簡介：中國醫(yī)科大學（遼寧）博士學位論文SPARC對晶狀體上皮細胞生物學行為的影響及其在年齡相關(guān)性白內(nèi)障中的表達姓名白晶申請學位級別博士專業(yè)眼科學指導教師張勁松200805和6編碼，富含半胱氨酸，與FOLLISTSTIIL的同源性很高，該區(qū)域尚有GHK序列及2個CU結(jié)合位點，參與細胞增殖的調(diào)節(jié)。區(qū)域Ⅲ氨基酸殘基133．227外顯予7和8編碼，被認為是0【螺旋片段的延伸系列，并含有內(nèi)源性蛋白酶的酶切位點。位于此區(qū)域N端的CYSL37以二硫鍵與區(qū)域Ⅳ的CYS247結(jié)合。區(qū)域Ⅳ氨基酸殘基228．285，含有由外顯子9編碼的EF臂，具有高鈣親和力位點。SP_6眥的生物學特性如下1、抗增殖和粘附作用2、調(diào)節(jié)細胞和細胞外基質(zhì)的相互作用；3、與細胞因子結(jié)合及相互作用；4、影響生物體的發(fā)育；5、影響損傷愈合及血管發(fā)生。近年來對SPL6戚的研究主要集中在腫瘤領(lǐng)域。SⅣ收C對細胞有抗黏附、抑制增殖的作用，國內(nèi)外相關(guān)的研究多是集中于其對各種腫瘤細胞、角質(zhì)形成細胞、腎臟囊腫襯里上皮細胞、視網(wǎng)膜色素上皮細胞等的抑制作用，尚無研究直接觀察外源性的SPARC對體外培養(yǎng)的人晶狀體上皮細胞生物學行為的影響。本研究采用多種方法觀察了SPARC對人晶狀體上皮細胞增殖、黏附、移行的影響，并檢測了外界的不同刺激對晶狀體上皮細胞中S眥表達的影響，而后又對比了臨床上正常人及不同年齡組的白內(nèi)障患者的晶狀體上皮細胞中S湖表達，探討其在白內(nèi)障中的表達與年齡的相關(guān)性，為研究白內(nèi)障的發(fā)病機制及后發(fā)障的防治提供一定的理論基礎(chǔ)。實驗方法一、SN堰C對晶狀體上皮細胞增殖、黏附、移行的影響L、人晶狀體上皮細胞SRA0I／04的培養(yǎng)將SRA0I／04用DMEM10％胎牛血清接種于培養(yǎng)瓶中，置于5％C02、37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，24H后換液，之后每2．3天更換一次培養(yǎng)液，并于倒置顯微鏡下觀察細胞生長狀態(tài)，待細胞生長至70％．80％融合時用0．25％胰蛋白酶消化，進行傳代培養(yǎng)。2、細胞增殖的檢測向制成的細胞懸液中加入不同濃度的S粼O(shè)、0．2、1、5U∥INL，作用24、2

簡介：鄭州大學博士學位論文分化誘導劑和不同類型的人DNA聚合酶Β基因轉(zhuǎn)染對細胞的生物學效應姓名金戈申請學位級別博士專業(yè)病理與病理生理學指導教師董子明吳景蘭20040510鄭州大學2004年博上論文分化誘導劑和不同類型的人DNA聚合酶B基兇轉(zhuǎn)染對細胞的生物學效應為今后進一步研究由DNA聚合酶13突變引起的修復缺陷與腫瘤的發(fā)生發(fā)展的關(guān)系奠定基礎(chǔ)。腫瘤的發(fā)生是細胞的增殖分化失調(diào)的結(jié)果，而細胞增殖和分化的調(diào)控是多基因在多環(huán)節(jié)上控制的復雜過程，受到多種因素的影響。誘導分化是指惡性腫瘤細胞在體內(nèi)外分化誘導劑作用下，趨向正常細胞方向分化逆轉(zhuǎn)的過程。癌細胞的誘導分化和分化治療作為腫瘤治療的一條新的途徑，近年來研究非?；钴S。在誘導分化過程中許多與腫瘤發(fā)生關(guān)系密切的癌基因和抑癌基因的表達皆可發(fā)生變動，其中野生型P53WILDTYPEP53，WTP53起關(guān)鍵作用。我們應用兩種誘導分化劑作用于人食管癌ECAL09細胞系，觀察在細胞出現(xiàn)分化表型時DNA聚合酶B的表達和功能變動。本研究分為以下兩個部分1分化誘導劑全反式維甲酸ALLTRANSRETINOICACID，ATRA、二甲亞砜DIMETHYLSULTBXIDE，DMSO對ECA109細胞的誘導分化作用及其與DNA聚合酶B之問的關(guān)系；2不同類型的聚合酶B的的真核表達載體穩(wěn)定轉(zhuǎn)染哺乳動物細胞系的建立、鑒定及細胞生物學特性研究實驗方法1建立全反式維甲酸ATRA和二甲亞砜DMSO誘導的ECA一109細胞系和PCDNA31一POLBPM3及PCDNA31一WTPOLB穩(wěn)定轉(zhuǎn)染NIH3T3的細胞系，同時建立各對照組細胞系。2應用臺盼蘭拒染試驗及MTT法記錄細胞生長曲線。3應用隨機引物制備BIOTIN標記的BIOWTP53的CDNA探針。應用體外轉(zhuǎn)錄法將WTPOL0DNA單酶切為線性模板，加SP6RNA聚合酶、RNTPS及BIO一11DUTP進行體外轉(zhuǎn)錄制備反義RNA探針，以DNA斑點印跡檢測標記探針的靈敏度，進行POLB原位雜交。4定位觀察表達信號并相對定量油鏡下觀察各組細胞的原位雜交信號和免疫反應性POLBIR、PCNATR的定位及其強弱級別積分值。同時以不加標汜探針和不加特異性抗體的標本分別作為原位雜交和免疫組化的陰性對照。5抽提細胞總RNA，逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應RTPCR法檢測POL0MRNA的表達。6軟瓊脂克隆形成試驗測定誘導分化加藥組及對照組的克隆形成率、

簡介：第四軍醫(yī)大學第四軍醫(yī)大學碩士學位論文犬牙囊干細胞膜片的構(gòu)建及生物學特性的研究犬牙囊干細胞膜片的構(gòu)建及生物學特性的研究專業(yè)名稱專業(yè)名稱口腔臨床醫(yī)學口腔臨床醫(yī)學作者姓名黃闖作者姓名黃闖指導老師金作林指導老師金作林目錄縮略語表1中文摘要3ABSTRACT5前言8文獻回顧10一細胞膜片技術(shù)的研究進展101．細胞膜片技術(shù)在口腔再生醫(yī)學領(lǐng)域的應用102．細胞膜片技術(shù)的優(yōu)越性及構(gòu)建過程11二牙囊干細胞成骨能力的研究進展141．牙囊的作用142．牙囊中的前體細胞153．牙囊干細胞在組織工程中的應用154．牙囊干細胞（DFSCS）的成骨潛力17正文191材料1911實驗動物1912試劑和儀器202方法2021DFSCS體外分離培養(yǎng)2022DFSCS傳代與純化2123DFSCS克隆形成率2224DFSCS活力及增殖實驗22

簡介：點擊查看更多紅豆杉細胞系篩選、評價及其聚集體的生物學特性研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：中國醫(yī)科大學碩士學位論文RNA干擾技術(shù)抑制乙酰肝素酶表達對肺癌細胞生物學行為的影響姓名張清富申請學位級別碩士專業(yè)病理學與病理生理學指導教師邱雪杉20080301中國醫(yī)科大學研究生學位論文獨創(chuàng)性聲明本人申明所呈交的學位論文是我本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得我?；蚱渌逃龣C構(gòu)的學位或證書而使用過的材料，與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。申請學位論文與資料若有不實之處，本人承擔一切相關(guān)責任。論文作者簽名毯【盔晝?nèi)掌谛湍BJ目中國醫(yī)科大學研究生學位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人完全了解中國醫(yī)科大學有關(guān)保護知識產(chǎn)權(quán)的規(guī)定，即研究生在攻讀學位期間論文工作的知識產(chǎn)權(quán)單位屬中國醫(yī)科大學。本人保證畢業(yè)離校后，發(fā)表論文或使用論文工作成果時署名單位為中國醫(yī)科大學，且導師為通訊作者，通訊作者單位亦署名為中國醫(yī)科大學。學校有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。學?？梢怨紝W位論文的全部或部分內(nèi)容保密內(nèi)容除外，以采用影印、縮印或其他手段保存論文。論文作者簽名呈魚I盔墨指導教師簽名壟壘幽日期鯊竺趁疊三亟

簡介：第三軍醫(yī)大學博士學位論文1英文縮寫一覽表英文縮寫英文全稱中文對照AGANTIGEN抗原AAMINOPTERIN氨基喋呤AIAPOPTOSISINDEX凋亡指數(shù)APCANTIGENPRESENTINGCELL抗原提呈細胞BPBASEPAIR堿基對CDNACOMPLEMENTARYDNA互補脫氧核糖核酸CPMCOUNTSPERMINUTE每分鐘記數(shù)CTLCYTOTOXICTLYMPHOCYTES細胞毒性T淋巴細胞DCDENDRITICCELL樹突狀細胞DEPCDIETHYLPYROCARBONATE二乙酸焦磷酸酯DMSODIMETHYLSULFOXIDE二甲基亞砜DNADEOXYRIBONUCLEICACID脫氧核糖核酸DNTPDEOXYNNUCLESIDETRIPHOSPHATE三磷酸脫氧核苷EBETHIDIUMBROE溴化乙錠FACSFLESCENEACTEVATEDCELLSTER流式細胞記數(shù)FBSFETALBOVINESERUM胎牛血清FCSFETALCALFSERUM小牛血清FCMFLOWCYTOMETER流式細胞儀FITCFLUESCEINISOTHIOCYANATE異硫氰酸熒光素HHYPOXANTHINE次黃嘌呤3HTDR3HLABELEDTHYINE3H標記胸腺嘧啶脫氧核苷酸IFNINTERFERON干擾素IL10INTERLEUKIN10白細胞介素10KDKILODALTON千道爾頓MHCMAJHISTOCOMPATIBILITYCOMPLEX主要組織相容性復合體MNCMONONUCLEARCELL單個核細胞MOMONOCYTE單核細胞第三軍醫(yī)大學博士學位論文3STUDYONTHEPREPARATIONANTITUMBIOLOGICALEFFECTSOFGASTRICCANCERCELLDENDRITICCELLFUSIONVACCINEABSTRACTOBJECTIVEGASTRICCANCERISONEOFTHEMOSTCOMMONMALIGNANTTUMSINCLINICALWKWITHTHETRADITIONALTREATMENTSSUCHASRADICALOPERATIONCHEMOTHERAPYRADIOTHERAPYPATIENTSSTILLHAVETOFACEONAPOPROGNOSISDENDRITICCELLISTHENEWFOCUSOFANTITUMBIOTHERAPYTHESEYEARSMANYRESEARCHERSHAVEBEENATTRACTEDBYITSSTRONGABILITYTOPRESENTANTIGENINSPIREMEEFFECTIVEANTITUMIMMUNEREACTIONSGASTRICCANCERCELLSARELACKOFDIFFERENTIALTUMANTIGENSWITHTHEFMERMETHODSWEONLYCANGETFEWTUMANTIGENSTHEIRABILITYTOIRRITATEDENDRITCCELLSSUCCEDENTANTITUMIMMUNEREACTIONSISVERYTINYINTHISEXPERIMENTWEUSEDCELLFUSIONTECHNOLOGYTOGETTHEGASTRICCANCERCELLDENDRITICCELLFUSIONVACCINEWEHOPEDTHATTHEFUSIONCELLSCOULDGETMETUMANTIGENINFMATIONTOINCREASETHEIRPHENOTYPESHAVEMECOMPETENCETOIRRITATETHEANTITUMIMMUNEREACTIONSBYTHISEXPERIMENTWEHOPEDTOFINDOUTWHETHERTHEFUSIONVACCINEHASSATISFYINGSAFETYTOVERIFYITSABILITYOFINDUCINGANTITUMIMMUNEREACTIONSBYRESEARCHINGITSBIOLOGICALEFFECTSWEHOPEDTOGETANEWKINDOFANTITUMVACCINEFGASTRICCANCER’SBIOLOGICALTHERAPYMETHODSPART1PERIPHERALBLOODMONONUCLEARCELLSWERESEPARATEDFROMGASTRICCANCERPATIENTSCOCULTUREDWITHGRANULOCYTEMACROPHAGECOLONYSTIMULATINGFACTSINTERLEUKIN4TUMNECROSISFACTTOGENERATEMATUREDENDRITICCELLSTHEFROZENSTEDHUMANGASTRICCANCERSGC7901CELLLINESWERERESUSCITATEDCULTUREDATTHESAMETIMETHEDENDRITICCELLSSGC7901CELLSWEREFUSIONEDBYUSINGOFPOLYETHYLENEGLYCOLTHEPUREFUSIONCELLSWERESCREENEDOUTBYCULTUREDWITHHATHTIVECULTURESYSTEMSTHEPHENOTYPESOFDENDRITICCELLSFUSIONCELLSWEREDETECTEDBYFLOWCYTOMETRYPART2THEBIOLOGICALACTERISTICSOFFUSIONCELLSSUCHASTHEIRMPHOLOGICALSPECIALITIESTHEEXPRESSIONOFCELLSURFACEPHENOTYPESCD80CD83CD1AHLADRTHEIRGROWTHCURVESWHETHERTHEYCANPROLIFERATETOBEANEWCARCINOMAINNUDEMICETHEABILITYTOIRRITATECYTOTOXICTLYMPHOCYTESANTITUMIMMUNEREACTIONSWERETESTEDTOVERIFYTHEIRSAFETYWHENBEUSEDASANTITUMVACCINESPART3THEABILITYOFFUSION

簡介：分類號UDC密級編號午南大擎CENTRALSOUTHUNLVERSLTY碩士學位論文MIR126穩(wěn)定過表達結(jié)腸癌細胞論文題目系的構(gòu)建及其生物學功能研究系的構(gòu)建及其生物學功能研究學科專業(yè)研究生姓名指導教師內(nèi)科學王曉艷教授中南大學二O一二年五月分類號VDC密級碩士學位論文MI】艮126穩(wěn)定過表達結(jié)腸癌細胞系的構(gòu)建及其生物學功能研究THECOⅡSTRUCTIONANDFLINCTIONALSTUDYOFMIR一126STABIYOVEI。EXPRESSEDCOLONCANCERCEULINE作者姓名學科專業(yè)學院系、所指導教師黃鑠內(nèi)科學湘雅三醫(yī)院消化科王曉艷教授論文答辯日期呈壘』1答辯委員會主席中南大學二O一二年五月

簡介：背景與目的鼻咽癌NASOPHARYNGEALCARCINOMA，NPC是我國南方地區(qū)的一種常見惡性腫瘤，NPC的主要治療手段為放射治療，但總的效果仍不夠理想，NPC放療后5年生存率仍然徘徊在4050％。P53基因是一種重要的抑瘤基因，參與DNA損傷后修復，調(diào)控DNA損傷所觸發(fā)的細胞周期運行及細胞凋亡，介導腫瘤的放射生物學效應，因此，P53與腫瘤的放射敏感性密切相關(guān)。功能失活的P53基因則不具備這些功能，導致腫瘤對放射敏感性降低，甚至使腫瘤產(chǎn)生放射抗拒。研究表明，60％以上的NPC組織和幾乎100％的NPC細胞株有P53蛋白過表達，而且NPC中過表達的P53蛋白的功能可能異?；蚴Щ?。但至今NPC中過表達的P53蛋白對NPC的放療敏感性有無影響仍然不清楚，P53蛋白介導NPC放射應答的機制仍然需要進一步闡明。因此，觀察過表達的P53蛋白對NPC放射敏感性的影響，尋找與P53介導放療敏感性相關(guān)的蛋白質(zhì)，將有助于闡明P53參與NPC放射應答的機制。方法1P53沉默對人鼻咽癌細胞株CNE2放射生物學特性的影響以穩(wěn)定沉默P53基因表達的NPC細胞株CNE2SIP53和對照細胞株CNE2PSUPER為對象，采用集落存活分析法檢測在不同放射劑量照射后的細胞存活分數(shù)SF并計算放射生物學參數(shù)D0，Α，Β和放射敏感比SER；采用MTT法檢測放射線對細胞生長的影響；采用流式細胞術(shù)和HOCHEST33342染色檢測放射線對細胞周期及凋亡的影響；2蛋白質(zhì)組學技術(shù)尋找與P53介導CNE2細胞放療敏感性相關(guān)的蛋白質(zhì)采用雙向凝膠電泳2DE技術(shù)分離CNE2SIP53以及CNE2PSUPER細胞放射前后的蛋白質(zhì)，PDQUEST圖像分析軟件識別CNE2SIP53以及CNE2PSUPER細胞放射前后的差異蛋白質(zhì)點，基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時間質(zhì)譜MALDITOFMS鑒定差異蛋白質(zhì)；WESTERNBLOT驗證差異蛋白質(zhì)HSP70、TCP1Β、ANNEXINA2和1433Σ在CNE2SIP53以及CNE2PSUPER細胞放射前后的表達水平。結(jié)果1CNE2SIP53細胞照射后的SF值高于CNE2PSUPER細胞的SF；與CNE2PSUPER細胞相比，CNE2SIP53細胞照射后D0值和SF2值均增大，而Α值，Β值和SER均減??；2放射線誘導CNE2SIP53細胞凋亡及對細胞增殖的抑制作用弱于其對CNE2PSUPER細胞的作用；3放射線誘導CNE2PSUPER細胞阻滯于G1期，而誘導CNE2SIP53細胞阻滯于G2期；4建立了CNE2PSUPER以及CNE2SIP53細胞放射前后的二維凝膠電泳圖譜，質(zhì)譜分析鑒定了CNE2PSUPER細胞放射前后的19個差異蛋白質(zhì)以及CNE2SIP53細胞放射前后的15個差異蛋白質(zhì)，WESTERNBLOT驗證了1433Σ、HSP70、TCP1B和ANNEXINA2在兩種細胞放射前后的差異表達水平；5對CNE2PSUPER以及CNE2SIP53細胞放射前后的差異蛋白質(zhì)的異同進行比較分析，識別了14個不同的差異蛋白質(zhì)，既PYROPHOSPHATASE1、ANNEXINA1、1433PROTEINSIGMA、PROTEASOMEPROSOME，MACROPAINSUBUNIT、PROHIBITIN、PEROXIREDOXIN2、GLUTATHIORANSFERASE，GRG78PRECURS，CYTOKERATIN18，RASRELATEDPROTEIN，GLUTATHIONETRANSFERASEOMEGA11、NM23H1、CALMODULINRELATEDPROTEIN和ELECTRONTRANSFERFLAVOPROTEINSUBUNITALPHA；生物信息學分析顯示，其中7個蛋白質(zhì)即ANNEXINA1、1433PROTEINSIGMA、PROTEASOMESUBUNIT、PROHIBITIN、GLUTATHIONETRANSFERASE、GRP78PRECURS和CYTOKERATIN18與P53存在直接或間接的相互作用關(guān)系。結(jié)論1NPC細胞中過表達的P53蛋白具有生物學功能，參與放射誘導的NPC細胞損傷和凋亡過程；2采用2DE技術(shù)建立了CNE2SIP53以及CNE2PSUPER細胞放射前后的二維凝膠電泳圖譜，質(zhì)譜分析鑒定了19個CNE2PSUPER細胞放射前后的差異表達蛋白質(zhì)以及15個CNE2SIP53細胞放射前后的差異表達蛋白質(zhì)，為研究NPC放射生物學提供了有價值的資料；3發(fā)現(xiàn)了14個不同的CNE2PSUPER和CNE2SIP53細胞放射前后的差異蛋白質(zhì)，這14個蛋白質(zhì)可能與P53介導NPC放療相關(guān)，為闡明P53參與NPC放射應答的機制提供了實驗依據(jù)。

簡介：江，藩大擎碩士學位論文MASTER’SDISSERTATION論文題目△盒笪疸區(qū)疸壹聞廈王搓紲趣盆離擅差拯生物堂掛眭嬰究學科專業(yè)直廢檢驗途逝堂作者姓名周生里指導教師胡塞遺副數(shù)援答辯日期2Q12生Q魚旦Q2目學位論文版權(quán)使用授權(quán)書，，／燃Y2黝09㈣28№84夠本學位論文屬于不保密口。學位論文作者簽名闈十2指導教師簽名BL年G月I舊伊I夕胡F明

簡介：分類號UDC博士學位論文密級肝細胞癌分子標志物的篩選及其生物學功能研究。’。‘ANDBIOL02ICA’FUNCTIONALSTUDIESOFSCREENINGAIIDBIOLOGICALIUNCTIONALSTUDIES一一●■J■●●●BIOMARKERSMNEPAT0CEUUIARCARCMOMA作者姓名喬兵兵學科專業(yè)外科學學院系、所中南大學湘雅三醫(yī)院指導教師葉啟發(fā)教授論文答辯日期型叁羔26答辯委員會主席中南大學二零一二年五月一奄一一，牛血月博士學位論文中文摘要肝細胞癌分子標志物的篩選及其生物學功能研究摘要第一章用蛋白質(zhì)組學方法篩選肝癌特異性分子標志物目的采用二維凝膠電泳與基質(zhì)輔助激光解吸／電離飛行時間質(zhì)譜2DE／MALDITOFMS方法篩選并鑒定肝細胞癌組織HCC和癌旁無瘤組織的差異表達蛋白質(zhì)，并分析其與臨床病理學特征的相關(guān)性。方法收集27對肝細胞癌組織和癌旁無瘤新鮮組織，用2DE技術(shù)分離各組蛋白質(zhì)，考馬斯亮藍染色后用PDQUEST圖像分析軟件識別各差異蛋白質(zhì)點，應用基質(zhì)輔助激光解析／電離飛行時間質(zhì)譜呲DITOFMS鑒定各差異蛋白質(zhì)。分別抽提各組織的MRNA和蛋白質(zhì)，用RTPCR和WESTEMBLOT法，對差異表達蛋白質(zhì)PRDX3進行轉(zhuǎn)錄水平和蛋白質(zhì)水平的驗證。收集119例肝細胞癌組織和36例癌旁無瘤組織病理標本，用免疫組織化學法檢測差異蛋白質(zhì)過氧化物酶3PRDX3在各肝癌組織中的表達情況，進一步探討PRDX3的表達與臨床病理學特征之間的相關(guān)性。結(jié)果1采用2DE方法篩選到43個差異表達蛋白質(zhì)點，并用MALDITOFMS鑒定了其中22個差異蛋白質(zhì)，其中15個在HCC中表達上調(diào)，它們分別是亞胺甲基轉(zhuǎn)移酶環(huán)脫胺酶，線粒體醛脫氫酶，視網(wǎng)膜脫氫酶1，超氧化物歧化酶【CUZN，谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶A1，鈣調(diào)磷酸酶B1，氨基?；?，T復合體蛋白11樣蛋白1，抑素，磺基轉(zhuǎn)移酶1A2，3巰基丙酮酸硫基轉(zhuǎn)移酶，硫氧還蛋白依賴性過氧化物還原酶，人腔鈣蛋白，果糖激酶。7個在HCC中表達下調(diào)，它們分別是CAPGLY結(jié)構(gòu)域連接蛋白4，載脂蛋白AI，大同源物3，脯氨酰肽基異構(gòu)酶A，二磷酸核昔激酶A，半胱氨酸蛋白酶抑制因子B。根據(jù)其功能，將上述蛋白質(zhì)進行分類，其中與物質(zhì)代謝相關(guān)的有9個9／22，409％，與抗凋亡相關(guān)的有4個4／22，182％，與信號轉(zhuǎn)導相關(guān)的有7個7／22，318％，與氧化還原調(diào)節(jié)相關(guān)的有5個5／22，227％，與細胞骨架相關(guān)的有3個3／22，136％，與解毒作用相關(guān)的有2個2／22，91％，分子伴侶有3個3／22，136％，與蛋白質(zhì)水解相關(guān)的有1個1／22，45％，涉及DNA合成和細胞分化的有2個2／22，

簡介：復旦大學攻讀碩士學位研究生畢業(yè)論文DLBCL中SIRTL蛋白表達與基因異常及其對細胞生物學行為的影響研究生學科、專業(yè)學校代碼學號導師導師小組王倩腫瘤學10246072106248周曉燕教授李小秋副教授陸洪芬副教授本渫題受國家自然基金項目資助項H號30870985復Ⅱ?qū)W攻詿Ⅻ學1TⅫR’I女目錄中文摘要1英文摘要5前言9第一部分DLBCL巾S】RTJ和FOX03A蛋白的表達及其臨床病理意義的研究材料和方法一13結(jié)果一16討論一25小結(jié)26參考文獻26第二部分DLBCL中SIRTL基因異常及與蛋閂表達相芙性的研究材料和方法28結(jié)果36討論44小結(jié)45參考文獻45第一部分慢病毒介導SRTI基幽沉默對DIBCL細胞生物學行為影響的體外研究材料和宵法47結(jié)糶54討I倉一62小糾I64參考文獻喝4文獻綜述66附求攻I賣碩KT住期間笈袁及待發(fā)表的論文題錄73菇文縮略LID襲74投謝75

簡介：中山大學博士學位論文人胚胎視網(wǎng)膜與視網(wǎng)膜母細胞瘤干細胞生物學特性的比較研究姓名鐘秀風申請學位級別博士專業(yè)眼科學指導教師葛堅20060401鐘秀風博士論文導師葛堅工合法流產(chǎn)胎兒，健康成人視網(wǎng)膜組織取自本中心角膜移植術(shù)后剩余的眼組織。實驗標本的采集依據(jù)中山大學及本中心倫理委員會規(guī)則實施，并征得患者或其家屬知情同意而獲得。2人胚胎視網(wǎng)膜形態(tài)學觀察及免疫組化鑒定不同胚齡人眼球，分別用4％PFA固定，冰凍切片，每片68URN，HE染色，光鏡觀察；部分胚齡視網(wǎng)膜用2％多聚甲醛及25％戊二醛固定，透射電鏡觀察。不同胚齡視網(wǎng)膜冰凍切片還進行免疫熒光染色，激光共聚焦顯微鏡觀察。第一抗體有RSC標簽PAX6，NESTIN，CHXLO，7種主要成熟視網(wǎng)膜細胞標簽，包括節(jié)細胞GAP43／MAP2，錐細胞RECOVERIN，水平細胞CALBINDIND28，無長突細胞SYNTAXIN／PAX6，桿細胞RHODOPSIN，膠質(zhì)細胞GFAP和雙極細胞CHXL0。以正常成人視網(wǎng)膜NAR為對照，以PBS替代一抗為陰性對照。3半定量RTPCR法進行人胚胎視網(wǎng)膜發(fā)育分化基因鑒定TRIZOL法抽提新鮮獲取的不同胚齡視網(wǎng)膜組織總RNA，反轉(zhuǎn)錄成CDNA，以視網(wǎng)膜發(fā)育分化相關(guān)基因為引物進行PCR循環(huán)擴增。所用引物包括RSC相關(guān)基因NESTIN，PAX6，RX，CHXL0，CDL33，BMI1；分化細胞標志基因如ARR3錐細胞、CNCG桿細胞、GFAP膠質(zhì)細胞及MAP2／GAP43神經(jīng)節(jié)細胞。以人13ACTIN作為內(nèi)參照，以正常成人視網(wǎng)膜NAR為對照。4RTSC體外擴增培養(yǎng)新鮮RB組織及細胞系SORB50經(jīng)酶消化法獲取單個瘤細胞，接種于無血清化學限定培養(yǎng)基SFM培養(yǎng)，對培養(yǎng)7～15天的神經(jīng)樣腫瘤球體進行傳代培養(yǎng)。倒置顯微鏡下逐日觀察。5RTSC的干細胞特性鑒定分別對生長在擴增培養(yǎng)條件及分化培養(yǎng)條件的RTSC進行倒置顯微鏡、電鏡觀察。用克隆球體形成實驗，有限稀釋實驗，BRDU摻入法的分裂增殖實驗及分化實驗等鑒定干細胞的自我再續(xù)及分裂增殖能力和分化能力，將RTSC移植到NOD／SCID

簡介：中國協(xié)和醫(yī)科大學（北京協(xié)和醫(yī)學院）博士學位論文慢病毒介導NT3基因轉(zhuǎn)導神經(jīng)干細胞體外培養(yǎng)生物學特性研究姓名李立君申請學位級別博士專業(yè)臨床醫(yī)學指導教師王任直20080601中文摘要研究背景和目的神經(jīng)干細胞NEURALSTEMCELLS，NSCS移植和基因治療，是治療缺血性腦血管疾病的兩個重要的研究途徑。近年來，神經(jīng)干細胞已經(jīng)被用作基因治療的載體，可將治療基因攜帶到病灶，通過治療基因在缺血性損傷局部表達而發(fā)揮作用，有望為中風的治療帶來新的希望。本研究的目的以慢病毒LCNTIVIMS，LV介導，將HNR3基因轉(zhuǎn)入NSCS，并進行體外培養(yǎng)，探討NSCSHNT3在體外分化以及表達NT3時間上的特點，為體內(nèi)移植NSCSHNT3的研究和臨床應用提供必要的體外實驗依據(jù)。方法實驗共分二部分。第一部分從孕14天SPRAGUCDAWLEYSD大鼠胚胎的腦組織分離出神經(jīng)干細胞，采用無血清培養(yǎng)法，進行體外培養(yǎng)、擴增，并通過免疫熒光化學染色巢蛋白進行鑒定。取傳至第5～6代神經(jīng)干細胞，以L105CELLS／5001D／孔接種于24孔板，分別按復感染指數(shù)MULTIPLICITIESOFINFECTIONMOIS值為0、L、5、10、15、20加入攜帶報告基因GFP的慢病毒載體1ENTIVIRALVEETORGFP，【MGFP稀釋液，每一滴度加六孔，共六組。2“3天后于倒置熒光顯微鏡下觀察各組GFP的表達效率，并在3天后進行神經(jīng)干細胞球進行計數(shù)，觀察LV／GFP對NSCS增殖的影響。并行流式細胞儀檢測，得出各組NSCS的GFP陽性轉(zhuǎn)染率。第二部分構(gòu)建表達HNT3基因的慢病毒載體1ENTIVIRALVE髟TORHNT3，LV／HNT3，實驗組根據(jù)最佳MOI用LV／心爪3轉(zhuǎn)染NSCS，對照組NSCS不轉(zhuǎn)染病毒。兩組細胞繼續(xù)無血清培養(yǎng)，48H“96H后，應用ELISA和免疫熒光染色方法對兩組NSCS在體外的分化和NT3的表達進行檢測。結(jié)果第一部分NSCS以懸浮細胞球方式生長，NESTIN染色陽性。轉(zhuǎn)染GFP基因后，除M01值為0的對照組外，23天后各孔均有GFP表達。MOI值從0增至10，細胞的陽性表達率逐漸提高P85％的轉(zhuǎn)染率。但MOI值從10增至20，形成的神經(jīng)干細胞球數(shù)目卻逐漸減少。第二部分NT3修飾的神經(jīng)干細胞早期跟親代無形態(tài)學區(qū)別，34天后，實驗組中神經(jīng)干細胞分化比例比對照組明顯要高，已分化的細胞在形態(tài)上與對照組比較細胞突起長而且數(shù)

簡介：藥物致癌與化學物質(zhì)致癌一樣是個復雜的問題涉及多因素多基因參與的多階段過程體外細胞轉(zhuǎn)化基本上模擬了體內(nèi)靶細胞向腫瘤細胞的演變過程取不同轉(zhuǎn)化階段的細胞分別從細胞和分子水平研究藥物誘發(fā)細胞癌變的機理具有重要意義塞替派（THIOTEPATE）是臨床常用的抗癌藥也是IARC（INTERNATIONALAGENCYFRESEARCHONCANCER）認定的為數(shù)不多的人類藥物致癌原在臨床上具有誘發(fā)原發(fā)或繼發(fā)性二次腫瘤的負面效應因此對代表性致癌藥物塞替派的致癌機理研究是藥物致癌性研究的重要課題該研究在我室袁素波等已進行的塞替派誘導永生化人支氣管上皮細胞（NONTUMIGENICIMMTALIZEDHUMANBRONCHIALEPITHELIALCELLLINEBEAS2B）轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)化細胞的生物學特性和細胞周期調(diào)控因子研究的基礎(chǔ)上遞進進行惡性轉(zhuǎn)化細胞能在裸鼠體內(nèi)形成腫瘤是確定致癌原誘發(fā)人體上皮細胞癌變的最終指標該研究以塞替派誘導的轉(zhuǎn)化細胞（BEASTE）的致瘤性試驗為研究起點在細胞和分子水平上分別利用免疫組化染色體G顯帶技術(shù)RTPCR及序列分析技術(shù)進行了轉(zhuǎn)化細胞的裸鼠成瘤試驗、腫瘤細胞的體外培養(yǎng)建系、腫瘤細胞的細胞增殖動力學特性、染色體畸變以及腫瘤相關(guān)基因等方面的研究綜上實驗結(jié)果BEASSTE細胞具有裸鼠致瘤性BEASTT細胞與BEASSTE細胞相比較在細胞增殖、錨著獨立生長能力、形態(tài)計量、染色體等方面發(fā)生了遞進性的惡性改變是具有惡性特征的腫瘤細胞P16基因的多位點突變和P15基因表達水平的改變是細胞成瘤過程中的重要分子事件

簡介：目錄縮略詞表縮略詞表1摘要3ABSTRACT7前言11第一部分第一部分CD147慢病毒載體的構(gòu)建及穩(wěn)定轉(zhuǎn)染慢病毒載體的構(gòu)建及穩(wěn)定轉(zhuǎn)染A549細胞系的建立細胞系的建立15實驗材料實驗材料15實驗方法實驗方法16實驗結(jié)果實驗結(jié)果31討論43第二部分第二部分CD147對肺腺癌對肺腺癌A549細胞細胞生物學功能特性的影響生物學功能特性的影響47實驗材料實驗材料47實驗方法實驗方法48實驗結(jié)果實驗結(jié)果57討論65結(jié)論67參考文獻參考文獻68附錄75主要儀器主要儀器75主要試劑主要試劑77與學位論文密切相關(guān)的該研究領(lǐng)域文獻綜述（全文）與學位論文密切相關(guān)的該研究領(lǐng)域文獻綜述（全文）79在學期間發(fā)表的與學位論文密切相關(guān)的代表性論著（全文）在學期間發(fā)表的與學位論文密切相關(guān)的代表性論著（全文）87個人簡歷個人簡歷101致謝103博士學位論文縮略詞表1縮略詞表縮略詞表英文縮寫英文全稱中文全稱BPBASEPAIR堿基對CD147/EMMPRINEXTRACELLULARMATRIXMETALLOPROTEINASEINDUCER基質(zhì)金屬蛋白酶誘導因子CDNACOMPLEMENTARYDEOXYRIBONUCLEICACID脫氧核糖核苷酸DMEMDULBECCO’SMODIFIEDEAGLE’SMEDIUM高糖培養(yǎng)基ECMEXTRACELLULARMATRIX細胞外基質(zhì)GFPGREENFLUORESCENCEPROTEIN綠色熒光蛋白HUVECHUMANUMBILICALVEINENDOTHELIALCELLS人臍靜脈內(nèi)皮細胞HFFHUMANFORESKINFIBROBLAST人包皮成纖維細胞MMPSMATRIXMETALLOPROTEINASE基質(zhì)金屬蛋白酶MRNAMESSENGERRIBONUCLEICACID信使RNAMINMINUTE分鐘ODOPTICALDENSITY光密度PCRPOLYMERASECHAINREACTION聚合酶鏈式反應PBSPHOSPHATEBUFFEREDSALINE磷酸鹽緩沖液PVDFPOLYVINYLIDENEFLUORIDE聚偏氟乙烯RNAIRNAINTERFERENCERNA干擾