富含A型原花青素的蔓越莓濃縮物體內(nèi)延緩衰老功能研究.pdf

1、蔓越莓（Cranberry）作為一種低熱量、高纖維、富含多種營養(yǎng)物質(zhì)的水果，被譽為北美三大傳統(tǒng)水果之一，其制品也正逐漸被引入中國市場。由于蔓越莓中含有大量植物活性物質(zhì)，尤其是其獨特的A型原花青素，能有效保持泌尿道的健康，近年來越來越受到人們的關(guān)注。本文以富含A型原花青素的蔓越莓濃縮物(CBC)為研究對象，以富含B型原花青素的葡萄籽提取物(GSE)作為對照品，對其進行了有關(guān)主要成分的分析鑒定、小鼠體內(nèi)延緩衰老和調(diào)節(jié)氧化還原狀態(tài)的功能，以及

2、端粒保護作用的研究。得出以原花青素A2為主要生物活性物質(zhì)的CBC能從調(diào)節(jié)體內(nèi)氧化還原狀態(tài)和端粒保護兩方面發(fā)揮延緩衰老的作用，相比以（表）兒茶素和原花青素B2為主要生物活性物質(zhì)的GSE，CBC在谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性的調(diào)節(jié)、端粒保護方面的作用效果更加理想，提示CBC作為一種延緩衰老的功能性食品具有巨大潛力。詳細研究內(nèi)容和結(jié)果如下:
　　1、主要成分含量分析
　　采用GB法對CBC和GSE中的水分、灰分、脂肪、蛋

3、白質(zhì)、總黃酮、總原花青素、抗壞血酸和維生素E（以α-生育酚計）的含量送行檢測。結(jié)果顯示CBC與GSE中最主要的活性物質(zhì)均為原花青素。CBC中原花青素含量為15.6 g/kg，GSE中原花青素含量為309.0 g/kg。
　　2、原花青素的組成分析與結(jié)構(gòu)鑒定
　　采用Q-Extractive組合型四極桿/軌道阱高分辨質(zhì)譜法(QE)對CBC和GSE原花青素的組成（即不同聚合度的原花青素）成分進行分析，結(jié)果顯示CBC中最主要的酚類

4、活性物質(zhì)為原花青素A2，其次為（表）兒茶素;而GSE中最主要的酚類活性物質(zhì)為（表）兒茶素和原花青素B2。
　　3、體內(nèi)氧化還原狀態(tài)調(diào)節(jié)與延緩衰老作用
　　采用D-半乳糖致衰小鼠模型，以水溶性維生素E作為陽性對照，連續(xù)8周將15mg/kg/d、30 mg/kg/d、60 mg/kg/d（劑量以總原花青素含量計）的CBC和GSE分別對受試小鼠進行灌胃。結(jié)果顯示CBC和GSE可使肝臟丙二醛（MDA，以硫代巴比妥反應(yīng)物TBARS的量

5、表示）含量降低30％-57％，使大腦MDA含量降低24％-30％，使血漿8-異前列腺素含量降低11％-62％。同時CBC和GSE可使大腦的單胺氧化酶(MAO)活力降低27％-59％，使血漿MAO活力降低65％-71％。高劑量組（60 mg/kg/d）的CBC可使肝臟的GSH-Px水平顯著提高42％(p＜0.05)，而中劑量組（30 mg/kg/d）的GSE則使肝臟的超氧化物歧化酶(SOD)水平提高了13％(p＜0.05)。以上結(jié)果表明，

6、CBC和GSE均能通過調(diào)節(jié)體內(nèi)氧化還原狀態(tài)而延緩衰老。但是CBC對肝臟和血清中GSH-Px活性調(diào)節(jié)效果明顯，而GSE對GSH-Px活性無調(diào)節(jié)作用，而兩者對過氧化氫酶(CAT)的活性均無顯著影響。
　　4、基于端粒保護的延緩衰老作用
　　采用實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法測定各組小鼠肝臟和睪丸的相對端粒長度(TL)，發(fā)現(xiàn)低劑量組的CBC能顯著抑制肝臟和睪丸中因D-半乳糖致衰而導致的端粒長度縮短(p＜0.05)，從而

7、起到有效保護端粒的作用，但GSE卻沒有這方面的作用效果。采用蛋白質(zhì)印跡法(Western Blot)進行端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶基因tert和長壽基因sirt6表達水平的檢測，發(fā)現(xiàn)中、高劑量組的CBC和低劑量組GSE均能顯著降低睪丸中tert蛋白表達水平(p＜0.05)，但只有低劑量組的CBC能顯著降低肝臟中的tert蛋白表達水平(p＜0.05)，提示CBC和GSE均可通過降低端粒酶活性從而預防細胞癌變的效果，但作用靶點不同;對于長壽基因sirt