3-（氯代亞甲基）-6-氟-硫色滿-4-酮,一個新的DNA拓撲異構(gòu)酶毒劑.pdf

1、河北大學藥學院合成的新型硫色滿酮衍生物3-(氯代亞甲基)-6-氟-硫色滿-4-酮（CMFT）已證明具有很強的抗腫瘤活性，探討其抗腫瘤作用機理對這一新化合物的抗腫瘤藥物開發(fā)意義重大。本文對化合物 CMFT的順反結(jié)構(gòu)進行活性比較，考察該化合物對人宮頸癌 Hela細胞增殖和凋亡的影響。同時探討該化合物對 DNA拓撲異構(gòu)酶的抑制作用和抑制機理。采用 MTT法測定 CMFT抑制細胞增殖的能力，同時采用AO/EB雙染法、TUNEL染色法及彗星電泳檢

2、測 CMFT是否能夠誘導細胞凋亡。采用流式細胞術(shù)檢測該化合物對細胞周期的影響。向 DNA和拓撲異構(gòu)酶反應的體系中加入化合物 CMFT，通過凝膠電泳觀察 DNA結(jié)構(gòu)的變化情況，來檢測 CMFT對 DNA拓撲異構(gòu)酶的抑制活性和抑制機理。在體內(nèi)以 S180荷瘤鼠模型來評估抗腫瘤效應。剝離腫瘤、脾和胸腺，稱重后計算腫瘤抑瘤率，脾指數(shù)和胸腺指數(shù)。CMFT可明顯抑制腫瘤細胞增殖，與順式相比，其反式結(jié)構(gòu)的抗腫瘤活性更明顯， IC50為20.62-30

3、.80?molL?1。AO/EB雙染及 TUNEL染色法分析 CMFT可誘導細胞凋亡的結(jié)果基本一致。對人宮頸癌 Hela細胞周期分析結(jié)果顯示，反式 CMFT可影響細胞周期進程，導致在 S期細胞積累。在不同濃度的CMFT存在下，DNA拓撲異構(gòu)酶 I（Top I）和 DNA拓撲異構(gòu)酶 II（Top II）不能夠使質(zhì)粒 DNA發(fā)生解旋，松弛的DNA逐漸變少，超螺旋結(jié)構(gòu)的DNA逐漸增加。C MFT的順反異構(gòu)體對小鼠腫瘤重量有顯著性的影響，隨著藥