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1、本實(shí)驗(yàn)主要包括三大部分,首先,采用超聲波雙頻提取法對(duì)蕎麥殼進(jìn)行提取,利用一系列化學(xué)實(shí)驗(yàn)方法(如總酚含量的測(cè)定,黃酮含量的測(cè)定,DPPH·自由基的清除能力等)測(cè)定蕎麥殼提取物的抗氧化能力等,同時(shí)使用高效液相色譜法(HPLC)對(duì)蕎麥殼提取物中富含的黃酮多酚類物質(zhì)進(jìn)行定性定量分析。結(jié)果顯示,蕎麥殼中總酚黃酮含量很高,分別達(dá)到4.359mg/g,3.096mg/g,HPLC定量分析結(jié)果顯示蘆丁含量高達(dá)3.055mg/g,其對(duì)于DPPH·和ABT
2、S·的清除能力分別達(dá)到72.85%和46.86%。
其次,采用體內(nèi)實(shí)驗(yàn)的方法,以Wistar大鼠為研究對(duì)象,對(duì)其注射鏈脲佐菌素(Streptozocin,STZ)以建立Ⅱ型糖尿病實(shí)驗(yàn)鼠模型,考察蕎麥殼提取物對(duì)糖尿病大鼠的血糖、血脂及氧化應(yīng)激指標(biāo)的影響,并且對(duì)實(shí)驗(yàn)糖尿病大鼠肝臟中糖脂代謝相關(guān)基因進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn),對(duì)相關(guān)機(jī)理進(jìn)行探討。結(jié)果表明:蕎麥殼提取物自由進(jìn)食干預(yù)可在一定程度上降低MDA的含量,提高T-AOC含量,抗
3、糖尿病引起的氧化應(yīng)激損傷,降低TC、TG等含量,進(jìn)一步改善脂代謝水平,且與正常組、糖尿病組比較,干預(yù)組能顯著改善糖脂代謝及氧化應(yīng)激相關(guān)基因mRNA的相對(duì)表達(dá)量,干預(yù)組中與糖原合成有關(guān)的基因(GS2、GYG1)表達(dá)上調(diào),與糖異生途徑有關(guān)的基因(PEPC、G6PC1)表達(dá)下調(diào),與脂肪合成有關(guān)的基因(ACC、FAS、SREBP1)表達(dá)下調(diào)。通過(guò)該研究發(fā)現(xiàn)蕎麥殼提取物可有效降低糖尿病大鼠的血糖,并有效改善脂代謝紊亂,提高抗氧化應(yīng)激的能力,這極大
4、的提高了蕎麥殼的利用率,并為尋求一種較好的減緩糖尿病癥狀的有效飲食干預(yù)提供了新的思路。
最后,通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)(細(xì)胞實(shí)驗(yàn))進(jìn)一步探究了蕎麥殼提取物對(duì)于脂代謝的作用機(jī)理,以C3H10T1/2-Clone8為研究對(duì)象,對(duì)其進(jìn)行成脂誘導(dǎo)分化,并對(duì)細(xì)胞中與脂代謝相關(guān)的基因進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)。結(jié)果顯示,與成脂化誘導(dǎo)細(xì)胞相比,蕎麥殼提取物干預(yù)能顯著降低了與脂肪合成相關(guān)基因mRNA的表達(dá)量,這為蕎麥殼改善機(jī)體內(nèi)糖脂代謝紊亂提供了進(jìn)一步的
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