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文檔簡介
1、本研究用與半胱氨酸殘基的巰基化合物進行選擇性衍生化作用的衍生化試劑、利用改進的前處理方法,分別用HPLC法和光譜分析的方法,經(jīng)過篩選分別測定了蜂花粉和葎草果穗中的還原型谷胱甘肽(GS H)和總巰基(-SH)含量。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn);蜂花粉中含豐富的GSH和含巰基蛋白,這些巰基化合物是構(gòu)成蜂花粉的重要的活性成分。葎草作為生長迅速、具有抗逆性(抗低溫、抗旱)的草本類植物,其果穗中也含有豐富的GSH和含巰基蛋白,意味著其對低溫、干旱的抗逆性可能與其
2、含豐富的巰基化合物有關(guān)。葎草果穗細胞在重金屬脅迫中,其巰基含量具有與重金屬脅迫具有明顯的應(yīng)答作用,說明其對重金屬脅迫的抗逆性可能也與胞內(nèi)巰基化合物的相互作用有關(guān)。
本研究主要內(nèi)容包括:⑴利用DTNB為衍生化試劑,高效液相色譜法測定蜂花粉中GSH的含量蜂花粉中GSH和總巰基含量分別為2.1132-2.2106molg-1和4.4288-4.3965molg-1,方法的回收率達101.84%和100.81%,其檢測限分別為5.43
3、μmolL-1和4.26μmolL-1。⑵光譜法測定蜂花粉中總巰基和GSH的含量。蜂花粉中總巰基和GSH的含量分別為4.7687-4.9075μmo lg-1和1.9079-1.9098μmolg-1,兩種方法的回收率分別達98.32%和101.44%,檢測限分別為0.39μmolL-1和3.58μmolL-1。⑶采用細胞破壁、衍生化為一體的同步衍生化的前處理方法,利用OPA衍生化熒光分光光度法和 DTNB衍生化 UV-vis分光光度法
4、測定了葎草果穗中GSH和總巰基的含量。葎草果穗中GSH和總巰基的含量為0.1671-0.1720μmolg-1和1.9937-2.2973μmolg-1,回收率達95.53%和100.78%,其檢測限分別為0.5725μmolL-1和0.1632μmo lL-1。⑷用葎草果穗作為細胞樣本,利用光譜法研究不同重金屬脅迫時巰基化合物的應(yīng)答作用,從而探討了GSH等巰基化合物與Cd、Pb、Fe、Cu等重金屬與胞內(nèi)巰基化合物的相互作用,為生物細胞
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