BPQ-DNA加合物的合成及光譜性質(zhì)研究.pdf

1、苯并（a）芘-7，8-醌（benzo[a]pyrene-7，8-dione，BPQ）是苯并（a）芘（benzo[a]pyrene，B[a]P）的其中一種活性代謝產(chǎn)物。B[a]P一種典型的多環(huán)芳烴，它廣泛存在于環(huán)境污染物如化石燃料的不完全燃燒中。具有極強的致畸致癌致突變性。B[a]P的潛在致癌性是通過各種酶的代謝活化途徑實現(xiàn)的。其中一種途徑是在醛酮還原酶（aldo-keto reductases，AKRs）的作用下生成BPQ。BPQ既具有

2、親電性，又具有氧化還原活性，親電性使得 BPQ能與 DNA通過加成反應(yīng)生成BPQ-DNA加合物。DNA加合物是一類很重要的生物檢測指標(biāo)，是DNA分子化學(xué)損傷的一種普遍形式之一，如果生物細胞的自身系統(tǒng)沒能識別并修復(fù)這類損傷，這種加合物就可能成為致突變、致癌變的最小因子。因此本實驗對BPQ-DNA加合物進行了研究，合成了 BPQ-dC（Deoxycytidine），BPQ-dA（Deoxyadenosine），BPQ-dG（Deoxygua

3、nosine）的加合物，探討了三類加合物的分離的最佳色譜條件，對加合物進行了制備，并研究了加合物的光譜性質(zhì)。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴色譜柱為YMC-ODS-A反相半制備柱（10×250 mm，5μm，Waters）；柱溫為室溫；流動相A為10 mM pH=5.0的HAC-NH4Ac緩沖液，B為3:1的甲醇：乙腈；梯度洗脫：先在1.0 mL/min流速下，65％B和35%A條件下洗脫5 min，然后在接下來的60 min里改變到

4、80% B和20% A；流速為1.0 mL/min；紫外檢測器波長是260 nm。使得BPQ-dC加合物得到較好的分離。⑵色譜柱為YMC-ODS-A反相半制備柱（10×250 mm，5μm，Waters）；柱溫為室溫；流動相A為50 mM pH=7.0的TEAA緩沖液，B為3:1的甲醇：乙腈；梯度洗脫：先在1.0 mL/min流速下，65% B和35% A條件下洗脫5 min，然后在接下來的45 min里改變到100%B；流速為1.0

5、mL/min；紫外檢測器波長是260 nm。使得BPQ-dA加合物得到較好的分離。⑶色譜柱為YMC-ODS-A反相半制備柱（10×250 mm，5μm，Waters）；柱溫為室溫；流動相A為50 mM pH=7.0的TEAA緩沖液，B為3:1的甲醇：乙腈；梯度洗脫：先在1.0 mL/min流速下，60% B和40% A條件下洗脫5 min，然后在接下來的40 min里改變到90%B和10%A；流速為1.0 mL/min；紫外檢測器波長是

6、260 nm。使得BPQ-dG加合物得到較好的分離。⑷在選定的分離條件下，收集BPQ-dC加合物的各個組分，最終得到4種BPQ-dC的加合物，即：BPQ-dC2、BPQ-dC3-3、BPQ-dC6和BPQ-dC7，質(zhì)譜測得它們的分子量都是526。其中BPQ-dC2和BPQ-dC3-3有相似的紫外和熒光光譜吸收，BPQ-dC2與BPQ-dC3-3和BPQ-dC6與BPQ-dC7這兩對加合物的圓二色譜上下幾乎是對稱的，并且圓二色譜的形狀在2

7、50nm以上的部分很相似。⑸在選定的分離條件下，收集BPQ-dA加合物的2個組分，得到BPQ-dA的加合物，即：BPQ-dA1和BPQ-dA2，質(zhì)譜測得它們的分子量都是550。BPQ-dA1和BPQ-dA2有相似的紫外和熒光光譜吸收，它們的圓二色譜幾乎對稱，但不完全對稱。⑹在選定的分離條件下，收集BPQ-dG加合物的4個組分，得到BPQ-dG的加合物，即：BPQ-dG1、BPQ-dG2、BPQ-dG3和BPQ-dG4，質(zhì)譜測得它們的分子