切應力改變調(diào)控巨噬細胞生物學功能在動脈粥樣硬化中的作用及機制.pdf

1、切應力改變調(diào)控巨噬細胞生物學功能在動脈粥樣硬化中的作用及機制重慶大學碩士學位論文學生姓名：盛尚春指導教師：王貴學教授專業(yè)：生物信息學學科門類：生物學重慶大學生物工程學院二O一一年十月重慶大學碩士學位論文中文摘要I摘要動脈粥樣硬化(atherosclerosisAS)是動脈硬化中最常見而重要的類型，是發(fā)生于大中等動脈的一種病理改變，其特點是受累動脈的內(nèi)膜有脂質(zhì)、血液成分的沉積，平滑肌細胞及膠原纖維增生，它是一種伴有不同程度病變和鈣化的慢性

2、病理過程。動脈粥樣硬化的發(fā)病機制包括單核細胞向內(nèi)膜的遷入，泡沫細胞的形成以及斑塊的形成。一般認為，它的病理變化包括脂紋，纖維斑塊，粥樣斑塊，繼發(fā)性改變四個階段，是一種威脅人類健康和生命的疾病。目前的研究已證明血流動力學在AS的產(chǎn)生中有著非常重要的作用。血管切應力因素對AS的發(fā)生，發(fā)展過程有顯著的影響。因此，它一直是研究的熱點。而通過對AS斑塊的病理切片進行免疫組化分析發(fā)現(xiàn)，斑塊內(nèi)除了含有大量的脂質(zhì)體和膽固醇結(jié)晶體外，還有大量的諸如淋巴細

3、胞、巨噬細胞等因吞噬脂質(zhì)體而形成的泡沫細胞。近年的研究表明，無論是單核細胞源性巨噬細胞還是血管平滑肌細胞源性巨噬細胞，在整個動脈粥樣硬化斑塊的生成和進展中具有重要的作用。由其吞噬脂質(zhì)體后形成的泡沫細胞是動脈粥樣硬化的標志。但是，目前尚不清楚巨噬細胞本身的泡沫細胞形成對動脈粥樣硬化是保護還是加速其發(fā)展進程。研究巨噬細胞在動脈粥樣硬化病程中對脂質(zhì)的吞噬及修飾能力對動脈粥樣硬化病程的進展對臨床控制動脈粥樣硬化病程具有較強的治療意義。因此，我們

4、通過體外利用不同大小的切應力（0，101530dyncm2）在有oxLDL（2mgml)和無oxLDL條件下對巨噬細胞進行共培養(yǎng)，然后觀察其分泌的NO和IL6的含量變化，同時利用流式細胞儀檢測CD36含量變化。結(jié)果顯示，在吞噬oxLDL后，巨噬細胞分泌的NO、IL6以及CD36的含量明顯上升，且整個含量與是否有切應力以及切應力的大小有密切的聯(lián)系。體內(nèi)試驗研究主要是通過構(gòu)建血管狹窄動物模型，分析狹窄處血管血流動力學變化情況；并通過對在體病

5、變血管組織和正常血管進行染色對比分析。組織染色結(jié)果表明，在近心端和遠心端的組織中，近心端血管中膜層的泡沫化嚴重，而且脂肪含量也是遠遠大于遠心端。HE染色發(fā)現(xiàn)，頸總動脈狹窄的近心端和遠心端均有明顯的內(nèi)膜增生以及動脈粥樣硬化斑塊形成，近心端增生內(nèi)膜的細胞成分主要呈圓形的泡沫細胞，而遠心端則主要為梭形平滑肌細胞。在體實驗和體外實驗有相似的結(jié)論，即：低切應力狀態(tài)增加巨噬細胞對脂質(zhì)體的攝入，并促使細胞表面的oxLDL受體，如清道夫受體CD36表達