DNA加合物的化學(xué)發(fā)光檢測(cè).pdf_第1頁(yè)
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1、DNA加合物是致癌物或其代謝產(chǎn)物與DNA分子的親核位點(diǎn)形成的共價(jià)結(jié)合物,是一種重要的暴露標(biāo)志物.DNA加合物的形成代表著化學(xué)致癌過(guò)程中的一個(gè)早期的、可檢測(cè)的關(guān)鍵階段.目前DNA加合物的檢測(cè)方法主要有:免疫法、熒光法和<'32>P-后標(biāo)記法已及各種色譜方法等,其中<'32>P-后標(biāo)記法由于具有極高的靈敏度(1個(gè)加合物/10<'8-10>正常核酸),從而成為目前測(cè)定DNA加合物的最主要方法.但<'32>P-后標(biāo)記法及其改進(jìn)法仍然存在許多難以

2、克服的缺點(diǎn),如放射自顯影中經(jīng)常存在人為干擾斑點(diǎn),操作步驟繁瑣,放射性同位素對(duì)人體有害,而且檢測(cè)費(fèi)用較高.此外方法的特異性和重現(xiàn)性也有待進(jìn)一步提高.該研究的目的是利用化學(xué)發(fā)光技術(shù),建立一種簡(jiǎn)便實(shí)用的DNA加合物檢測(cè)新方法.其基本原理是利用特異的核酸酶水化DNA樣品,加合物最終以二聚核苷酸(XpN)的形式存在,然后在T<,4>多聚核苷酸激酶(PNK)的作用下,將ATP分子的γ位磷酸轉(zhuǎn)移標(biāo)記到XpN的5端,因此樣品中加合物的含量與ATP的消耗

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