腫瘤抗原肽和雞卵黃免疫球蛋白的IgY的分離和分析研究.pdf

1、腫瘤抗原可以誘導(dǎo)機體的免疫應(yīng)答,是腫瘤的免疫治療中多肽疫苗的分子基礎(chǔ).隨著對腫瘤抗原的新認識,腫瘤疫苗的研究至今已有許多重大發(fā)展.近十年來發(fā)展起來的腫瘤抗原肽篩選方法,為臨床腫瘤免疫治療提供了大量備選抗原分子.該文總結(jié)了腫瘤抗原的種類和目前尋找腫瘤抗原方法,并簡單介紹了高效液相色譜/質(zhì)譜聯(lián)儀器結(jié)構(gòu)特點和液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)尋找抗原肽方面的應(yīng)用.實驗采用細胞膜酸洗技術(shù)洗脫細胞表面的抗原多肽,除鹽濃縮后用高效液相色譜/質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對洗脫物進行分離分

2、析,根據(jù)質(zhì)譜中氨基酸殘基的組成和精確的質(zhì)量數(shù),推算出了質(zhì)譜圖中抗原多肽質(zhì)量數(shù)所對應(yīng)的氨基酸組成.實驗對酸洗液的酸度和洗脫時間及其后處理(分別用C18柱和納濾脫鹽)進行了探討,最后還摸索了二次液相分離抗原多肽的規(guī)律性.用水稀釋脫脂-兩步鹽析-凝膠過濾法從免疫雞卵黃中分離純化IgY,經(jīng)SDS-PAGE電泳分析IgY的純度.實驗對電泳的各種條件進行了摸索,找到了最佳的電泳條件.通過電泳圖可以看出IgY的純度達到98％.說明此分離純化IgY的方