固定化酶法制備大豆低聚糖及其配合物的研究.pdf

1、大豆低聚糖(SOS)中功能性因子（棉子糖、水蘇糖）與非功能性因子（蔗糖）共存。大豆低聚糖作為功能性低聚糖，具有促進(jìn)雙歧桿菌增殖和不能直接被動(dòng)物消化吸收的特點(diǎn)，同時(shí)還有防治高血脂、增強(qiáng)免疫功能等作用。我國(guó)生產(chǎn)的大多數(shù)大豆低聚糖產(chǎn)品中功能性低聚糖的含量較低，蔗糖的含量高。本研究的目的在于，通過(guò)固定化酶法制備大豆低聚糖，降低蔗糖的含量，提高大豆低聚糖的功能性。對(duì)大豆低聚糖鐵(Ⅲ)、硒(Ⅳ)配合物做了初步研究，以期望擴(kuò)大大豆低聚糖的應(yīng)用范圍。<

2、br>　　 本論文以海藻酸鈉、殼聚糖、磁性殼聚糖、磁性海藻酸鈉為載體，采用包埋-交聯(lián)法，固定β-呋喃果糖苷酶。通過(guò)正交試驗(yàn)分別確定最佳固定條件如下：
　　 以海藻酸鈉為載體固定β-呋喃果糖苷酶最佳工藝為：海藻酸鈉濃度4.5％、氯化鈣濃度3.5％、戊二醛濃度0.2％、加酶量10m1、包埋時(shí)間1h、交聯(lián)時(shí)間0.5h時(shí)。以殼聚糖為載體固定β-呋喃果糖苷酶最佳工藝為：包埋時(shí)間2.5h、交聯(lián)時(shí)間1.5h、聯(lián)酶時(shí)間2.5h、戊二醛濃度0.

3、3％、乙酸濃度3％、載體：酶量(1∶1)。以磁性海藻酸鈉為載體固定β-呋喃果糖苷酶最佳工藝為：海藻酸鈉濃度4.0％、氯化鈣濃度2.5％、戊二醛濃度0.5％、包埋時(shí)間1.5h。磁性殼聚糖為載體固定β-呋喃果糖苷酶最佳工藝為：包埋時(shí)間1.0h、交聯(lián)時(shí)間1.5h、聯(lián)酶時(shí)間3.0h、戊二醛質(zhì)量濃度0.4％、乙酸質(zhì)量濃度2.5％、載體：酶量(1∶0.5)。通過(guò)對(duì)四種載體固定化酶的酶活和游離酶酶活比較，發(fā)現(xiàn)磁性海藻酸鈉固定β-呋喃果糖苷酶效果最好，

4、平均酶活回收率在60％以上。磁性海藻酸鈉固定β-呋喃果糖苷酶的最適反應(yīng)溫度是30℃，最適pH是7，具有很好的操作穩(wěn)定性和儲(chǔ)藏穩(wěn)定性。
　　 固定化β-呋喃果糖苷酶制備大豆低聚糖的條件進(jìn)行了初步探討，最佳工藝參數(shù)為：反應(yīng)溫度35℃，酶反應(yīng)體系的pH為6，反應(yīng)液與酶量配比為(1.5：1)酶反應(yīng)時(shí)間為135min。利用高效液相測(cè)定大豆低聚糖，結(jié)果顯示：酶解產(chǎn)物中總低聚糖含量由原來(lái)的41.74％提高到59.8％，大約有18.14％的蔗糖