木里冬蟲夏草真菌的分離鑒定及其固態(tài)發(fā)酵工藝研究.pdf

1、蟲草藥材中富含核苷類化合物、蟲草多糖類、糖醇、甾醇類、蛋白質(zhì)、氨基酸、無機(jī)元素、脂肪酸、維生素，對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)、生殖內(nèi)分泌系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)均有積極作用，且可減緩腫瘤生長、抑制癌細(xì)胞的擴(kuò)散。近年來隨著研究的深入，蟲草及其相關(guān)深加工產(chǎn)品越來越受歡迎，但天然蟲草的生存條件苛刻，加之過度采挖和生態(tài)環(huán)境破壞等原因，使天然蟲草資源緊缺，市場供不應(yīng)求。近來研究表明，通過人工培養(yǎng)的蟲草真菌所獲菌絲體，其有效成分與天然冬蟲夏草相當(dāng)，并

2、且有效成分產(chǎn)量相對(duì)穩(wěn)定，可直接用于藥物及保健品的制備中，因此對(duì)冬蟲夏草中相關(guān)真菌進(jìn)行分離純化，并利用現(xiàn)代發(fā)酵技術(shù)生產(chǎn)蟲草有效成分，具有十分重要的意義和應(yīng)用前景。
　　本實(shí)驗(yàn)從涼山州木里縣高山草原采集獲得冬蟲夏草樣品，并從中分離純化得到蟲草真菌E1，對(duì)該分離純化的蟲草真菌進(jìn)行形態(tài)學(xué)和18S rRNA分子生物學(xué)鑒定，初步確定該菌株E1為Hirsutella sp.（被毛孢屬）。
　　以涼山產(chǎn)苦蕎為培養(yǎng)基，以甘露醇和蟲草素為指標(biāo)，

3、對(duì)蟲草真菌E1固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基和發(fā)酵工藝進(jìn)行研究。確定適合菌株E1的發(fā)酵培養(yǎng)基配方:蛋白胨1％，酵母粉1％、牛肉膏2％、豆餅粉4％，蔗糖2％、硫酸鎂1％、磷酸二氫鉀0.15％以及基質(zhì)蕎麥，優(yōu)化后發(fā)酵工藝:液態(tài)種子搖床培養(yǎng)時(shí)間為72h，液態(tài)種子接種量10％，培養(yǎng)基初始含水量60％，培養(yǎng)基裝量60g/250mL，發(fā)酵時(shí)間為10天。在優(yōu)化培養(yǎng)基和發(fā)酵條件后，蟲草素和甘露醇含量均有所提升，表明通過發(fā)酵條件的優(yōu)化可以有效地提高蟲草真菌E1產(chǎn)蟲草素和