基于適配體放大技術(shù)檢測microRNA.pdf

1、MicroRNA是一類細胞內(nèi)源性的非蛋白編碼的小分子RNA，它通過調(diào)控蛋白表達在生命過程中起著重要的作用。MicroRNA的分析對進一步研究其生物功能及疾病診斷都具有重要的意義。
　　適配體是一類新的具有類似抗體識別功能的核酸分子，比傳統(tǒng)抗體更穩(wěn)定，保存時間長，可以進行多種修飾。孔雀石綠適配體（MGA）是由38個核糖核苷酸構(gòu)成的一段RNA序列。孔雀石綠（MG）是一種三苯甲烷類染料，由于不具備分子剛性結(jié)構(gòu)而沒有熒光?？兹甘G能夠與孔

2、雀石綠適配體特異性結(jié)合形成三維空間結(jié)構(gòu)，起到固定孔雀石綠平面結(jié)構(gòu)的作用，從而使孔雀石綠產(chǎn)生強的熒光發(fā)射。
　　本論文中我們建立了一種基于適配體放大技術(shù)方法來檢測miR-143。首先根據(jù)目標miR-143序列設(shè)計擴增模板，該模板包括：目標miR-143互補序列，T7RNA聚合酶啟動子序列和孔雀石綠適配體互補序列。當(dāng)目標分析物miR-143存在時，miR-143與模板雜交，在Bst聚合酶作用下延伸產(chǎn)生T7啟動子，T7RNA聚合酶能夠識