穎蠟蟬科昆蟲DNA條形碼的研究.pdf

1、穎蠟蟬科Achillidae隸屬于半翅目Hemiptera頭喙亞目Auchenorrhyncha蠟蟬總科Fulgoroidea，部分種類為農(nóng)林害蟲，具有十分重要的經(jīng)濟(jì)意義?；谛螒B(tài)特征的傳統(tǒng)鑒定方法在實際工作中面臨許多困難。本研究將DNA條形碼技術(shù)首次應(yīng)用于穎蠟蟬科昆蟲，采用PCR產(chǎn)物直接測序法測定了昆蟲的線粒體基因COI、16SrDNA、Cytb基因及核基因28SrDNA、核糖體ITS1基因的部分片段序列，采用CLUSTALXI.1.

2、83、DNAman、MEGA5.05、等系統(tǒng)發(fā)育分析相關(guān)軟件對序列進(jìn)行了比對、堿基組成、堿基替換、遺傳距離等分析，在系統(tǒng)發(fā)育分析前對序列進(jìn)行了替換飽和性分析，結(jié)果顯示堿基替換沒有明顯的飽和趨勢。采用最大簡約法(MP)、鄰接法(NJ)構(gòu)建穎蠟蟬科部分種類的系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系，得出以下結(jié)論:
　　1.序列組成分析
　　獲得穎蠟蟬科昆蟲中線粒體基因COI、16S rDNA、Cytb及核基因28SrDNA、ITS變異位點百分比分別為81.

3、2％、86.1%、83.1%、94%和83.6%；堿基A+T含量百分比分別為64.3%、73.5%、70.5%、40.3%和40.8%，和其他昆蟲一樣線粒體基因存在著明顯的AT偏好性。
　　2.堿基替換飽和性分析
　　在系統(tǒng)發(fā)育分析前對序列進(jìn)行了替換飽和性分析，結(jié)果顯示堿基替換均沒有出現(xiàn)明顯的飽和趨勢。轉(zhuǎn)換數(shù)均小于顛換數(shù)，從各個數(shù)據(jù)組來看，轉(zhuǎn)換以TT和AA之間的轉(zhuǎn)換居多，顛換中以CC和GG顛換為主，CG之間的顛換最少。

4、>　　3.遺傳距離分析
　　COI基因12屬19種穎蠟蟬的地理種群遺傳距離介于0.000-0.068，種間的遺傳距離介于0.124-0.180，屬間遺傳距離介于0.140-0.229；16S rDNA基因13屬24種穎蠟蟬的地理種群遺傳距離在介于0.000-0.020之間，種間的遺傳距離為多數(shù)在介于0.042-0.211之間，屬間遺傳距離多數(shù)介于0.101-0.220之間；Cytb基因12屬15種穎蠟蟬地理種群之間遺傳距離在介于0

5、.000-0.082之間，屬內(nèi)種間遺傳距離介于0.068-0.095之間，屬間遺傳距離介于0.087-0.258之間；28S rDNA15屬21種穎蠟蟬地理種群之間遺傳距離在介于0-0.003，屬內(nèi)種間遺介于0.003-0.010，屬間遺傳距離最大值介于0.011-0.276；ITS1基因13屬19種穎蠟蟬地理種群遺傳距離介于0-0.009之間，屬內(nèi)種間的遺傳距離介于0.082-0.178，屬間遺傳距離介于0.121-0.520之間；1

6、6S rDNA&28SrDNA基因9屬10種穎蠟蟬地理種群遺傳距離介于0.000-0.001，屬內(nèi)種間的遺傳距離介于0.027-0.028，屬間遺傳距離介于0.030-0.194之間。
　　4.系統(tǒng)發(fā)育分析
　　根據(jù)各種系統(tǒng)發(fā)育樹綜合得出如下結(jié)果：（1）菲穎蠟蟬族Plectoderini為比較進(jìn)化的類群，處于樹的端部（除Cytb）；羅穎蠟蟬族Rhotalini、穎蠟蟬族Achilidae為比較原始的類群，處于樹的根部菲穎蠟蟬