簡介：目的骨質(zhì)疏松癥（OSTEOPOSIS，OP）是一種全身性代謝性骨病，是目前世界上發(fā)病率、死亡率及保健費用消耗較大的疾病之一。據(jù)統(tǒng)計全世界目前約有2億人患有骨質(zhì)疏松。骨質(zhì)疏松癥發(fā)病?！办o悄悄”，“不知不覺”，一旦發(fā)現(xiàn)多已經(jīng)發(fā)展到一定程度，因此越來越引起人們的重視。從細胞學水平上來研究骨質(zhì)疏松的發(fā)病機理及其藥效評價已經(jīng)成為基礎(chǔ)與臨床研究的熱點。成骨細胞和破骨細胞之間的動態(tài)平衡在維持骨的正常結(jié)構(gòu)和代謝中具有重要作用。骨質(zhì)疏松是由于骨吸收和骨形成解偶聯(lián)，骨吸收大于骨形成導致骨量丟失而引起。大量資料顯示成骨細胞的增殖抑制、分化程度降低是造成骨質(zhì)疏松的重要原因。中醫(yī)藥學（TCM）認為骨與腎的關(guān)系密切，其在預防和治療骨質(zhì)疏松及骨折方面存在著悠久的歷史。祖國醫(yī)學古典醫(yī)籍黃帝內(nèi)經(jīng)中，有很多類似于骨質(zhì)疏松的名稱的記載，歷代也有不少治療骨質(zhì)疏松的名方。本實驗中補腎方藥由熟地黃、淫羊藿、山藥、丹參、骨碎補、獨活組成。有效部位的單體化合物依次是梓醇、淫羊藿苷、薯蕷皂苷元、丹參酮ⅡA、柚皮苷、羥甲香豆素。細胞培養(yǎng)技術(shù)（CELLCULTURETECHNIQUE），是生命科學研究中一個必不可少的技術(shù)。我們多次酶消化貼塊法對SD大鼠原代成骨細胞的體外培養(yǎng)，而獲得足夠數(shù)量的成骨細胞。首先觀察成骨細胞在生長過程中的形態(tài)學變化，進而以體外培養(yǎng)的SD大鼠成骨細胞5～6代為實驗對象，采用補腎方藥不同單體配伍、生藥配伍、淫羊藿苷單體進行成骨細胞干預性培養(yǎng)，在不同濃度、不同時間及不同配伍的情況下，采用噻唑藍法（MTT）和對硝基苯二鈉基質(zhì)動力學法（PNPP）分別對大鼠成骨細胞的增殖與分化進行測定。通過比較和觀察補腎方藥不同配伍對成骨細胞的增殖和分化的影響，從而初步確定補腎方藥及其組分配伍有效性及其有效濃度范圍。方法1、我們選用新生（2、補腎方藥的配伍分組依據(jù)中醫(yī)基礎(chǔ)理論和方劑學配伍規(guī)律將補腎方藥中“地黃淫羊藿山藥”和“骨碎補丹參獨活”各分為一類，即“補藥”（TONICSMEDICINE，TMED）和“瀉藥”（CATHARTICMEDICINE，CMED）?！把a藥”（TMED）和“瀉藥”（CMED）分為生藥（CRUDEDRUG）（原藥直接提取的成分）和單體（MONOMER）（有效化學成分）兩種，稱為“補藥生藥配伍組（CRUDETONICSHERBSCOMPATIBILITYGROUPS，CTHCG）”和“瀉藥生藥配伍組（CRUDECATHARTICHERBSCOMPATIBILITYGROUPS，CCDCG）”，分別用“CT”組和“CC”組表示；“補藥單體配伍組（MONOMERTONICSDRUGCOMPATIBILITYGROUP，MTDCG）”和“瀉藥單體配伍組（MONOMERCATHARTICDRUGCOMPATIBILITYGROUP，MCDCG）”分別用“MT”和“MC”表示。補腎方藥的試驗分組分8組，①CTCC組，②CTCC組，⑧CTMC組，⑥MTMC組，⑦MT3、補腎方藥配伍的用藥比例“補藥”（TMED）“瀉藥（CMED）地黃淫羊藿山藥骨碎補丹參獨活（222111）；“補藥”（TMED）“瀉藥”（CMED）地黃淫羊藿山藥骨碎補丹參獨活（111111）；“補藥”（TMED）4、用噻唑藍比色法（MTT）法測成骨細胞的增殖；加入濃度各為10NGML、20NGML、30NGML的補腎方藥及中藥單體；繼續(xù)培養(yǎng)24H、28H、72H后，加入MTT20ΜL，用酶標儀測定OD值，觀察對大鼠成骨細胞增殖的影響。5、用對硝基苯二鈉基質(zhì)動力學法（PNPP）測定大鼠成骨細胞的分化；換上補腎方藥及中藥單體，加藥濃度各為10NGML、20NGML、30NGML后；繼續(xù)培養(yǎng)24H、28H、72H后，吸棄培養(yǎng)液，加入025ML01％TRITON溶液，按試劑盒說明測定，結(jié)果以每克蛋白中堿性磷酸酶（ALP）的國際單位（UGPROTEIN）表示，該方法通過對ALP含量的測定，進而可反映OB的分化情況。結(jié)果1、多次酶消化貼塊法大鼠原代成骨細胞的體外培養(yǎng)的形態(tài)學觀察11倒置顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)，原代成骨細胞由大鼠顱蓋骨周爬出，貼壁、展開，呈多邊形、三角形；剛接種的成骨細胞呈球形，24H內(nèi)存活細胞已沉降貼壁，完全展開，呈三角形、梭狀形，核明顯增大；傳代培養(yǎng)5天，細胞形態(tài)可見多樣化；培養(yǎng)8～15天，可見長索性、多角形、條索形，匯合時細胞呈鋪路石狀，可重疊生長；15天后，可出現(xiàn)膠原堆積和鈣鹽沉積。12堿性磷酸酶染色可觀察到成骨細胞酶活性部位呈現(xiàn)紫色細顆粒狀。2、MTT法測定補腎方藥對大鼠成骨細胞的增殖21與對照組相比，濃度為10NGML時，在24H測定MTMC組增高（PCC組，CTCC組，MTMC組，有明顯促增殖作用（PMC組具有顯著促增殖作用（P22與對照組相比，濃度為20NGML時，在24H測定CTCC組和MTMC組有促增殖作用（PCC組、MTMC組具有促增殖作用，以CTCC組明顯（PCC和MTMC組具有促增殖作用（P23與對照組相比，濃度為30NGML下，在24H測定CTCC組有明顯促增殖作用（PCC組，MTMC組，MTCC組促增殖作用強（P3、對硝基苯磷酸二鈉基質(zhì)動力學法（PNPP）測定補腎方藥對大鼠成骨細胞的分化影響31與對照組相比，濃度為10NGML時，在24H是測定MTMC組ALP增高PMC組有明顯促ALP作用（PMC組，MTMC組的ALP含量明顯升高，（P32與對照組相比，濃度為20NGML時，在24H測定CTCC組、CTCC組、MTMC組和MTMC組有促ALP作用（PCC組有明顯的促ALP分泌作用（P33與對照組相比，濃度為30NGML下，在24H是測定CTCC組、MTMC組有促ALP分泌作用，CTCC組較明顯（PCC組有促明顯的促ALP分泌作用（P結(jié)論1、補藥單體配伍組瀉藥單體配伍組（MTMC）在10NGML濃度72H時測得的結(jié)果最高，推斷低濃度的單體配伍對大鼠成骨細胞的增殖和分化具有促進作用；2、補藥單體配伍組瀉藥單體配伍組（MTMC）可能具有量效和時效關(guān)系。推斷其量效關(guān)系為隨著濃度（劑量）的增加對大鼠成骨細胞的增殖和分化作用反而減弱；同一濃度下，24H與72H相比較推斷其時效關(guān)系72H時具有明顯的促進成骨細胞增殖和分化的作用；3、補藥生藥配伍組瀉藥生藥配伍組（CTCC）在30NGML時具有促進成骨細胞增殖和分化的作用，推斷其量效和時效關(guān)系為隨著濃度（劑量）和時間的增加對大鼠成骨細胞的增殖和分化作用而增強；4、補藥瀉藥（TMEDCMED）的配伍關(guān)系，對成骨細胞具有更好的干預效果；就本方劑來講起效部位可能是梓醇、淫羊藿苷、薯蕷皂苷元、丹參酮ⅡA、柚皮苷、羥甲香豆素之間的配伍；補腎方藥由熟地黃、山藥、淫羊藿、丹參、骨碎補、獨活生藥之間的配伍優(yōu)于單體有效成分配伍，可能在生藥配伍之中還有其他未知的成分；5、中藥方劑的復雜性來源于在中藥配伍的過程中新產(chǎn)生的或者含有其他未知的成分。通過本實驗的研究為中藥方劑學的研究進行了有益的探索，為中醫(yī)學和中西醫(yī)結(jié)合基礎(chǔ)和臨床提供一個實驗性思路和方法。

簡介：羊水來源干細胞AMNIOTICFLUIDDERIVEDSTEMCELLS，AFSCS是近幾年來倍受關(guān)注的新成體干細胞類型，有關(guān)羊水干細胞的分離培養(yǎng)、生物學特性分析、體內(nèi)外分化潛能等仍有很多問題需深入探討。在其誘導分化方向和應用領(lǐng)域方面，我們針對我國肝病的發(fā)病形式和目前肝臟再生修復治療的限制性因素，以分離、培養(yǎng)和鑒定羊水來源干細胞、并將其在體內(nèi)外誘導分化為肝細胞為目標，建立相應的技術(shù)方法，為人類羊水來源干細胞的基礎(chǔ)研究和臨床應用奠定基礎(chǔ)。本研究主要包括三部分一、AFSCS分離培養(yǎng)方法的建立及生物學特性分析孕中期羊水1020ML離心后細胞沉淀分別在下列四種不同條件下進行培養(yǎng)低糖DMEM培養(yǎng)基LD10％胎牛血清FBS、LD20％胎牛血清、LD15％胎牛血清4NGML堿性成纖維細胞生長因子BFGF、LD10％胎牛血清01％明膠鋪板。比較不同培養(yǎng)條件下原代集落數(shù)、可傳代次數(shù)、擴增細胞數(shù)等；選擇最佳條件對羊水來源干細胞進行擴增，通過形態(tài)學觀察、細胞周期和生長曲線、特異性標志物檢測、體外誘導分化、染色體核型分析及致瘤實驗等對其生物學特性進行系統(tǒng)分析。結(jié)果15％血清結(jié)合BFGF可促進原代羊水細胞的貼壁生長和持續(xù)擴增，在此培養(yǎng)條件下AFSCS生長旺盛，持續(xù)傳代；表達大部分間充質(zhì)來源標志如C0105、CD44、CD29，以及部分全能干細胞標志如SSES4、OCT4和NANOG；經(jīng)不同誘導分化條件培養(yǎng)后，從基因表達或表型上證實可向脂肪細胞、神經(jīng)元及成骨細胞等不同胚層的目的細胞分化；長期培養(yǎng)中染色體核型穩(wěn)定，注射裸鼠體內(nèi)后8周未見腫瘤形成。二、AFSCS向肝細胞誘導分化的體外實驗研究根據(jù)AFSCS的生物學特點，我們設(shè)計了三階段AFSCS向肝細胞誘導分化的策略二甲基亞砜DMSO及表皮生長因子預處理2天一序貫加入成纖維細胞生長因子4FGF4、肝細胞生長因子HGF誘導分化10天HGF、制瘤素0SM、地塞米松、ITS聯(lián)合繼續(xù)促進成熟10＋天。分別從細胞形態(tài)、肝細胞特定基因表達及肝細胞特殊功能檢測等方面對誘導后細胞進行鑒定。結(jié)果誘導后AFSCS形態(tài)由梭形或長梭形逐漸向圓形或多角形轉(zhuǎn)化，RTPCR可檢測到AFP、ALB、CK18、HNF4Β、CYPB1等肝細胞特異基因的表達；免疫熒光法檢測到胞漿內(nèi)AFP及白蛋白的表達。誘導后的細胞能夠攝取，排出靛青綠、貯存糖原、分泌白蛋白。表明AFSCS體外在一定條件下具有分化為有功能肝細胞的能力。三、AFSCS向肝細胞誘導分化的體內(nèi)研究以四氯化碳CCL4腹腔注射造成裸鼠急性肝損傷模型，尾靜脈注入以熒光染料CFDASE標記的未誘導AFSCS。分別于移植后3天、10天、20天處死部分裸鼠，留取肝臟和血液標本，檢測裸鼠肝臟內(nèi)是否有標記細胞分布；同時觀察細胞移植組及對照組肝臟病理及肝功能指標變化。結(jié)果移植后3天、10天、20天，裸鼠肝臟內(nèi)均有一定比例的標記細胞，移植后10天標記細胞同時表達出成熟肝細胞標志白蛋白，提示移植細胞已整合到裸鼠肝臟并分化為肝細胞；HE染色顯示移植AFSCS的裸鼠肝臟損傷愈合過程加快，移植后10天組織學觀察基本恢復正常；而對照組在移植后20天仍有明顯的壞死和炎細胞浸潤灶。結(jié)論本文成功建立了孕中期羊水來源干細胞分離培養(yǎng)及向肝細胞誘導分化的技術(shù)體系，表明羊水來源干細胞分離培養(yǎng)簡單，體外擴增及分化能力強，經(jīng)多種細胞因子三階段誘導后，分化為具有肝細胞特征及功能的細胞，移植到肝損傷裸鼠模型后，能夠整合到受體肝臟并向成熟肝細胞分化，并可促進宿主肝損傷的組織修復。

簡介：血紅蛋白類氧載體由于其獨特的氧結(jié)合特性和正常的生理代謝途徑等優(yōu)點成為近年來血液代用品方面研究的重點，鑒于豬血紅蛋白具有較高相似性及穩(wěn)定性，是一種吸引力很強HBOCS規(guī)模生產(chǎn)原料選擇的對象。隨著HBOCS產(chǎn)品研究的不斷深入，對于HBOCS產(chǎn)品的安全性及有效性的研究就顯得尤為重要，近年來對于HBOCS產(chǎn)品的有效性研究已證明其良好的載氧釋氧能力，但許多產(chǎn)品在臨床研究期間出現(xiàn)了嚴重的不良反應，在一定程度上限制了HBOCS的進一步發(fā)展，因此對HBOCS產(chǎn)品安全性的研究就顯得尤為重要。中性粒細胞是生物體非特異性免疫系統(tǒng)中十分重要的組成部分，目前普遍認為中性粒細胞是通過吞噬、滅活、消化等作用起到對外來物質(zhì)的殺傷與消滅功能。我們近期通過對中性粒細胞呼吸爆發(fā)的研究發(fā)現(xiàn)，中性粒細胞在受到細菌刺激后，先后產(chǎn)生兩個相互分離的ROS峰，其中峰Ⅰ的ROS產(chǎn)量較小，持續(xù)時間較短且耗氧量大峰Ⅱ的ROS產(chǎn)量大，持續(xù)時間長但無明顯耗氧。通過中性粒細胞的殺菌實驗發(fā)現(xiàn)，中性粒細胞可在短時間內(nèi)5MIN內(nèi)滅活大量細菌，但吞噬細菌的中性粒細胞數(shù)量比率是隨時間延長而增加的，由此我們將中性粒細胞分為兩大類易被外來物質(zhì)激活、吞噬和或消化活性伴隨明顯耗氧的早期反應中性粒細胞和激活緩慢、吞噬和或消化活性不伴隨耗氧現(xiàn)象的遲緩反應中性粒細胞。本文在以上研究成果的基礎(chǔ)下，著重討論了血紅蛋白對細菌刺激大鼠全血中性粒細胞產(chǎn)生生物學反應的影響。主要采用化學發(fā)光等檢測方法研究系統(tǒng)活性氧物質(zhì)生成的變化，用細菌培養(yǎng)方法研究中性粒細胞抑菌殺菌機制，采用細胞培養(yǎng)、染色、光學顯微鏡形態(tài)學方法研究測定中性粒細胞吞噬功能。本文首先建立了穩(wěn)定的化學發(fā)光反應系統(tǒng)，在最終確定反應條件下，LUMINOLH2O2HRP化學發(fā)光反應系統(tǒng)可在6MIN左右達到峰值，且峰值均在40萬光子數(shù)左右。之后在該化學發(fā)光反應系統(tǒng)下研究了細菌刺激大鼠全血反應系統(tǒng)中的各種因素對化學發(fā)光反應的影響，實驗結(jié)果得出，肝素、MEM及血紅蛋白均可不同程度的增強化學發(fā)光反應。但在細菌刺激大鼠全血化學發(fā)光系統(tǒng)中，無論單體血紅蛋白還是聚合血紅蛋白，血紅蛋白的影響作用同在化學發(fā)光系統(tǒng)中的完全不同。隨著血紅蛋白濃度的增加，對化學系統(tǒng)的增強作用加大，對細胞系統(tǒng)中峰Ⅱ的抑制作用加大。排除其他可能影響因子，我們將血紅蛋白抑制細菌刺激大鼠全血化學發(fā)光的作用點定位到中性粒細胞，即遲緩反應中性粒細胞。并且推測血紅蛋白通過某種胞外機制影響中性粒細胞的ROS生成量。同時我們發(fā)現(xiàn)，血紅蛋白的加入可增強大鼠全血對于細菌的殺滅效率，但這種增強作用并不是通過增加吞噬作用達到的，因此我們可以認為，血紅蛋白的加入可增強血液中中性粒細胞對細菌的敏感性，并通過某種胞外機制達到對于細菌殺傷作用。綜上所述，本文在生理條件下研究了血紅蛋白對于大鼠中性粒細胞產(chǎn)生ROS反應及對其殺菌功能的影響，研究結(jié)果對于血紅蛋白本身的特性及其作為HBOCS的安全性的考察方面都提供了比較直觀、可靠且新穎的檢測手段和研究視角，為該產(chǎn)品的應用提供了新的思路。

簡介：切應力改變調(diào)控巨噬細胞生物學功能在動脈粥樣硬化中的作用及機制重慶大學碩士學位論文學生姓名盛尚春指導教師王貴學教授專業(yè)生物信息學學科門類生物學重慶大學生物工程學院二O一一年十月重慶大學碩士學位論文中文摘要I摘要動脈粥樣硬化ATHEROSCLEROSISAS是動脈硬化中最常見而重要的類型，是發(fā)生于大中等動脈的一種病理改變，其特點是受累動脈的內(nèi)膜有脂質(zhì)、血液成分的沉積，平滑肌細胞及膠原纖維增生，它是一種伴有不同程度病變和鈣化的慢性病理過程。動脈粥樣硬化的發(fā)病機制包括單核細胞向內(nèi)膜的遷入，泡沫細胞的形成以及斑塊的形成。一般認為，它的病理變化包括脂紋，纖維斑塊，粥樣斑塊，繼發(fā)性改變四個階段，是一種威脅人類健康和生命的疾病。目前的研究已證明血流動力學在AS的產(chǎn)生中有著非常重要的作用。血管切應力因素對AS的發(fā)生，發(fā)展過程有顯著的影響。因此，它一直是研究的熱點。而通過對AS斑塊的病理切片進行免疫組化分析發(fā)現(xiàn)，斑塊內(nèi)除了含有大量的脂質(zhì)體和膽固醇結(jié)晶體外，還有大量的諸如淋巴細胞、巨噬細胞等因吞噬脂質(zhì)體而形成的泡沫細胞。近年的研究表明，無論是單核細胞源性巨噬細胞還是血管平滑肌細胞源性巨噬細胞，在整個動脈粥樣硬化斑塊的生成和進展中具有重要的作用。由其吞噬脂質(zhì)體后形成的泡沫細胞是動脈粥樣硬化的標志。但是，目前尚不清楚巨噬細胞本身的泡沫細胞形成對動脈粥樣硬化是保護還是加速其發(fā)展進程。研究巨噬細胞在動脈粥樣硬化病程中對脂質(zhì)的吞噬及修飾能力對動脈粥樣硬化病程的進展對臨床控制動脈粥樣硬化病程具有較強的治療意義。因此，我們通過體外利用不同大小的切應力（0，101530DYNCM2）在有OXLDL（2MGML和無OXLDL條件下對巨噬細胞進行共培養(yǎng)，然后觀察其分泌的NO和IL6的含量變化，同時利用流式細胞儀檢測CD36含量變化。結(jié)果顯示，在吞噬OXLDL后，巨噬細胞分泌的NO、IL6以及CD36的含量明顯上升，且整個含量與是否有切應力以及切應力的大小有密切的聯(lián)系。體內(nèi)試驗研究主要是通過構(gòu)建血管狹窄動物模型，分析狹窄處血管血流動力學變化情況；并通過對在體病變血管組織和正常血管進行染色對比分析。組織染色結(jié)果表明，在近心端和遠心端的組織中，近心端血管中膜層的泡沫化嚴重，而且脂肪含量也是遠遠大于遠心端。HE染色發(fā)現(xiàn)，頸總動脈狹窄的近心端和遠心端均有明顯的內(nèi)膜增生以及動脈粥樣硬化斑塊形成，近心端增生內(nèi)膜的細胞成分主要呈圓形的泡沫細胞，而遠心端則主要為梭形平滑肌細胞。在體實驗和體外實驗有相似的結(jié)論，即低切應力狀態(tài)增加巨噬細胞對脂質(zhì)體的攝入，并促使細胞表面的OXLDL受體，如清道夫受體CD36表達上調(diào)。結(jié)果顯示這種受體的增加會促進巨噬細胞對脂質(zhì)的吸收，并干擾膽固醇的循環(huán)和流出，促使巨噬細胞向泡沫細胞的轉(zhuǎn)變，進而加速AS的進程。

簡介：點擊查看更多促紅細胞生成素對O-2A祖細胞生物學特性的影響.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：研究背景及目的成體間充質(zhì)干細胞MESENCHYMALSTEMCELLSMSCS具有多向分化能力研究證實MSCS可分化為胃腸道上皮細胞有望通過移植MSCS來修復損傷的胃黏膜上皮組織恢復黏膜原有的防御屏障功能并提高潰瘍愈合質(zhì)量QUALITYOFULCERHEALINGQOUH從而達到治療并防止消化性潰瘍PEPTICULCERPU復發(fā)的目的。國外有研究采用骨髓間充質(zhì)干細胞BONEMARROWDERIVEDSTEMCELLBSCS治療胃潰瘍GASTRICULCERGU并取得了令人鼓舞的結(jié)果證實了通過移植BSCS可加速潰瘍的愈合。然而由于BSCS的數(shù)量少僅占骨髓有核細胞的0001％～001并且獲取骨髓組織時創(chuàng)傷性大這使得BSCS的臨床應用前景受到了限制。脂肪間充質(zhì)干細胞ADIPOSEDERIVEDSTROMALCELLSS作為其中一種MSCS具有細胞數(shù)量大、取材創(chuàng)傷性小、可上皮細胞分化、無免疫排斥反應等優(yōu)點。利用S移植治療GU有可能會成為一種新穎、有效的治療手段。本研究旨在觀察SD大鼠S的生物學特點與不同年齡、不同取材部位的關(guān)系為S移植胃潰瘍治療的實驗尋找理想的種子細胞提供實驗依據(jù)。方法SD大鼠雌、雄不限分為1月齡幼齡組和12月齡成年組兩種取腹腔大網(wǎng)膜脂肪組織或腹股溝脂肪組織進行分離、培養(yǎng)與鑒定。隨機分為4組A組為取材于腹腔大網(wǎng)膜脂肪組織的1月齡SD大鼠B組為取材于腹股溝脂肪組織的1月齡SD大鼠C組為取材于腹腔大網(wǎng)膜脂肪組織的12月齡SD大鼠D組為取材于腹股溝脂肪組織的12月齡SD大鼠以Ⅰ型膠原酶消化脂肪組織后提取S進行貼壁培養(yǎng)相差顯微鏡下觀察S的形態(tài)繪制細胞生長曲線并用流式細胞術(shù)鑒定第四代S的表面標志物CD29CD45CD90的表達率。結(jié)果1、四組SD大鼠培養(yǎng)出的細胞均貼壁生長以梭形為主部分呈星形或多角形符合間充質(zhì)干細胞形態(tài)特征各組原代細胞與傳代細胞在形態(tài)學上無明顯差異。2、四組SD大鼠第4代S的生長曲線均呈S型S生長的潛伏期、進入平臺期時間在四組間差異無統(tǒng)計學意義P005。3、1月齡組與12月齡組的S在細胞倍增時間上差異具有顯著統(tǒng)計學差異P005。4、第四代S免疫表型結(jié)果CD29和CD90呈明顯陽性而CD45呈明顯陰性符合間充質(zhì)干細胞表型特征。三種免疫表型的陽性或陰性表達率在不同月齡及不同取材部位的四組間差異無統(tǒng)計學意義P005。結(jié)論通過酶消化法獲得的SD大鼠的脂肪組織間充質(zhì)干細胞細胞貼壁生長呈現(xiàn)類似成纖維細胞樣形態(tài)學特征免疫表型顯示CD29和CD90呈陽性而CD45呈陰性符合間充質(zhì)干細胞的特征。1月齡SD大鼠的S的增值活性優(yōu)于12月齡組腹腔大網(wǎng)膜脂肪組織與腹股溝脂肪組織來源的S在細胞形態(tài)學、增值活力及表面抗原CD29、CD45、CD90表達率上無明顯差異。

簡介：第三軍醫(yī)大學研究生學位論文獨創(chuàng)性聲明秉承學校嚴謹?shù)男ｏL和科研作風，本人申明所呈交的論文是我本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得我?；蚱渌逃龣C構(gòu)的學位或證書而使用過的材料，與我同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。申請學位論文與資料若有不實之處，本人承擔一切相關(guān)責任。論文作者簽名第三軍醫(yī)大學研究生學位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人完全了解第三軍醫(yī)大學有關(guān)保護知識產(chǎn)權(quán)的規(guī)定，即研究生在攻讀學位期間論文工作的知識產(chǎn)權(quán)單位屬第三軍醫(yī)大學。本人保證畢業(yè)離校后，發(fā)表論文或使用論文工作成果時署名單位為第三軍醫(yī)大學。學校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。學?？梢怨紝W位論文的全部或部分內(nèi)容保密內(nèi)容除外，可以采用影印、縮印或其他手段保存論文。論文作者簽名指導教師簽名日期2口，弓，2。8參考文獻91文獻綜述滋養(yǎng)細胞侵襲調(diào)控因素研究進展99參考文獻113攻讀學位期間的研究成果L18致謝119

簡介：自然殺傷細胞NK細胞是固有免疫系統(tǒng)中非常重要的成員，能夠有效的清除機體內(nèi)的異常細胞，包括受到病原微生物感染的細胞和發(fā)生癌變的細胞。與T細胞不同，NK細胞可以直接識別異常信號，不需要抗原遞呈細胞對抗原進行加工、遞呈，能夠快速對機體內(nèi)的異常信號產(chǎn)生免疫應答，是機體的第一道免疫防線。NK細胞能夠有效的區(qū)分機體內(nèi)的正常細胞和異常細胞，主要通過表達于NK細胞表面的NK細胞受體來完成自我與非我的識別過程。目前解釋該現(xiàn)象公認的理論為“MISSINGSELF”機制機體正常細胞表面表達足量的HLA分子，它們能夠結(jié)合位于NK細胞表面的抑制性受體人白細胞抗原特異性抑制受體，抑制NK細胞的細胞毒活性而在感染或癌變的細胞表面，HLA分子缺失或表達量大幅降低，不能有效的抑制NK細胞的殺傷功能，導致其被NK細胞清除。NK細胞受體根據(jù)它們傳導的信號不同，主要分為活化性受體和抑制性受體。它們對于NK細胞發(fā)揮各項生物學功能起著至關(guān)重要的作用。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了大量NK細胞受體，其中部分受體的生物學功能研究得已比較透徹，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了相應的配體，制備了單克隆抗體，解析了三維空間結(jié)構(gòu)等。但是隨著NK細胞受體研究不斷向前進展，新的NK細胞受體不斷被發(fā)現(xiàn)，它們的生物學功能尚不明晰。NKP80和NKG2F是新近發(fā)現(xiàn)的兩個NK細胞受體，目前關(guān)于它們的研究較少，生物學功能尚不清楚，我們的工作主要圍繞這兩個NK細胞受體展開，旨在更進一步了解這兩個NK細胞受體的生物學功能。之前的兩項研究發(fā)現(xiàn)NKP80能夠向NK細胞內(nèi)傳遞活化信號，增強NK細胞的細胞毒活性，提高NK細胞分泌炎性細胞因子的能力；同時還鑒定出了NKP80的配體表達于單核細胞上的AICL分子。然而，目前NKP80和AICL的三維空間結(jié)構(gòu)都未被解析，無法根據(jù)三維空間結(jié)構(gòu)來推測它們相互結(jié)合的位點，難以了解它們相互作用的機理。為了探究NKP80與AICL相互作用的位點，我們首先在蛋白結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)庫PDB中找到了目前已經(jīng)解析了三維空間結(jié)構(gòu)、且同源性與AICL最高的蛋白分子CD69，然后根據(jù)CD69的三維空間結(jié)構(gòu)，利用生物信息學工具3DJIGSAW構(gòu)建了AICL的模擬空間結(jié)構(gòu)。隨后在所有生物總蛋白庫中對AICL氨基酸序列進行BLAST分析，找出同源性最高的7個蛋白，用CLUSTALW2軟件分析比對這8個蛋白的氨基酸序列，在AICL氨基酸序列中確定出7個保守性區(qū)域。在AICL的模擬空間結(jié)構(gòu)中展示這7個保守性區(qū)域發(fā)現(xiàn)，其中三個保守性區(qū)域位于AICL的模擬空間結(jié)構(gòu)的外表面，按照這三個保守性序列合成了三條多肽。流式細胞術(shù)分析發(fā)現(xiàn)這三條多肽能夠競爭性的抑制ANTINKP80單克隆抗體結(jié)合NK細胞表面的NKP80。細胞毒活性檢測實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)，其中的兩條多肽能夠部分阻斷NKP80與AICL所介導的NK細胞的殺傷功能。結(jié)合生物信息學分析和功能實驗的結(jié)果，我們認為兩條多肽序列為潛在的分子相互作用位點。NKG2F的功能目前尚不清楚，之前的研究顯示NKG2F胞內(nèi)段有一個類似于免疫受體酪氨酸抑制性基序ITIM的序列，但在細胞膜表面，它又能與DAP12結(jié)合，通過DAP12胞內(nèi)的免疫受體酪氨酸活化性基序ITAM傳遞活化信號。NKG2F是活化性受體還是抑制性受體，尚存在爭論。我們第一次利用重組表達技術(shù)，在大腸桿菌表達系統(tǒng)中表達出了人NKG2F重組蛋白，然后以重組人NKG2F為免疫原，免疫小鼠制備了ANTINKG2F多克隆抗體，以此為工具，通過熒光定量PCR和流式細胞術(shù)檢測發(fā)現(xiàn)細胞因子IL2和IL15活化NK細胞后，NKG2F在NK細胞表面表達量上調(diào)，從側(cè)面印證了NKG2F為活化性受體。此外，流式細胞術(shù)細胞表面標記檢測的結(jié)果還證實同其他NKG2家族受體類似，NKG2F表達于外周血NK細胞的細胞膜上。

簡介：江蘇大學碩士學位論文Ⅱ型CGMP依賴性蛋白激酶對胃癌細胞增殖、遷移等生物學活性的影響姓名任峰申請學位級別碩士專業(yè)生理學指導教師陳永昌20100608江蘇大學碩士學位論文PKGII蛋白。BGC823細胞具有較強的增殖和遷移能力，所以選擇其為實驗細胞株。2PKGII在胃癌細胞高表達和活性增高可以有效抑制細胞生長，使單個細胞DNA合成減少，對EGF引起的PCNA表達增高具有明顯的抑制作用，并可使大量細胞阻滯于G1期，S期細胞減少，表明活化的PKGII可以有效抑制細胞的增殖和周期的進程。3流式細胞術(shù)及DNA瓊脂糖凝膠電泳分析發(fā)現(xiàn)，高表達和活化的PKGII對胃癌細胞的凋亡沒有明顯的影響。4PKGII高表達和活性增高可以有效抑制人胃癌細胞BGC823的遷移活動，減弱細胞附著非依賴性生長和抑制細胞在裸鼠體內(nèi)的成瘤。結(jié)論PKGII在胃癌細胞為低表達，感染重組腺病毒載體ADPKGII后表達增高，以特異性激活PKGII的CGMP類似物8一PCPTCGMP作用后，可以有效抑制胃癌細胞BGC823的增殖、遷移等生物學活性，而對細胞凋亡沒有明顯的影響。證實PKGII為一個潛在的抑癌因子。關(guān)鍵詞PKGII，腺病毒，胃癌細胞，增殖，遷移，攜瘤裸鼠LI

簡介：分類號密級R730．261內(nèi)部2年科學學位口專業(yè)學位口學校代碼10062學號2010602055學科門類醫(yī)學又辭眚釬袁警了耋蕊鞫毒I耀粼豢贛|霉搿瀛鞠黼鶼薩纛麟鼉警碩士學位論文MASTER’SDISSERTATION論文題目CDLL7對人肝癌干／祖樣細胞分化過程中生物學特性的影響TITLETHEEFFECTSOFCDLL7ONTHECHARACTERIZATIONOFHUMANLIVERCANCERSTEM／PROGENITORLIKECELLSINTHEPROCESSOFDIFFERENTIATION一級學科基礎(chǔ)醫(yī)學二級學科免疫學論文作者湯慶指導教師姚智天津醫(yī)科大學研究生院二。一三年五月天津醫(yī)科大學碩士學位論文中文摘要目的在體外利用血清刺激人肝癌于／祖樣細胞分化，觀察CDLL7在人肝癌干／祖樣細胞分化過程中的表達情況，研究CDLL7在人肝癌干／祖樣細胞分化過程中的作用，并初步探討其作用機制。方法1．應用流式細胞術(shù)檢測血清刺激人肝癌干／樣細胞分化過程中CDLL7的表達情況。2．采用CDLL7一SHRNA．慢病毒轉(zhuǎn)染分化的人肝癌干／祖樣細胞及人肝癌SK．HEPL細胞，建立分化的人肝癌于／祖樣細胞及SKHEP．1細胞的CDI17干擾株。3．應用MTS法和流式細胞術(shù)檢測人肝癌干／祖樣細胞分化前后的增殖和周期分布情況，觀察抑制CDLL7表達對分化的人肝癌干／祖樣細胞及人肝癌SKHEPL細胞增殖和周期分布的影響。4．應用MTS法檢測人肝癌干／祖樣細胞分化前后的耐藥性，觀察抑制CDLL7表達對分化的人肝癌干／祖樣細胞及入肝癌SK．HEP．1細胞耐藥性的影響。5．軟瓊脂克隆形成實驗觀察人肝癌干／祖樣細胞分化前后的體外克隆形成能力和抑制CDL17表達對分化的人肝癌干／{丑樣細胞及人肝癌SK．HEP．1細胞體外克隆形成能力的影響。6．NOD／SCID小鼠體內(nèi)成瘤實驗觀察人肝癌干／祖樣細胞分化前后的體內(nèi)成瘤能力和抑制CDL17表達對分化的人肝癌干／祖樣細胞及人肝癌SK．HEP．1細胞的體內(nèi)成瘤能力的影響。7．采用TRANSWELL小室實驗模型檢測人肝癌干／祖樣細胞分化前后的體外侵襲能力，觀察抑制CDLL7表達對分化的人肝癌干／祖樣細胞及人肝癌SKHEP．1細胞的體外侵襲能力的影響。8．應用免疫印跡法檢測人肝癌SK．HEP一1細胞及人肝癌干／祖樣細胞分化前后P53蛋白的表達情況，觀察抑制CDL17表達對分化的人肝癌干／祖樣細胞中P53蛋白表達的影響。結(jié)果

簡介：學校代號10731學號082071010006密級公開蘭州理工大學碩士學位論文SPRED2調(diào)節(jié)肝癌細胞生物學特性及機制研究學位申請人姓名里塵娌培養(yǎng)單位生金抖堂皇王捏堂院導師姓名及職稱奎重雁熬援圭垡班究旦割41亟盟量學科專業(yè)生塑絲堂皇盆王生物堂研究方向肚疸盆王生物堂論文提交日期2Q生壘旦竺旦一論文答辯日期答辯委員會主席THEREGULATORYROLESOFSPRED2INHUMANHEPATOCELLULARCARCINOMACELLSANDCORRELATIVESTUDIESONITSMECHANISMMAXIAONIBELONGDONGCOLLEGE2008MSLANZHOUUNIVERSITYOFTECHNOLOGY2011ATHESISSUBMITTEDINPARTIALSATISFACTIONOFTHEREQUIREMENTSFORTHEDEGREEOFMASTEROFSCIENCEBIOCHEMISTRYANDMOLECULARBIOLOGYINTHEGRADUATESCHOOLOFLANZHOUUNIVERSITYOFTECHNOLOGYSUPERVISORPROFESSORLIXUEYANAPRIL，201L

簡介：點擊查看更多hIL-24慢病毒載體的構(gòu)建及其對瘢痕疙瘩成纖維細胞生物學特性的影響.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：北京協(xié)和醫(yī)學院中國醫(yī)學科學院博士學位論文組蛋白去乙?；敢种苿谒亓黾毎飳W行為的調(diào)控及機制研究姓名陳佳申請學位級別博士專業(yè)皮膚病與性病學指導教師孫建方曾學思20090401北京協(xié)和醫(yī)學院博一I學位論文ABSTRACTMALIGNANTMELANOMA，THEMOSTAGGRESSIVEANDDEADLYFORMOFSKINCANCERREMAINSAMANAGEMENTCHALLENGEHDACISAREEMERGINGASAPROMISINGNEWCLASSOFANTICANCERAGENTS，THEMECHANISMANDANTICANCEREFFECTOFWHICHAREHOTSPOTSOFRESEARCHINTHISRESEARCH，INORDERTOCONFIRMTHEPOSSIBILITYOFHDACISFORTREATMENTOFMELANOMA，WEINVESTIGATEDINVITROTHELEVELOFHDAC1ANDHDAC2INMELANOMATISSUES，THEEFFECTOFCHIDAMIDEANDTSAONPROLIFERATIONANDAPOPTOSISOFMELANOMAA375CELL1INESANDBESIDES，THEEFFECTOFTSAONINVASIONOFA375CELLLINE1THEEXPRESSIONOFHDACLANDHDAC2INCUTANEOUSMELANOMASIMMUNOHISTOCHEMICALEXAMINATIONREVEALEDTHATTHELEVELOFHDAC1ANDHDAC2WASSIGNIFICANTLYHIGHERINMALIGNANTMELANOMATISSUESTHANINBENIGNPIGMENTEDNEVITISSUESWITHPOSITIVESTAININGOFNUCLEITHEDIFFERENCEWASSTATISTICALLYSIGNIFICANT儼0012THEREGULATORYEFFECTOFHDACISONTHEGROWTHOFMELANOMAA375CELLPROLIFERATIONANDAPOPTOSISOFA375CELLSTREATEDWITHORWITHOUTDIFFERENTCONCENTRATIONSOFCHIDAMIDEORTSAWEREDETECTEDBYMTTANDFCMMETHODGROWTHSUPPRESSIONANDENHANCEDAPOPTOSISWEREOBSERVEDINADOSEANDTIMEDEPENDENTMANNERBYCHIDAMIDEORTSA，WITHGO／G1ANDGE／MARREST，RESPECTIVELYMOREOVERANINCREACEOFP21W1／C伊1MRNAWASNOTICEDINCHIDAMIDETREATEDCELLSVSUNTREATEDCELLSBYRTPCRANALYSIS3THEEFFECTOFCHIDAMIDEONHISTONEACETYLASIONOFMELANOMAA375THEHISTONEACETYLATIONATATUSOFP21WAFL厄P1PROMOTERANDTHETOTALCHROMATINHISTONEWEREEXAMINEDUSINGCHIPASSAYCOMBINEDWITHQPCRANDWESTERNBLOTANALYSISRESPECTIVELYCHIDAMIDECOULDLEADTOHYPERACETYLATIONOFP21WAFL7C1P1PROMOTERREGIONANDACCUMULATIONOFACETYLATEDHISTONEH3ANDH4MOREOVER，HDAC1ANDHDAC2WEREDETECTEDBYRTPCRANDWESTERNBLOTANALYSISHDAC1WASSLIGHTLYIMPROVEDAFTERTREATMENTOFCHIDAMIDE，WHILEHDAC2HADNOCHANGE4THEEFFECTOFTSAONTHEINVASIONOFMELANOMAA375THEEFFECTOFTSAONTHEINVASION，ADHESIONANDMOVEMENTACTIVITIESOFA375CELLSWEREASSAYEDBYTRANSWELLZETAMETHODANDMTTMETHODTHOUGHTSASHOWEDNOEFFECTONTHEINVASIONABILITYOFA375CELLSITWASWORTHRESEARCHINGITINHIBITEDTHEADHESIONABILITYBUTPROMOTEDTHEMIGRATIONABILITYOFA375GELATINZYMOGRAPHYANDRTPCRWEREAPPLIEDTOASSAYTHEEFFECTOFTSAONTHEPRODUCTIONANDACTIVITYOF2

簡介：分類號分類號R7357密級密級公開公開單位代碼單位代碼10760學號學號1110524新疆醫(yī)科大學XINJIANGMEDICALUNIVERSITY博士學位論文士學位論文THESISOFDOCTORDEGREE臨床醫(yī)學專業(yè)學位臨床醫(yī)學專業(yè)學位學位教育學位教育論文題目論文題目CBX4CBX4在肝細胞癌中的生物學功能及其對肝癌預后的影響在肝細胞癌中的生物學功能及其對肝癌預后的影響和分子機制和分子機制研究生研究生王伯慶王伯慶指導教師導教師張國慶張國慶教授教授專業(yè)學位領(lǐng)域?qū)I(yè)學位領(lǐng)域外科學外科學研究方向研究方向原發(fā)性肝癌分子靶點的鑒定原發(fā)性肝癌分子靶點的鑒定研究起止時間研究起止時間2012320139所在學院所在學院第三臨床醫(yī)學院第三臨床醫(yī)學院2013年09月BIOLOGICALFUNCTIONOFCBX4ITSPROGNOSTICSIGNIFICANCECRESPONDINGMOLECULARMECHANISMSINHEPATOCELLULARCARCINOMAＡDISSERTATIONSUBMITTEDTOXINJIANGMEDICALUNIVERSITYINPARTIALFULLFILLMENTOFTHEREQUIREMENTSFTHEDEGREEOFDOCTOFMEDICINEBYBOQINGWANGSURGERYDISSERTATIONSUPERVISPROFGUOQINGZHANGSEPTEMBER2013

簡介：結(jié)締組織生長因子CTGF對大鼠頜下腺細胞生物學行為影響的實驗研究CONNECTIVETISSUEGROWTHFACTORCTGFEXPERIMENTALSTUDYOFTHEINFLUENCEOILTHEBIOLOGICALBEHAVIOROFRASUBMANDIBULARGLANDCELLS一級學科里膣匡堂二級學科里膣鱉廛匡鱟論文課題起止時間Q生皇旦二壘生旦中國醫(yī)科大學遼寧2014年3月目錄一、摘要中文論著摘要L英文論著摘要3二、英文縮略語WGLL5三、論文前言00QQOO6材料與方法7實驗結(jié)果10討論15結(jié)侖17四、本研究創(chuàng)新性的自我評價18五、參考文獻BOLD19六、附錄綜J盔22致謝27個人簡介28