基于環(huán)誘導(dǎo)等溫放大反應(yīng)檢測microRNA.pdf

1、microRNA（miRNA）是一類內(nèi)源性的非蛋白編碼的小分子RNA，通過與目標(biāo)信使RNA（mRNA）形成RNA 誘導(dǎo)的基因沉默復(fù)合物（RISC）調(diào)控基因表達(dá)，在多種生理學(xué)和病理學(xué)過程中發(fā)揮重大作用。最近的一些研究工作也表明miRNA的表達(dá)水平能夠反映出宗族的發(fā)展以及癌癥所處的發(fā)展階段，是很好的癌癥早期診斷的標(biāo)志物。因此miRNA的檢測對miRNA的生物功能的研究及臨床診斷具有重要意義。
　　 本論文以miRNA 引發(fā)環(huán)誘導(dǎo)等溫

2、放大反應(yīng)（LAMP），利用實時定量檢測器，建立了一種簡單、快速、特異性好的檢測miRNA的方法。該方法檢測miRNA的靈敏度達(dá)到1.0amol，線性范圍跨越6個數(shù)量級。miRNA 序列短，同源序列間相似度高，在細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)水平低，很難區(qū)分，利用我們建立的方法能夠?qū)崿F(xiàn)單堿基差異的miRNA 檢測。另外，我們將該方法用于實際樣品的檢測，測得10ng人肺部總RNA 樣品中l(wèi)et-7a的含量為50amol。該方法只使用一種酶，不需要任何修飾的D