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1、西南師范大學(xué)博士學(xué)位論文組織酶催化光學(xué)分析系統(tǒng)及化學(xué)發(fā)光新體系應(yīng)用研究姓名:王周平申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:博士專業(yè):分析化學(xué)指導(dǎo)教師:章竹君20040601!!!!!!!!!!!!簍!!型!!!!型墮旦!!!!!!!箜!!二!:些!g!!!!!!箜—些!!!!!!關(guān)進(jìn)展,12部分研究發(fā)現(xiàn)富含多酚氧化酶的蘑菇組織可催化氧化兒茶酚及兒茶酚胺類物質(zhì)轉(zhuǎn)化為有色的醌類和紅類物質(zhì),這些產(chǎn)物的吸收峰較之原物質(zhì)吸收峰明顯紅移?;诖?,采用非常簡(jiǎn)單的固定化方法并結(jié)
2、合流動(dòng)注射技術(shù),建立了一種簡(jiǎn)單、靈敏、準(zhǔn)確、廉價(jià)的無試劑型兒茶酚、鹽酸異丙腎上腺素、鹽酸多巴胺流動(dòng)注射紫外一可見分光光度分析系統(tǒng)。該系統(tǒng)對(duì)上述幾種物質(zhì)具有良好的響應(yīng),兒茶酚、鹽酸異丙腎上腺素、鹽酸多巴胺物質(zhì)濃度在一定范圍內(nèi)與吸光度分別里良好的線性關(guān)系(兒茶酚,210~~lx10弓gml。1;靛酸異丙腎上腺素,4x1e6~8xlo’4g“一1;鹽酸多巴姣,4x1068x104gml。)。對(duì)三種物質(zhì)的檢測(cè)限(30)分別為:410‘7gml~
3、,1310‘6gml~,10x10‘6gml~。將該系統(tǒng)用于藥物制劑中鹽酸異丙7腎上腺素、鹽酸多巴胺含量的測(cè)定,所得結(jié)果與藥典標(biāo)準(zhǔn)方法測(cè)得結(jié)果一致。同時(shí)用蘑菇組織制作的反應(yīng)器具有制作簡(jiǎn)單、高酶活、使用壽命長(zhǎng)、易更換和成本低廉等優(yōu)點(diǎn)。13部分研究發(fā)現(xiàn)富含多酚氧化酶的蘑菇組織可替代純多酚氧化酶催化氧化異丙腎上腺素使其轉(zhuǎn)化為異丙腎上腺素紅,該物質(zhì)在堿性條件下可進(jìn)~步發(fā)生重排而成為具有強(qiáng)烈熒光特性的三羥基吲哚類物質(zhì)?;诖藢⒛⒐浇M織催化氧化異丙
4、腎上腺素反應(yīng)與流動(dòng)注射熒光光度分析技術(shù)結(jié)合,建立了一種非常簡(jiǎn)單、靈敏和高選擇性的異丙腎上腺素蘑菇組織催化氧化一流動(dòng)注射熒光分析系統(tǒng)。在實(shí)驗(yàn)選定條件下,熒光強(qiáng)度與異丙腎上腺素濃度在310~~110‘5gml‘1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系,檢測(cè)限為1010‘8gml‘1(3G),相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于5%(n=11)。將該系統(tǒng)初步應(yīng)用于藥物制劑中異丙腎上腺素含量的測(cè)定,所得結(jié)果與藥典標(biāo)準(zhǔn)方法測(cè)得結(jié)果一致。采用流動(dòng)注射技術(shù)同時(shí)解決了產(chǎn)物熒光不穩(wěn)定、常艦
5、類似測(cè)定中需加入穩(wěn)定劑等問題而無須考慮反應(yīng)動(dòng)力學(xué)因素。用蘑菇組織制作的反應(yīng)器同樣具有制作簡(jiǎn)單、高酶活、使用壽命長(zhǎng)、易更換和成本低廉等優(yōu)點(diǎn)。沒有氧化劑的引入,也符合當(dāng)前綠色化學(xué)的潮流。14部分構(gòu)建了一種基于蘿h組織催化的流動(dòng)注射化學(xué)發(fā)光谷氨酰胺分析系統(tǒng)。蘿h組織富含谷氨酰胺酶,可替代純谷氨酰胺酶定量催化谷氨酰胺生成氨的反應(yīng),將這一儺化反應(yīng)與NBS二氯熒光素化學(xué)發(fā)光體系測(cè)定氨的反應(yīng)在線偶臺(tái),使催化反應(yīng)與化學(xué)發(fā)光檢測(cè)反應(yīng)在不同位置發(fā)生,既保證
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