劑，通過熒光光譜法和UV-vis吸收光譜法，測定了堅果中還原型谷胱甘肽(GSH)和總巰基(-SH)的含量。測定結果表明:堅果中富含GSH和總巰基，開心果GSH=1.0847μmol/g、-SH=5.0001μmol/g澳洲堅果GSH=1.4720μmol/g、-SH=2.4774μmol/g，腰果GSH=0.3255μmol/g、-SH=2.9302μmol/g，巴旦木 G

5、SH=0.2890μmol/g、-SH=2.7627μmol/g。回收率范圍為99.72％～100.90％和98.66％～100.75％。
　　堅果中可能的共存組分對測定的影響
　　探究了堅果中的維生素、氨基酸、不飽和脂肪酸等其他活性營養(yǎng)物質對本研究中還原型谷胱甘肽(GSH)和總巰基(-SH)測定的影響。測定結果表明在光譜法測定中較高濃度的維生素和不飽和脂肪酸可能會對結果產生一定的影響，導致總巰基的含量測定結果偏高，而色譜法