運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練和紅車軸草與芒柄花素磺酸鈉對(duì)高脂膳食大鼠腎組織影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：探討有氧運(yùn)動(dòng)以及紅車軸草、芒柄花素磺酸鈉在脂質(zhì)腎損害中的保護(hù)作用和可能機(jī)制。 方法：選取3月齡大鼠(由西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院動(dòng)物管理中心提供)70只，體重220±20g。將實(shí)驗(yàn)大鼠隨機(jī)分為7組，每組10只：安靜對(duì)照組(A組)；高脂對(duì)照組(B組)；高脂+有氧運(yùn)動(dòng)組(C組)；高脂+芒柄花素磺酸鈉磺組(D組)；高脂+芒柄花素磺酸鈉+有氧運(yùn)動(dòng)組(E組)；高脂+紅車軸草組(F組)；高脂+紅車軸草+有氧運(yùn)動(dòng)組(G組)。安靜對(duì)照組給予基礎(chǔ)飼

2、料，自由飲水；剩余6組用含2％膽固醇、10％豬油和0.5％膽酸鈉的高脂飼料飼喂大鼠，建立高脂模型。高脂模型在高脂飼料飼喂四周后建立，從第5周開始，有氧運(yùn)動(dòng)組以及藥物+有氧運(yùn)動(dòng)組的運(yùn)動(dòng)負(fù)荷為每周訓(xùn)練5d，遞增速度為3m/min，時(shí)間5min，運(yùn)動(dòng)至速度為20m/min，時(shí)間為60min，保持其運(yùn)動(dòng)量，訓(xùn)練過(guò)程持續(xù)4周；在高脂飼料基礎(chǔ)上，芒柄花素磺酸鈉、芒柄花素磺酸鈉+有氧運(yùn)動(dòng)組大鼠灌喂13.5mg/d/只，紅車軸草、紅車軸草+有氧運(yùn)動(dòng)組大

3、鼠灌喂400mg/d/只，安靜對(duì)照組代之以每日一次灌注等量生理鹽水2ml。觀察有氧運(yùn)動(dòng)、藥物以及有氧運(yùn)動(dòng)+藥物對(duì)大鼠血脂、腎小球系膜細(xì)胞增殖、細(xì)胞外基質(zhì)增生、腎小管間質(zhì)細(xì)胞浸潤(rùn)、腎組織膠原等的影響；對(duì)腎組織細(xì)胞因子(TGF-B、VEGF、CTGF、ICAM-1、VCAM-1、MCP-1、OPN、NF-κB)、細(xì)胞骨架蛋白(Desmin、Vimentin、a-SMA)和細(xì)胞凋亡蛋白(Bax、Bcl-2)表達(dá)的影響，并探討其可能的生物學(xué)機(jī)制

4、。所有數(shù)據(jù)運(yùn)用SPSS 13.0 for Windows軟件包進(jìn)行處理。統(tǒng)計(jì)學(xué)方法包括：One-Way ANOVA法，兩兩比較采用Independent-SamplesT Test法。實(shí)驗(yàn)結(jié)果以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(X±SD)表示。顯著性差異選擇 P<0.05和P<0.01水平。 結(jié)果：高脂組與安靜對(duì)照組大鼠相比較，高脂膳食大鼠毛發(fā)無(wú)光澤、有脫落，并伴有活動(dòng)減少、精神不振等現(xiàn)象，其體重較安靜對(duì)照組明顯增加(P<0.01)；高脂膳食大鼠

5、腎脂肪摯、附睪脂肪摯顯著性高于安靜對(duì)照組 (P<0.01)，大鼠腎脂肪墊/體重、附睪脂肪墊/體重之比有顯著性差異 (P<0.05,P<0.01)。高脂對(duì)照組大鼠血清TC和LDL顯著性高于安靜對(duì)照組 (P<0.01)；高脂膳食大鼠腎小球肥大明顯，球內(nèi)系膜細(xì)胞中重度增多，部分萎縮成分葉狀改變，腎小球囊膜增厚，系膜區(qū)增寬；腎小管上皮細(xì)胞空泡樣變性，問(wèn)質(zhì)腫脹，有大量單核細(xì)胞浸潤(rùn)。腎組織有明顯的紅染(VG染色)和藍(lán)染(Masson染色)的膠原增生

6、現(xiàn)象；高脂組大鼠腎組織TGF-B、VEGF、CTGF、ICAM-1、VCAM-1、MCP-1、OPN、NF-κB、Desmin、Vimentin、a-SMA和 Bax 的表達(dá)增加 (P<0.01)，Bax/Bcl-2 比值增加(P<0.01)。有氧運(yùn)動(dòng)組與高脂對(duì)照組比較，腎組織形態(tài)學(xué)變化較高脂組顯著減輕。腎組織內(nèi)有部分腎小球肥大，局部有少量空泡形成，球內(nèi)系膜細(xì)胞輕、中度增多；腎小管上皮細(xì)胞有部分空泡樣變性，有少量單核細(xì)胞浸潤(rùn)。Masso

7、n染色和VG染色顯示腎間質(zhì)和腎小球基質(zhì)中有少量紅染和藍(lán)染的膠原纖維。有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)高脂膳食大鼠腎組織TGF-B、CTGF、VCAM-1、MCP-1、OPN、NF-κB、Dcsmin、Vimcntin、a-SMA和Bax的表達(dá)有明顯的抑制作用，與高脂對(duì)照組比較顯著性降低(P<0.01)；而對(duì)腎組織VEGF和ICAM-1的表達(dá)沒(méi)有顯著的抑制作用(P>0.05)。 芒柄花素磺酸鈉組與高脂對(duì)照組比較，腎組織形態(tài)學(xué)變化較高脂組顯著減輕。腎組織

8、內(nèi)有部分腎小球肥大，局部有少量空泡形成，球內(nèi)系膜細(xì)胞輕中度增多；腎小管上皮細(xì)胞有部分空泡樣變性，有少量單核細(xì)胞浸潤(rùn)。Masson染色和VG染色顯示腎間質(zhì)和。腎小球基質(zhì)中有少量紅染和藍(lán)染的膠原纖維。芒柄花素磺酸鈉干預(yù)對(duì)高脂膳食大鼠腎組織 TGF-B、VEGF、VCAM-1、MCP-1、OPN、ICAM-1、Desmin、a-SMA和Bax的表達(dá)有明顯的抑制作用，與高脂對(duì)照組比較明顯著性降低(P<0.01)；而對(duì)腎組織CTGF、NF-κB和

9、Vimentin的表達(dá)則沒(méi)有顯著的抑制作用(P>0.05)。 芒柄花素磺酸鈉+有氧運(yùn)動(dòng)組與高脂對(duì)照組比較，腎組織形態(tài)學(xué)變化較高脂組顯著減輕。腎組織內(nèi)偶見(jiàn)腎小球肥大，球內(nèi)系膜細(xì)胞輕度增多；腎小管間質(zhì)有少量單核細(xì)胞浸潤(rùn)。Masson染色和VG染色顯示腎間質(zhì)中有極少量紅染和藍(lán)染的膠原纖維。灌喂芒柄花素磺酸鈉+有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)高脂膳食大鼠腎組織 TGF-B、VEGF、ICAM-1、CTGF、VCAM-1、MCP-1、OPN、Desmin、Vi

10、mentin、a-SMA 和 Bax的表達(dá)有明顯的抑制作用，與高脂對(duì)照組比較顯著性降低(P<0.01)，尤其對(duì)ICAM-1的抑制效果最明顯，而對(duì)腎組織NF-κB的表達(dá)沒(méi)有顯著的抑制作用(P>0.05)。 紅車軸草組與高脂對(duì)照組比較，腎組織形態(tài)學(xué)變化較高脂組顯著減輕。腎組織內(nèi)有部分腎小球肥大，局部有少量空泡形成，球內(nèi)系膜細(xì)胞輕中度增多；腎小管上皮細(xì)胞有部分空泡樣變性，有少量單核細(xì)胞浸潤(rùn)。Masson染色和’VG染色顯示腎間質(zhì)和腎小

11、球基質(zhì)中有少量紅染和藍(lán)染的膠原纖維。紅車軸草干預(yù)對(duì)高脂膳食大鼠腎組織TGF-B、VEGF、VCAM-1、MCP-1、OPN、CTGF、NF-κB、ICAM-1、Desmin、a-SMA和Bax的表達(dá)有明顯的抑制作用，與高脂對(duì)照組比較顯著性降低(P<0.01)，尤其對(duì)ICAM-1的抑制效果最明顯，而對(duì)腎組織 Vimentin的表達(dá)則沒(méi)有顯著的抑制作用(P>0.05)。 紅車軸草+有氧運(yùn)動(dòng)組與高脂對(duì)照組比較，腎組織形態(tài)學(xué)變化較高脂組

12、顯著減輕。腎組織內(nèi)偶見(jiàn)腎小球肥大，球內(nèi)系膜細(xì)胞輕度增多；腎小管問(wèn)質(zhì)有少量單核細(xì)胞浸潤(rùn)。Masson染色和VG染色顯示腎問(wèn)質(zhì)中有極少量紅染和藍(lán)染的膠原纖維。灌喂紅車軸草+有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)高脂膳食大鼠腎組織TGF-B、VEGF、ICAM-1、CTGF、VCAM-1、MCP-1、OPN、Desmin、Vimcntin、NF-κB、a-SMA和Bax的表達(dá)有明顯的抑制作用，與高脂對(duì)照組比較顯著性降低(P<0.01)，尤其對(duì)ICAM-1、OPN的抑制效

13、果最為顯著。 灌喂紅車軸草與灌喂芒柄花素磺酸鈉相比較，對(duì)脂質(zhì)沉積造成的腎組織形態(tài)學(xué)變化都有一定的保護(hù)作用。而在對(duì)脂質(zhì)沉積造成腎組織細(xì)胞因子釋放方面存在著差異：紅車軸草干預(yù)組在抑制腎組織細(xì)胞因子VEGF、TGF-B、CTGF、NF-κB和a-SMA的表達(dá)上，效果顯著性優(yōu)于芒柄花素磺酸鈉組(P<0.01)；兩組對(duì) ICAM、VCAM、MCP-1、OPN、Desmin和Vimentin的表達(dá)抑制上沒(méi)有顯著性差異。而芒柄花素磺酸鈉組大鼠

14、腎組織Bax的表達(dá)以及Bax/Bcl-2的比值顯著性低于紅車軸草組(P<0.01，P<0.05)。 結(jié)論： 1.有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)高脂膳食造成的腎損傷有一定保護(hù)作用，能夠減輕高脂血癥造成的大鼠腎組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化，并抑制促腎組織纖維化細(xì)胞因子的釋放。 2.芒柄花素磺酸鈉、紅車軸草同屬于異黃酮類化合物，對(duì)降血脂均有一定的作用，能夠減輕高脂血癥造成的大鼠腎組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化，并能抑制腎組織損傷過(guò)程中一些炎癥因子、細(xì)胞生長(zhǎng)因子

15、的釋放。其中，在抑制腎組織細(xì)胞因子VEGF、TGF-B、CTGF、NF-κB和a-SMA的表達(dá)上，紅車軸草干預(yù)組效果顯著性優(yōu)于芒柄花素磺酸鈉組(P<0.01)；而芒柄花素磺酸鈉組大鼠抑制腎組織細(xì)胞凋亡效果優(yōu)于紅車軸草組；兩組對(duì)腎組織ICAM、VCAM、MCP-1、OPN、Desmin和 Vimentin的表達(dá)抑制上沒(méi)有顯著性差異。 3.芒柄花素磺酸鈉+有氧運(yùn)動(dòng)、紅車軸草+有氧運(yùn)動(dòng)組對(duì)保護(hù)高脂血癥造成的腎損傷效果最為顯著。從。腎組