降膽固醇植物乳桿菌I4菌安全性、凍干保護劑及應用研究.pdf

1、膽固醇即膽甾醇，屬于環(huán)戊烷多氫菲的衍生物，是構成機體組織細胞內膜的重要物質之一。然而過量攝入膽固醇，易誘發(fā)動脈粥樣硬化、冠心病、腦中風、高血壓等心腦血管疾病，嚴重影響了人類生命安全，因此降低血清中膽固醇含量對心腦血管病人來說十分重要。乳酸菌是一種廣泛存在并與人類生活密切相關的益生菌，具有促進機體生長，維持機體微生態(tài)平衡，進而改善胃腸道功能；抑制胃腸道內非正常菌落的生長，提高身體免疫力等眾多生理功能息息相關。有實驗證明部分乳酸菌具有降膽固

2、醇的作用，這就為降低血清中膽固醇的濃度又提供了新的可行性研究方向。同時，也要注意到一些乳酸菌又是人畜的致病菌，在應用前必須確保乳酸菌的安全性。
　　本文研究了Lactobacillus plantarum I4的安全性；凍干保護劑的優(yōu)化；在酸奶上的應用。為Lactobacillus plantarum I4的開發(fā)和應用奠定了基礎。
　　論文從以下三個方面進行研究。
　　1 Lactobacillus plantarum

3、 I4安全性檢測
　　由于部分乳酸菌的代謝產物對機體的健康存在潛在的不良影響，因此對本實驗室保藏的降膽固醇植物乳桿菌I4菌進行了安全性檢測。通過在培養(yǎng)基中添加組氨酸、酪氨酸和5′-磷酸吡哆醛的誘導，經培養(yǎng)基檢測法初步檢測，Lactobacillus plantarum I4沒有表現(xiàn)出組氨酸和酪氨酸脫羧酶活性。Lactobacillus plantarum P8有酪氨酸脫羧酶活性， Lactobacillus plantarum H

4、21既有組氨酸脫羧酶活性又有酪氨酸脫羧酶活性。利用引物PHDC1/PHDC2和P1-rev/P2-for，以5株乳酸菌基因組DNA為模板，經PCR擴增，電泳。結果顯示，PCR檢測與培養(yǎng)基檢測法結果一致。降膽固醇植物乳桿菌I4菌沒有組氨酸和酪氨酸脫羧酶活性。同時，經培養(yǎng)基檢測的乳酸菌全都不代謝硝基還原酶和偶氮還原酶。說明Lactobacillus plantarum I4是安全的。
　　2 Lactobacillus plantar

5、um I4凍干保護劑優(yōu)化研究
　　為了提高直投式Lactobacillus plantarum I4發(fā)酵劑的生物活性，考察了5種保護劑對Lactobacillus plantarum I4真空冷凍干燥的保護效果,選擇其中效果較好的四種保護劑進行響應面優(yōu)化，結果表明，以4.04％海藻糖、2.9%谷氨酸鈉、10.38%蔗糖、14.84%脫脂乳粉作為復合保護劑，Lactobacillus plantarum I4的凍干存活率較高，可達8

6、3.32%。對凍干后Lactobacillus plantarum I4發(fā)酵劑降膽固醇能力的進行測試，得出膽固醇降解率為36.2±1.75（%，n=3）。說明凍干對植物乳桿菌 I4的降膽固醇能力沒有明顯影響。
　　3 Lactobacillus plantarum I4制劑在酸奶中的應用
　　由由于Lactobacillus plantarum I4具有良好的功能特性，為了更好地發(fā)揮其益生作用，將其應用于產品中具有更重要的現(xiàn)

7、實意義。因此，通過其降膽固醇實驗以及與商業(yè)酸奶發(fā)酵劑 YO-MIX復配實驗，并對酸奶21d內的微生物含量、理化指標和降膽固醇率進行測定。結果表明：以商業(yè)益生菌與I4菌粉比例為1:1、發(fā)酵時間10.6h、發(fā)酵溫度40.9℃、蔗糖濃度8.1%、后發(fā)酵時間16h進行發(fā)酵，酸奶感官評分最高。4℃冷藏21d間乳酸菌數(shù)為4.01?107 cfu ml-1-4.45?107 cfu ml-1、pH為4-4.28、滴定酸度為72 oT-88oT、持水力