靛玉紅體內(nèi)外代謝研究.pdf

1、靛玉紅是中藥青黛的抗腫瘤有效成分。該化合物對(duì)于慢性粒細(xì)胞白血病具有明顯的抑制作用。研究發(fā)現(xiàn)靛玉紅對(duì)人體廣泛存在的細(xì)胞周期依賴性蛋白激酶(CDK)、Src激酶相關(guān)的腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)有抑制作用。靛玉紅及其衍生物可能成為針對(duì)有CDK、Src激酶參與的腫瘤的新一代抗腫瘤藥物。 最近的研究發(fā)現(xiàn)靛玉紅與丹參酮IIA作為輔助成分可增強(qiáng)APL細(xì)胞中四硫化四砷誘導(dǎo)的泛素化和PML- RARa的降解，加強(qiáng)髓樣分化調(diào)節(jié)因子的再程序化和延長(zhǎng)G1/G0阻滯期

2、。丹參酮IIA與靛玉紅通過(guò)增加負(fù)責(zé)運(yùn)輸硫化砷的水甘油通道蛋白9的含量，促使進(jìn)入白血病細(xì)胞的硫化砷明顯增多。 隨著靛玉紅被逐漸開(kāi)發(fā)利用，對(duì)靛玉紅的研究以及認(rèn)識(shí)也需進(jìn)一步深入，有必要對(duì)其體內(nèi)過(guò)程進(jìn)行研究。這對(duì)正確評(píng)價(jià)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)并外推至人體，指導(dǎo)臨床合理用藥有重要意義。本研究通過(guò)靛玉紅的體內(nèi)外代謝研究來(lái)探討體內(nèi)外代謝相關(guān)性，從而為靛玉紅與其他中西藥物合用時(shí)的安全性與合理性的研究提供部分依據(jù)。 第一部分體外研究 擬采用

3、肝微粒體體外孵育實(shí)驗(yàn)，研究靛玉紅在大鼠肝微粒體內(nèi)的代謝情況，為理解該藥代謝的機(jī)制、預(yù)測(cè)藥物相互作用和藥物代謝多態(tài)性提供依據(jù)。采用鈣沉淀法制備大鼠肝微粒體，建立了肝微粒體體外代謝研究模型，以靛玉紅為底物研究了該藥在大鼠肝微粒體中的代謝行為，濃度為100ng/mL的靛玉紅在大鼠肝微粒體中孵化3h內(nèi)，檢測(cè)到靛玉紅的水解、氧化和雙氧化代謝物。 建立LC-MS/MS測(cè)定肝微粒體孵育液中靛玉紅濃度的方法。肝微粒體孵育液樣品處理采用液-液提取

4、，提取物經(jīng)液相色譜-電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定，5分鐘內(nèi)完成靛玉紅的檢測(cè)，工作曲線線形范圍1-100ng/mL，日內(nèi)、日間精密度分別小于3.6％、13.4％，平均回收率在94.0％和104.4％之間，檢測(cè)限為0.5ng/mL。本方法靈敏度高，特異性好，可以用于肝微粒體孵育液樣品的檢測(cè)。 第二部分體內(nèi)研究 探討靛玉紅在大鼠體內(nèi)的代謝行為。選擇健康雄性大鼠，灌胃給予靛玉紅200mg/kg，連續(xù)收集4.5、8.5、12、24、36、4