簡(jiǎn)介：第三軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文RNA干擾抑制CMET基因表達(dá)對(duì)人喉癌HEP2細(xì)胞生物學(xué)行為的作用姓名謝治年申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)耳鼻咽喉科學(xué)指導(dǎo)教師姬長(zhǎng)友20090501第三軍醫(yī)人學(xué)碩十學(xué)位論文經(jīng)雙酶切后的載體PSILENCER20U6連接，構(gòu)建攜帶此SHRNA的重組質(zhì)粒PSILENCER2O，CMETSHRNA，轉(zhuǎn)化DH5Q菌株，提取質(zhì)粒行酶切鑒定，并進(jìn)行序列測(cè)定。2利用構(gòu)建成功的重組質(zhì)粒，通過(guò)脂質(zhì)體介導(dǎo)的方法將其轉(zhuǎn)染到喉癌HEP2細(xì)胞株中。采用RTPCR及WESTEMBLOT法檢測(cè)CMETMRNA及蛋白表達(dá)情況，比較轉(zhuǎn)染前后其表達(dá)的變化，判斷各SHRNA的干擾效應(yīng)；篩選出抑制效果最好的CMETSIRNA序列。3通過(guò)四甲基偶氮嘩藍(lán)MTT法取轉(zhuǎn)染后細(xì)胞生長(zhǎng)24H、48H、72H、96H四個(gè)時(shí)間點(diǎn)、運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn)及侵襲實(shí)驗(yàn)通過(guò)構(gòu)建TRANSWELL小室比較重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染HEP一2細(xì)胞前后細(xì)胞的生長(zhǎng)、運(yùn)動(dòng)及侵襲能力。結(jié)果1重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化DH5Q菌株經(jīng)氨卞青霉素抗性篩選可見有細(xì)菌克隆長(zhǎng)出。2雙酶切鑒定顯示重組質(zhì)粒含有BAMHI及HINDIII酶切位點(diǎn)。3經(jīng)測(cè)序，模板序列與設(shè)計(jì)序列完全正確，重組質(zhì)粒構(gòu)建成功。4通過(guò)脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染三種干擾質(zhì)粒后，RTPCR法檢測(cè)CMET基因的MRNA表達(dá)水平，顯示三組均下調(diào)，以重組質(zhì)粒PSILENCER2O／CMETSHRNA2效應(yīng)最顯著PO003。5經(jīng)WESTEMBLOT法檢測(cè)，通過(guò)脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染三種干擾質(zhì)粒后，CMET蛋白的表達(dá)水平均下調(diào)，以重組質(zhì)粒PSILENCER20，CMETSHRNA2效應(yīng)最顯著PO02。6PSILENCER20／CMETSHRNA2轉(zhuǎn)染HEP一2細(xì)胞后，相對(duì)于未轉(zhuǎn)染組及空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組，細(xì)胞在培養(yǎng)24H、48H、72H、96H后的吸光度A492值均顯著下降PO05。7PSILENCER2O／CMETSHRNA2轉(zhuǎn)染HEP2細(xì)胞后，相對(duì)于未轉(zhuǎn)染組及空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組，侵襲細(xì)胞計(jì)數(shù)為15OO36LP值均O004，趨化運(yùn)動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)為7267473分另IJ為POOOL，P0004。結(jié)論1成功構(gòu)建了針對(duì)CMET基因的重組RNAI質(zhì)粒PSILENCER2O紀(jì)一METSHRNAL、PSILENCER2O／CMETSHRNA2、PSILENCER2O／CMETSHRNA3。2重組質(zhì)粒PSJJENCER2。O／CMETSHRNA2可明顯降低喉癌HEP2細(xì)胞CMET基因在MRNA和蛋白水平的表達(dá)。3重組質(zhì)粒PSILENCER20／CMETSHRNA2能顯著抑制喉癌HEP一2細(xì)胞的生長(zhǎng)、運(yùn)動(dòng)及侵襲，有可能是潛在的喉癌治療新方法。關(guān)鍵詞RNA干擾；CMET基因；短發(fā)夾RNA重組質(zhì)粒；喉癌；HEP2細(xì)胞；轉(zhuǎn)染7

簡(jiǎn)介：MARCCT1在腎透明細(xì)胞癌中的表達(dá)以及對(duì)人腎癌細(xì)胞株A498生物學(xué)特性影響的實(shí)驗(yàn)研究STUDIEONTHEPRESSION一Ⅳ眥CCT1’RENALCELLTUDIESONTLLEEXPRESSLONOFINRENALCELLIVIAKCCRL’LCARCINOMAANDE““CTONBIOLORICALCARCLNOMAANDITSELIECTONBIOLORICALC1IIARACTERISTICSOFARACTERLSTLCS0TRENALCELLCARCINOMACELLLINEA498研究生姓名王承學(xué)科和專業(yè)外科學(xué)泌尿外科專業(yè)指導(dǎo)教師王林輝教授指導(dǎo)小組劉冰副教授楊慶副教授葉華茂副教授第二軍醫(yī)大學(xué)長(zhǎng)海醫(yī)院泌尿外科論文提交日期2013年5月學(xué)位授予日期2013年6月目錄摘要。1一ABSTRACT3縮略詞表6前言。7第_部分INCRNAS芯片篩選在腎癌腫瘤組織中差異表達(dá)INCRNAS的研究一9一材料與方法一9一一、材料9一組織來(lái)源9二主要試劑10三主要配制試劑主要參照第二版分子實(shí)驗(yàn)克隆指南10四主要儀器一11一二、方法一11一一收集標(biāo)本N二基因表達(dá)譜的檢測(cè)12一結(jié)果。一14討侖16一第二部分MARCCT1在人腎透明細(xì)胞癌中的表達(dá)情況及其與臨床分期、病理分級(jí)的關(guān)系研究一】7材料與方法J一17一一，一、材料17一組織來(lái)源一一王7二主要試劑_一18三主要配制試劑主要參照第二版分子實(shí)驗(yàn)克隆指南一18四主要儀器一19一二、方法一19一一收集標(biāo)本一19一二REALTIMEPCR分析一20結(jié)果22一一、納入研究病例的臨床病理特征一22一二、實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)MARCCT1在14例CCRCC及癌旁非腫瘤組織中的表達(dá)情況一22

簡(jiǎn)介：THEBIOLOGL1ALEFFECTSOFPLLFNYLALANINEDERI＼，ATLVESONSEVENKLNDS0FCELLLINESADISSERTALI011SUBMIUEDTOTHEGIADUATESCHOOLOFIENANNOL‘REALUNIVERSITYINPARLIALFUI’I1LLLCLLLOFTHERCQUIIEMENLSMRIHCDEGL’EEOL、MASLEIOL’SCIENCEBYC|”NRANSUPELWISORPROF．DLXUCTLLLSHUANP】_OF．DIZHANG．1INGBOMAV21I2摘要L4．氟苯丙氨陂FP足人體中一些羥化酶的抑制劑，具有抗腫痛作HJ。L4瓤苯丙缸媵CLP是健前體激素釋放馓素的拈抗物。L4磷酸旌一苯阿姐腹PP是許多酪氡艘磷酸酶的底物．能使癌自}I胞生K停LT訂瑁1胞周期的S期。然而．苯L；II氨酸還有許多其他衍生物，螄L4溴BP、碘IP、氨叢AP、硝基NP、磺酸基SP、JF氧艇MP、訊礁CP．苯岡氨酸等，它們晌生物學(xué)作用如何T值得深入研究。為此．我TLLL】MTT方法控洲R上進(jìn)10種笨丙鲺艘衍生物對(duì)小鼠照包裹癌細(xì)胞系B16、人M小細(xì)胞忡瘸系A(chǔ)549、I，L耍倉(cāng)鼠卵瓤細(xì)胞系CHO、人FI頸斑細(xì)胞系HELA、人JJ5L細(xì)|JF【系WISH、人乳|J5}穗細(xì)胞系MCF一7、人結(jié)腸蜘細(xì)胞系HT29的細(xì)胞活TE影響。此外．川HOECHST染也療濁榆刪這LO種苯內(nèi)缸酸衍生物對(duì)L述7種細(xì)胞系凋口JQ誘導(dǎo)作用，以及J1J‘I7坫纖維采集淳形成的方法檢測(cè)IO種苯阿氨酸衍，卜物對(duì)J‘謎7種細(xì)胞懿蔣形J戊們牡I帆。結(jié)果發(fā)塒．10種苯M缸陵衍乍物塒7種L|『|胞們活性影響、疇導(dǎo)細(xì)胞嗣R和抑IIⅫ細(xì)L肛成G藩盯ILHQ蕾肆。即．IP、MP這二種銜小物制J．進(jìn)7種塵|LIL地系活性有{J鏨L蝴井『THOECHST染也站糶表呲占F『】能蜉誘甘I．迷7補(bǔ)細(xì)膽汞荊一『,KILT啦叫FP、MP，IPJJ立過(guò)濡廿釧胞塒I’‘比L刪細(xì)胞涌悱。BP、SP、PP『J抑制I．137種細(xì)毗系集薄形成晌FI3LT，說(shuō)明它們通過(guò)抑制細(xì)胞‘KK{{}響細(xì)胞的}悱。AD、NP刈FILL胞帕IVI較刪．?也據(jù)落J|；成實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯求．它們釘抑制圳胞集萍J砝成的作用．1¨此它硅灑過(guò)抑制細(xì)胞’I長(zhǎng)搿響量LI|胞活中1。它們時(shí)7種細(xì)胞的L，‘性大小“蔗異．AD對(duì)CHO細(xì)他樂的活儺沒仃膨吶，NP剝HT29、WISH、A549這二種圳『地名的活性仃器I咖。HOECBS染也站噼表L卅它們沒盯滿導(dǎo)細(xì)咆捌L’巾口作用。CIP除J’刈MCF7手¨H129州科吲L|1肛系|1CJ活RL仃影IIIT々}．塒蚶占細(xì)J地沒訂形I吶。細(xì)胞睡蔣形成實(shí)驗(yàn)鼎糶疆_；，JC塒返眄種細(xì)胞集藩J侈戚的抑制作川人J’劉_|1它細(xì)0Ⅱ．1翻此．它J匝JTDITI0MCF一7目LH～1．29L塒種細(xì)胞樂N0牛K從而影響細(xì)胞溉惶，CP刈7刊，TTLLL№,系活性泣打彩LLLH．J{兒HOCCHST染包自㈨胞成驥落空驗(yàn)牲小XF7種圳胞沒柯L塒U作玎1。

簡(jiǎn)介：博士學(xué)位論文論文題目RAP1GAP對(duì)急性髓系白血病細(xì)胞生物學(xué)特性的影響及作用機(jī)理的研究研究生姓名邱婷婷指導(dǎo)教師姓名陳子興專業(yè)名稱內(nèi)科血液病學(xué)研究方向白血病的發(fā)病機(jī)制論文提交日期2013年5月RAP1GAP對(duì)急性髓系白血病細(xì)胞生物學(xué)特性的影響及作用機(jī)理的研究中文摘要IRAP1GAP對(duì)急性髓系白血病細(xì)胞生物學(xué)特性的影響及作用機(jī)理的研究中文摘要目的和意義目的和意義RAP1GAP屬于GTP酶激活蛋白（GTPASEACTIVATINGPROTEINSGAPS）家族，在RAP1這種小G蛋白GTPGDP循環(huán)中起到重要作用。鳥苷酸交換蛋白（GUANINENUCLEOTIDEEXCHANGEFACTSGEPS）使RAP1由結(jié)合GDP的非活性狀態(tài)轉(zhuǎn)化為結(jié)合GTP的活性狀態(tài)，而RAP1GTP的內(nèi)在水解酶活性很低，需要GAPS加速GTP的水解，使活化的下游信號(hào)及時(shí)終止。RAP1RASPROXIMATE1是RAS家族中的一員，通過(guò)MEKERK途徑影響細(xì)胞的增殖和分化；并調(diào)節(jié)INTEGRINS介導(dǎo)的細(xì)胞粘附和遷移，許多研究表明RAP1和腫瘤的關(guān)系密切，其上游調(diào)節(jié)分子也參與了腫瘤的發(fā)生發(fā)展。近年來(lái)在胰腺癌、甲狀腺癌、鱗狀細(xì)胞癌、黑色素瘤的研究中發(fā)現(xiàn)，RAP1GAP在這些腫瘤中表達(dá)下調(diào)，并且和腫瘤細(xì)胞的增殖、遷移相關(guān)，RAP1GAP被認(rèn)為有可能是一潛在的抑癌基因。本實(shí)驗(yàn)室的前期研究發(fā)現(xiàn)RAP1GAP可能在骨髓增生異常綜合征（MYELODYSPLASTICSYNDROMESMDS）發(fā)病機(jī)制中起作用。本試驗(yàn)擬通過(guò)構(gòu)建RAP1GAP慢病毒表達(dá)載體轉(zhuǎn)染急性髓系白血病細(xì)胞株和動(dòng)物體內(nèi)模型來(lái)研究RAP1GAP對(duì)白血病細(xì)胞生物學(xué)特性的影響，探討RAP1GAP在急性髓系白血?。ˋCUTEMYELOIDLEUKEMIAAML）發(fā)病機(jī)制中的作用。方法方法第一部分第一部分實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)AML患者、非惡性腫瘤血液病患者骨髓單個(gè)核細(xì)胞（BONEMARROWMONONUCLEARCELLSBMNCS）以及AML細(xì)胞株（NB4、HL60、SHI1和U937）RAP1GAPMRNA表達(dá)水平，WESTERNBLOT檢測(cè)RAP1GAP蛋白表達(dá)水平；用含有BAMHI酶切位點(diǎn)的上下游引物將RAP1GAPCDNA克隆至含有黃綠色熒光蛋白（FLAVOVIRENSFLUESCENTPROTEINYFP）的慢病毒表達(dá)載體PRRLVENUS，磷酸鈣共沉

簡(jiǎn)介：中南大學(xué)博士學(xué)位論文MMP2在人腦膠質(zhì)瘤中的表達(dá)及姜黃素對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞和HUVEC生物學(xué)特性的影響姓名鐘喆申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)外科學(xué)指導(dǎo)教師袁賢瑞20090501中南大學(xué)博十學(xué)位論文中文摘要及20例高度惡性者IIIIV級(jí)；另取術(shù)前無(wú)瞳孔散大的腦外傷病人行內(nèi)減壓手術(shù)的新鮮腦組織7例作為對(duì)照。用RTPCR方法檢測(cè)其MMP2MRNA的表達(dá)。另收集這些膠質(zhì)瘤組織和腦組織的石蠟標(biāo)本，用免疫組織化學(xué)檢測(cè)MMP2蛋白、VIII因子、KI一67的表達(dá)情況。并分析MMP2蛋白的表達(dá)與膠質(zhì)瘤的病理分級(jí)、膠質(zhì)瘤KI一67標(biāo)記指數(shù)LI、微血管密度MVD的關(guān)系。用姜黃素干預(yù)膠質(zhì)瘤細(xì)胞，檢測(cè)姜黃素對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞MMP2表達(dá)的影響；再用姜黃素干預(yù)膠質(zhì)瘤細(xì)胞和HUVEC，用MTT法檢測(cè)膠質(zhì)瘤細(xì)胞細(xì)胞及HUVEC的增殖活性；結(jié)晶紫染色法檢測(cè)HUVEC的粘附及遷移能力。結(jié)果①檢測(cè)到MMP2MRNA及其蛋白在人腦膠質(zhì)瘤中存在表達(dá)，MMP2蛋白表達(dá)主要定位于膠質(zhì)瘤細(xì)胞的胞漿，且其表達(dá)與腫瘤的惡性程度X23993，尺O01，KI一67嚴(yán)O661，尺O01及MVDR0557，尺O01有正相關(guān)性；MMP2在正常腦組織中沒有表達(dá)。②膠質(zhì)瘤細(xì)胞中存在MMP2MRNA的表達(dá)。姜黃素對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞中MMP2MRNA表達(dá)有顯著的下調(diào)作用PO01。③加入姜黃素干預(yù)后，膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖活性亦明顯低于對(duì)照組尸O01；姜黃素對(duì)單純和混合培養(yǎng)的HUVEC增殖活性、遷移能力有明顯影響尸O01。結(jié)論1人腦膠質(zhì)瘤組織和細(xì)胞中可檢測(cè)出MMP2表達(dá)。MMP2的表達(dá)與膠質(zhì)瘤惡性程度、KI67及MVD具有正相關(guān)性。提示MMP2在膠質(zhì)瘤的生長(zhǎng)、侵襲中發(fā)揮重要作用。2姜黃素可以下調(diào)膠質(zhì)瘤細(xì)胞MMP2MRNA的表達(dá)。3姜黃素可以明顯抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖活性。4姜黃素可以抑制HUVEC的增殖、粘附、遷徙能力。提示姜黃素還可以抑制血管生成，起到抗腫瘤和抗血管生成的雙重作用。關(guān)鍵詞基質(zhì)金屬蛋白酶一2，膠質(zhì)瘤，血管生成，人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞，姜黃素II

簡(jiǎn)介：博士學(xué)位論文密級(jí)ADRML在肝細(xì)胞癌中的生物學(xué)作用及其對(duì)NFKB活性的影響B(tài)IOLOGICALFUNCTIONOFADRMLINHEPATOCELLULARCARCINOMAANDITSEFFICTNF‘。?！瓵CTIVITYARCLNOMAANDITSELLECTONNKBACTIVI鉀作者姓名楊鑫學(xué)科專業(yè)臨床醫(yī)學(xué)外科學(xué)院系、所湘雅二醫(yī)院指導(dǎo)教師尹邦良教授論文答辯日期竺竺蘭翌答辯委員會(huì)主彪盈塹7中南大學(xué)二。一二年五月博士學(xué)位論文中文摘要摘要目的原發(fā)性肝癌是全球范圍內(nèi)第五大最為常見的惡性腫瘤，并高居全球惡性腫瘤死因第二位。目前全球原發(fā)性肝癌病人中最為常見的病理類型是肝細(xì)胞癌，所占比例大約為70％到85％。盡管肝細(xì)胞癌已被深入研究多年，其病因及分子生物學(xué)機(jī)制尚未完全闡明。與此同時(shí)，目前針對(duì)肝細(xì)胞癌的治療手段仍十分有限，肝癌患者的預(yù)后仍不容樂觀。因此，研究探索與HCC發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)的分子生物學(xué)機(jī)制對(duì)于提高HCC診斷及治療水平具有十分重大的意義。ADRMLADHESIONREGULATINGMOLECULE1是真核細(xì)胞26S蛋白酶體重要的泛素受體之一，并且能與蛋白酶體19S調(diào)節(jié)亞基通過(guò)帽狀結(jié)構(gòu)相連結(jié)從而將去泛素化酶UCH37募集至26S蛋白酶體。近年來(lái)越來(lái)越多的研究表明ADRML在多種惡性腫瘤中呈高表達(dá)狀態(tài)，并且可能扮演了類似癌基因的角色。盡管如此，ADRML肝細(xì)胞癌發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的作用尚不明了。在本課題中，我們研究了ADRML在肝細(xì)胞癌中的表達(dá)情況、ADRML在肝癌細(xì)胞惡性生物學(xué)行為中的功能作用及其可能的下游分子機(jī)制，以期為肝細(xì)胞癌的診斷、治療提供新的潛在分子靶點(diǎn)。方法采用實(shí)時(shí)定量RTPCR和免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)肝細(xì)胞癌組織和癌旁肝組織ADRMLMRNA和蛋白表達(dá)情況，采用RTPCR和WESTERNBLOT檢測(cè)三種不同轉(zhuǎn)移潛能肝癌細(xì)胞HEP3B、MHCC97一L和MHCC97HADRMLMRNA和蛋白表達(dá)水平；利用短發(fā)夾干擾RNA技術(shù)沉默MHCC97一H細(xì)胞ADRML表達(dá)水平，并采用MTT、1

簡(jiǎn)介：南昌大學(xué)碩士學(xué)位論文急性淋巴細(xì)胞白血病臨床和生物學(xué)特征與預(yù)后分析姓名趙廣芬申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)內(nèi)科學(xué)（血液?。┲笇?dǎo)教師陳國(guó)安201206摘要7172例ALL患者分別進(jìn)了TCRV、BCR／ABL、MLL等融合基因檢測(cè)。成人ALL病例中，不同基因改變的各組間生存期無(wú)明顯差異。兒童ALL中，不同基因改變的各組間生存期有顯著性差異。以融合基因陰性ALL病例OS最高445月，而有MLL基因改變的ALL的OS最低175月。887例成人ALL按MICM預(yù)后分為標(biāo)危、高危兩組。標(biāo)危組ALL中位OS175月明顯高于高危組ALL15月。85例兒童ALL按MICM預(yù)后分為低危、標(biāo)危及高危三組。其中，以低危組ALL的中位OS41月最高，其次為標(biāo)危組38月，高危組的中位OS22月最低。9兒童組ALL的CR率976％顯著高于成人組ALL862％。兒童組ALL的DFS47％顯著高于成人組1867％。使用LASP組與未使用組CR率無(wú)顯著性差異836％VS923％，P0281，但OS有著顯著性差異20月VS135月，P0028。使用CTX組TALL的CR率875％顯著高于未使用CTX組333％。10成人ALL組DFS與兒童組相比有著顯著性差異P0000，成人組復(fù)發(fā)率60％顯著高于兒童組157％，其中CNSL復(fù)發(fā)有5例成人組3例，兒童組2例。結(jié)論1成人ALL較兒童ALL預(yù)后差，兩者問OS、DFS存在顯著性差異，復(fù)發(fā)率高于兒童組。2成人ALL外周血WBC顯著高于兒童組。ALL外周血白細(xì)胞與生存期呈負(fù)相關(guān)。3檢測(cè)成人ALL病例LDH、融合基因改變，對(duì)判斷療效與監(jiān)測(cè)病情有重要的臨床價(jià)值。4ALL免疫分型中OS以T型最低，其次為B型，前B型OS最高。5FAB形態(tài)學(xué)分類對(duì)ALL患者預(yù)后臨床指導(dǎo)意義有限。6ALL變異性染色體以PH染色體陽(yáng)性最多見。成人PH染色體陽(yáng)性的ALL預(yù)后較正常核型差。染色體核型對(duì)ALL的預(yù)后判斷具有重要的臨床意義。7MICM危險(xiǎn)度分級(jí)在判斷成人與兒童ALL預(yù)后具有較好的臨床價(jià)值。8加用LASP可顯著提高ALL患者OS；加用CTX可能有助于提高TALL

簡(jiǎn)介：中圖分類號(hào)盟3墨UDC610博士學(xué)位論文學(xué)校代碼Q533PTEN甲基化在骨肉瘤發(fā)生中的作用及5AZACDR去甲基化對(duì)其MG63細(xì)胞生物學(xué)行為的影響EFFECTONPTENMETHYLATIONINOSTEOSARCOMAOCCURRINGANDINFLUENCEONCYTOLOGYBEHAVIOROFCELLLINEMG一63DEMETHYLATEDBY5AZACDR作者姓名羅一學(xué)科專業(yè)臨床醫(yī)學(xué)研究方向外科學(xué)學(xué)院系、所湘雅醫(yī)院指導(dǎo)教師鄧展生教授論文答辯日期加，3，F(xiàn)、砷答辯委員會(huì)主席趟一中南大學(xué)2013年5月博士學(xué)位論文中文摘要中文摘要骨肉瘤OSTEOSARCOMA是起源于間胚葉組織的最常見的原發(fā)性惡性骨腫瘤，其生物學(xué)性狀極為復(fù)雜，有關(guān)其發(fā)病機(jī)理仍未完全清楚，診斷和治療的方法依然有限。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為，腫瘤的發(fā)生是一個(gè)多階段、多因素和多基因綜合作用的過(guò)程，其生物學(xué)本質(zhì)是細(xì)胞內(nèi)遺傳調(diào)控和表觀遺傳調(diào)控的紊亂與失調(diào)。近年來(lái)以不基于基因序列改變?yōu)樘卣鞯谋碛^遺傳調(diào)控在腫瘤發(fā)生中的作用各受關(guān)注，其主要表現(xiàn)形式是DNA甲基化，它可以直接導(dǎo)致相關(guān)基因的表觀遺傳轉(zhuǎn)錄沉默?；駾NA甲基化有助于腫瘤發(fā)生的早期預(yù)測(cè)及預(yù)后評(píng)估。癌基因的低甲基化、抑癌基因的高甲基化和整體基因組的低甲基化是DNA甲基化失衡狀態(tài)的三種經(jīng)典現(xiàn)象，其中尤以抑癌基因的高甲基化與腫瘤的關(guān)系最為密切，它是抑癌基因轉(zhuǎn)錄失活的主要途徑，甚至可能成為調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄的唯一的機(jī)制。PTEN是迄今為止發(fā)現(xiàn)的第一個(gè)具有雙特異性磷酸酶活性的抑癌基因，是抑癌基因家族中繼P53發(fā)現(xiàn)后在人類腫瘤中突變及缺失率最高的又一明星分子。PTEN具有抑制腫瘤生長(zhǎng)、促進(jìn)細(xì)胞凋亡及抑制血管生成等作用，能負(fù)性調(diào)控P13K／AKT及抑制MAPK的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路對(duì)腫瘤產(chǎn)生影響。已有研究表明在很多人類惡性腫瘤中都存在PTEN的異常甲基化，但關(guān)于其與骨肉瘤的關(guān)系卻鮮見報(bào)道。了解骨肉瘤中PTEN的甲基化狀態(tài)，對(duì)尋找骨肉瘤早期診斷可能的分子標(biāo)志物具有重要的臨床意義。II

簡(jiǎn)介：目的蛋白質(zhì)糖基化是一種重要的翻譯后修飾，它參與和調(diào)控生物體的許多生命活動(dòng)。隨著蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，蛋白質(zhì)糖基化研究越來(lái)越受到廣泛的重視。CD147是高度糖基化的跨膜糖蛋白，屬于免疫球蛋白超家族的成員。CD147是細(xì)胞表面多功能糖蛋白，廣泛表達(dá)于各種細(xì)胞中，如淋巴母細(xì)胞，炎癥細(xì)胞，特別在腫瘤細(xì)胞高表達(dá)。CD147主要通過(guò)誘導(dǎo)基質(zhì)金屬蛋白酶活性參與組織重構(gòu)，參與許多生理和病理過(guò)程，包括精子發(fā)生、受精、神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)形成和發(fā)育、HIV感染和腫瘤轉(zhuǎn)移。CD147由2個(gè)胞外IG結(jié)構(gòu)域，1個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域和1個(gè)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域組成。從CD147N端起，第一個(gè)胞外IG結(jié)構(gòu)域與MMPS誘導(dǎo)活性及CD147自身寡聚有關(guān)；第二個(gè)胞外IG結(jié)構(gòu)域與窖蛋白（CAVEOLIN1，CAV1）存在相互作用。由于N糖基化不同，CD147同時(shí)表現(xiàn)為高糖型CD147（HGCD147，分子量4066KDA）和低糖型CD147（LGCD147，分子量32KDA）。有文獻(xiàn)報(bào)道，N糖基化對(duì)CD147的誘導(dǎo)活性起促進(jìn)作用，但CD147糖基化的功能尚有待深入研究。本文基于本實(shí)驗(yàn)室已構(gòu)建的野生型CD147真核表達(dá)載體，利用快速PCR定點(diǎn)突變的方法，構(gòu)建CD147糖基化位點(diǎn)突變的真核表達(dá)載體，并將其穩(wěn)定表達(dá)于小鼠肝正常細(xì)胞IAR20中，觀察CD147的糖基化對(duì)細(xì)胞的生物學(xué)功能的影響。方法1利用快速PCR定點(diǎn)突變的方法，構(gòu)建CD147糖基化位點(diǎn)突變PCDNA31表達(dá)載體。2利用脂質(zhì)體將野生型CD147及其糖基化位點(diǎn)突變體表達(dá)載體轉(zhuǎn)染至小鼠肝正常細(xì)胞IAR20細(xì)胞上，以空表達(dá)載體做對(duì)照，經(jīng)G418篩選及RTPCR和WESTERNBLOT分析，獲得野生型CD147及其糖基化位點(diǎn)突變體穩(wěn)定表達(dá)株。3利用MTT法檢測(cè)穩(wěn)定表達(dá)野生型CD147及其糖基化位點(diǎn)突變體對(duì)IAR20細(xì)胞增殖能力的影響；利用體外基質(zhì)侵襲實(shí)驗(yàn)，觀察檢測(cè)穩(wěn)定表達(dá)野生型CD147及其糖基化位點(diǎn)突變體對(duì)IAR20細(xì)胞遷移和侵襲能力的影響。結(jié)果1、限制性內(nèi)切酶酶切和DNA測(cè)序鑒定表明，成功構(gòu)建小鼠CD147糖基化位點(diǎn)突變真核表達(dá)載體PCDNA31CD147（N154Q）和PCDNA31CD147（N44，154Q）。2、WESTERNBLOT和RTPCR結(jié)果表明，PCDNA31CD147WT，PCDNA31CD147N154Q和PCDNA31CD147N44，190Q在小鼠肝正常細(xì)胞IAR20細(xì)胞中穩(wěn)定表達(dá)野生型CD147和糖基化位點(diǎn)突變體CD147N154Q的分子量分別為44KDA和45KDA，糖基化位點(diǎn)突變體CD147N44，190Q表達(dá)為兩條帶，分子量分別為37KDA和42KDA。3、與轉(zhuǎn)染空載體和未轉(zhuǎn)染細(xì)胞相比，穩(wěn)定表達(dá)野生型CD147和糖基化位點(diǎn)突變體CD147N154Q的IAR20細(xì)胞增殖能力和遷移能力顯著增強(qiáng)（P005）。4、與轉(zhuǎn)染空載體和未轉(zhuǎn)染細(xì)胞相比，穩(wěn)定表達(dá)野生型CD147、糖基化位點(diǎn)突變體CD147（N154Q）和CD147（N44，190Q）均不增加IAR20細(xì)胞侵襲能力。結(jié)論CD147的穩(wěn)定表達(dá)促進(jìn)小鼠肝正常細(xì)胞IAR20細(xì)胞的增殖和遷移，而CD147的這種促進(jìn)作用與CD147糖基化程度有關(guān)。

簡(jiǎn)介：復(fù)旦大學(xué)碩士學(xué)位論文MIR一21與神經(jīng)母細(xì)胞瘤生物學(xué)特性的相關(guān)性研究及意義分析THESIGNIFICANCEANDCORRELATIONOFMIERORNA一21WITHBIOLOGICALFEATURESOFNEUROBLASTOMA碩士研究生周耀東學(xué)科及專業(yè)兒科學(xué)外科導(dǎo)師鄭珊教授導(dǎo)師組成員李凱副教授陳蓮副教授2011年4月10日MIR一21與神經(jīng)母細(xì)胞瘤生物學(xué)特性的相關(guān)性研究及意義分析碩士論文英漢詞匯對(duì)照MIR一21與神經(jīng)母細(xì)胞瘤生物學(xué)特性的相關(guān)性研究及意義分析常用縮略詞匯英漢對(duì)照表英文縮寫NBPCRMIRNARTUHFHFISHHE英文全稱中文全稱NEUROBLASTOMA神經(jīng)母細(xì)胞瘤POLYMERASEEHAINREAETION聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)MIERORNA微小RNAREVERSETRANSERIPTION逆轉(zhuǎn)錄UN幾VORABLEHISTOLOGY預(yù)后不良型FAVORABLEHISTOLOGY預(yù)后良好型NUORESEENEEINSITUHYBRIDIZATION熒光原位免疫雜交技術(shù)HEMATOXYLINANDEOSINSTAINHE染色

簡(jiǎn)介：上海交通大學(xué)碩士學(xué)位論文雷帕霉素對(duì)人骨肉瘤細(xì)胞及干細(xì)胞中雷帕霉素靶蛋白傳導(dǎo)通路的生物學(xué)作用及意義碩士研究生劉沛宜學(xué)號(hào)1107529673導(dǎo)師張偉濱教授申請(qǐng)學(xué)位醫(yī)學(xué)碩士學(xué)科外科學(xué)培養(yǎng)單位上海市傷骨科研究所授予學(xué)位單位上海交通大學(xué)DISSERTATIONSUBMITTEDTOSHANGHAIJIAOTONGUNIVERSITYFTHEDEGREEOFMASTERTHEOSTEOSARCOMACELLTHEOSTEOSARCOMASTEMCELLCYTOBIOLOGICALBEHAVIINHIBITEDBYRAPAMYCINTHROUGHTHEMAMMALIANTARGETOFRAPAMYCINSIGNALINGPATHWAYCIDATELIUPEIYISTUDENTID1107529673SUPERVISPROFZHANGWEIBINACADEMICDEGREEAPPLIEDFMASTEROFMEDICALSPECIALITYTHOPEDICSURGERYAFFILIATIONSHANGHAIINSTITUTEOFTHOPEDICSTRAUMATOLOGYDEGREECONFERRINGINSTITUTIONSHANGHAIJIAOTONGUNIVERSITY

簡(jiǎn)介：實(shí)驗(yàn)?zāi)康姆蚀蠹?xì)胞主要存在于粘膜和結(jié)締組織中借助于其表面表達(dá)的IGE的高親合力受體FCERI與抗變應(yīng)原的特異性抗體IGE的交聯(lián)形成IGEFCΕRI復(fù)合物進(jìn)而引發(fā)Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)。肥大細(xì)胞胞漿中存在大量顆粒其內(nèi)儲(chǔ)存組胺等生物介質(zhì)活化的肥大細(xì)胞也可新合成細(xì)胞因子如TNFΑ、IL6和IL13等生物介質(zhì)。為此本研究擬利用ELF1SIRNA轉(zhuǎn)染技術(shù)和體外TSA刺激等方式探討轉(zhuǎn)錄因子ELF1和組蛋白去乙?；敢种苿㏕SA對(duì)小鼠骨髓來(lái)源的肥大細(xì)胞BMMC表面FCΕRI基因表達(dá)及其生物學(xué)功能的調(diào)控作用機(jī)制。進(jìn)而為肥大細(xì)胞相關(guān)的變態(tài)反應(yīng)的研究提供新的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。實(shí)驗(yàn)方法一、小鼠BMMC的制備BALBC小鼠雌性68周齡。鈍性分離小鼠雙側(cè)股骨用1ML注射器吸取少量RPMI1640培養(yǎng)液沖洗骨髓內(nèi)細(xì)胞至無(wú)菌平皿中。收集液體至10ML離心管中1000RPM4℃離心5MIN棄上清。用10MLBMMC培養(yǎng)液重懸細(xì)胞移至10CM無(wú)菌培養(yǎng)皿37℃培養(yǎng)。二、ELF1SIRNA和ELF1表達(dá)質(zhì)粒體外轉(zhuǎn)染按照MOUSEMACROPHAGENUCLEOFECT試劑盒說(shuō)明操作選擇Y001程序分別將20ΜMELF1SIRNA、CONTROLSIRNA和FITC標(biāo)記的寡核苷酸經(jīng)電轉(zhuǎn)至小鼠1106BMMC中37℃分別培養(yǎng)24H待試劑盒轉(zhuǎn)染效率、ELF1MRNA表達(dá)和FCΕRIΑ、Β、Γ鏈MRNA表達(dá)檢測(cè)和48H待ELF1蛋白表達(dá)檢測(cè)。同法將1ΜGPGVB2ΑNN06或PGL3BASIC分別與25NGPRLCMV內(nèi)參和20ΜMELF1SIRNACONTROLSIRNA共同電轉(zhuǎn)染至1106BMMC中；另將5ΜGPGVB2ΑNN06或PGL3BASIC分別與25NGPRLCMV內(nèi)參和10ΜGPCR31ELF1或?qū)φ誔CR31經(jīng)BIORADGENEPULSERⅡ電轉(zhuǎn)染至BMMC中37℃孵育24H后收集BMMC待FCΕRIΑ鏈啟動(dòng)子熒光素酶活性的分析。三、ELF1表達(dá)鑒定收集24HELF1及CONTROLSIRNA核轉(zhuǎn)染的BMMC按照RNEASYRMICRO試劑盒的說(shuō)明提取細(xì)胞總RNA利用HIGHCAPACITYCDNAREVERSETRANION試劑盒反轉(zhuǎn)錄合成CDNA第一鏈利用TAQMANUNIVERSALPCRMASTERMIX和7500REALTIMEPCR儀進(jìn)行REALTIMEPCR分析靶基因ELF1MRNA表達(dá)。ELF1引物為MM00468217_M1。另收集48HELF1及CONTROLSIRNA轉(zhuǎn)染的BMMC裂解細(xì)胞后經(jīng)75％SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳電轉(zhuǎn)膜15H后用ANTIELF1AB和ANTIACTINAB作為第一抗體4℃過(guò)夜孵育。洗膜后用ALEXAFLU680GOATANTIRABBITIGG和IRDYE800GOATANTIMOUSEIGG分別作為抗ELF1和ACTIN的第二抗體進(jìn)行孵育1H洗膜后用ODYSSEYINFRAREDIMAGINGSYSTEM檢測(cè)ELF1蛋白的表達(dá)。四、BMMCFCΕRIΑ鏈啟動(dòng)子活性檢測(cè)收集轉(zhuǎn)染后的BMMC按照DUALLUCIFERASEASSAY試劑盒說(shuō)明經(jīng)MICROLUMATPLUS分析FCΕRLΑ鏈啟動(dòng)子熒光素酶活性。五、FCΕRIΑ、Β和Γ鏈MRNA表達(dá)水平的檢測(cè)收集ELF1SIRNACONTROLSIRNA轉(zhuǎn)染后的BMMC。利用RNEASYMICROKIT提取總RNA利用HIGHCAPACITYCDNAREVERSETRANIONKIT合成CDNA第一鏈利用TAQMANUNIVERSALPCRMASTERMIX和7500REALTIMEPCRSYSTEMWITHTAQMANGENEEXPRESSION進(jìn)行REALTIMEPCR分析靶基因Α鏈MM00438867_M1、Β鏈MM00442780_ML和Γ鏈MM00438869_G1MRNA表達(dá)水平。六、PU1結(jié)合FCΕRIΑ鏈啟動(dòng)子能力檢測(cè)收集ELF1SIRNACONTROLSIRNA轉(zhuǎn)染后的BMMC經(jīng)超聲破碎細(xì)胞沉淀染色質(zhì)DNA。再分別與ANTIPU1GOATAB和GOATIGG4℃孵育1H后經(jīng)7500REALTIMEPCRSYSTEM分析PU1結(jié)合FCΕRIΑ鏈啟動(dòng)子的能力。所用引物為小鼠FCΕRIΑ鏈啟動(dòng)子821正義鏈82565’GGCATAGCTGATGAGTTAACCAGATAC3’反義鏈1225’TATGGETTCGAAAATAGGCTTGA3’和TAQMANPROBE51335’FAMCAGAAGACATTTCCTTCTCMGB3’。七、TSA體外刺激BMMC調(diào)制正常小鼠BMMC濃度至1106ML經(jīng)0210或50NMTSA37℃孵育24H待BMMCFCΕRI表達(dá)和功能檢測(cè)或48H待BMMC凋亡檢測(cè)。八、BMMC表面FCΕRI表達(dá)檢測(cè)收集ELF1SIRNA對(duì)照SIRNA轉(zhuǎn)染的BMMC或TSA體外刺激的BMMC經(jīng)242G阻斷細(xì)胞表面FC受體后再與PEANTIFCΕRIΑ鏈抗體4℃避光孵育1HPBS洗細(xì)胞2遍用FACSCALIBUR流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞表面FCΕRI表達(dá)。九、BMMC凋亡檢測(cè)收集TSA體外刺激48H的BMMC經(jīng)5ΜGMLPROPIDIUMIODIDEPI和ANNEXINVFITCBDBIOSCIENCES室溫染色15MIN后FACSCALIBUR流式細(xì)胞儀分析BMMC的凋亡情況。十、肥大細(xì)胞脫顆粒能力檢測(cè)收集不同濃度TSA體外刺激的BMMC經(jīng)1ΜGMLIGE4℃致敏1H重懸于TYRODE’S緩沖液中1106ML再經(jīng)1ΜGMLANTIIGE37℃刺激45MIN后收集上清液。加入PNITROPHENYLNACETYLΒDGLUCOPYRANOSIDE作為底物37℃顯色90MIN后經(jīng)酶標(biāo)儀測(cè)定OD405值ODSAMPLE。IGE致敏細(xì)胞經(jīng)2％TRITON處理的培養(yǎng)上清液的OD值作為細(xì)胞顆粒的最大釋放量ODTOTAL。IGE致敏細(xì)胞經(jīng)TYPRODE’S緩沖液孵育的上清液的OD值為ODBASEΒ氨基己糖苷酶的釋放量％ODSAMPLEODBASEODTOTALODBASW100％。十一、BMMC分泌合成IL6檢測(cè)TSA體外刺激的BMMC經(jīng)1ΜGMLIGEANTIIGE體外刺激1H后提取細(xì)胞總RNA反轉(zhuǎn)錄成CDNA經(jīng)REALTIMEPCR檢測(cè)IL6MRNA水平；經(jīng)體外刺激3H或6H后收集培養(yǎng)上清按照IL6ELISAKIT說(shuō)明檢測(cè)上清中IL6分泌水平。十二、BMMCIL6啟動(dòng)子上組蛋白乙酰化水平檢測(cè)TSA體外刺激的BMMC經(jīng)1ΜGMLIGEANTIIGE體外刺激30MIN后超聲破碎細(xì)胞沉淀染色質(zhì)DNA。再與ANTIACETYLHISTONEH3RABBITIGG、ANTIACETYLHISTONEH4RABBITANTISERUM或RABBITIGG4℃孵育1H后經(jīng)7500REALTIMEPCRSYSTEMAPPLIEDBIOSYSTEMS分析乙?；M蛋白H3和H4結(jié)合IL6啟動(dòng)子的能力。所用引物為小鼠IL6啟動(dòng)子849正義鏈IL684F5’CCCATGAGTCTCAAAATTAGAGAGTTG3’反義鏈IL69R5’CAGAGCAGAATGAGCTACAGACATC3’和TAQMANPROBEIL656P5’CTCCTAATAAATATGAGACTGGG3’。結(jié)論1、小鼠巨噬細(xì)胞核轉(zhuǎn)染試劑盒AMAXA同樣適用于小鼠BMMC的核酸轉(zhuǎn)染。2、ELF1SIRNA可特異性降低小鼠BMMC的ELF1表達(dá)。3、ELF1通過(guò)抑制PU1與Α鏈啟動(dòng)子之間的結(jié)合抑制小鼠BMMCFCΕRIΑ鏈啟動(dòng)子的活性和轉(zhuǎn)錄。4、ELF1可抑制小鼠BMMCFCΕRIΑ鏈MRNA的表達(dá)但對(duì)Β和Γ鏈的轉(zhuǎn)錄未見有意義的影響。5、ELF1單獨(dú)作用尚不能影響小鼠BMMCFCΕRI的表面表達(dá)。6、TSA以劑量依賴方式抑制FCΕRI介導(dǎo)的BMMC活化。7、50NMTSA通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡降低小鼠BMMCFCΕRI的表達(dá)抑制FCΕRI介導(dǎo)的BMMC脫顆粒和IL6合成分泌。8、TSA增強(qiáng)小鼠FCΕRI介導(dǎo)活化的BMMCIL6啟動(dòng)子組蛋白乙?；乃?。

簡(jiǎn)介：獨(dú)創(chuàng)聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過(guò)的研究成果，也不包含未獲得逵；墊邀直墓他益要掛別岜明毆奎攔亙窒≥或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書使用過(guò)的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名走導(dǎo)簽字日期加，夠年石月IO日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解桂林醫(yī)學(xué)院有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)桂林醫(yī)學(xué)院可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。同時(shí)授權(quán)中國(guó)學(xué)術(shù)期刊光盤版電子雜志社、中國(guó)科學(xué)技術(shù)信息研究所將本學(xué)位論文收錄到中國(guó)優(yōu)秀博碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)、中國(guó)學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)，并通過(guò)網(wǎng)絡(luò)向社會(huì)公眾提供信息服務(wù)。保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書學(xué)位論文作者簽名越導(dǎo)導(dǎo)師簽字確簽字日期ⅥY年6月LON簽字日期Ⅵ7乒年多月F／日鞣花酸對(duì)骨髓瘤SP2／O細(xì)胞的生物學(xué)作用中文摘要目的本研究課題以小鼠骨髓瘤SP2／O細(xì)胞株作為研究對(duì)象，運(yùn)用了體外細(xì)胞培養(yǎng)和分子生物學(xué)技術(shù)等科研方法，探索鞣花酸對(duì)多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞增殖、凋亡和細(xì)胞周期的影響并檢測(cè)與癌細(xì)胞發(fā)生、發(fā)展密切關(guān)聯(lián)的腫瘤相關(guān)分子COX一2的表達(dá)情況。通過(guò)分析鞣花酸對(duì)小鼠骨髓瘤SP2／O細(xì)胞的生物學(xué)作用，為臨床手術(shù)治療M肋，有效清除病灶內(nèi)骨髓瘤細(xì)胞提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法體外培養(yǎng)小鼠骨髓瘤SP2／O細(xì)胞，設(shè)立3個(gè)階梯濃度藥物組和1個(gè)對(duì)照組，對(duì)照組不用鞣花酸干預(yù)，實(shí)驗(yàn)組分別加入20，40和60PG／ML鞣花酸干預(yù)。1、用倒置顯微鏡觀察，不同濃度鞣花酸處理的實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組骨髓瘤SP2／O細(xì)胞48H后的細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化并拍照。2、用20，40和60“G／ML鞣花酸處理骨髓瘤SP2／O細(xì)胞48H后，采用HOECHST33258染色法染色，然后在倒置熒光顯微鏡下對(duì)比實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組細(xì)胞的凋亡情況并拍照。3、通過(guò)細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)婀T法檢測(cè)以上濃度鞣花酸處理48H后的SP2／O細(xì)胞的細(xì)胞增殖情況及細(xì)胞活性。4、收集以上4組處理24H后的SP2／O細(xì)胞，用流式細(xì)胞儀檢測(cè)鞣花酸對(duì)骨髓瘤SP2／O細(xì)胞早期凋亡的影響。5、用流式細(xì)胞儀測(cè)定，以上濃度藥物處理48H后的SP2／O細(xì)胞各個(gè)細(xì)胞周期中的細(xì)胞比率。6、通過(guò)WESTERNBLOTTING技術(shù)檢測(cè)腫瘤增值與凋亡相關(guān)蛋白COX一2在不同濃度藥物處理后的SP2／O細(xì)胞中表達(dá)量的變化。結(jié)果1、不同濃度藥物處理48H后的

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多骨髓內(nèi)皮祖細(xì)胞的生物學(xué)特性及其對(duì)神經(jīng)膠質(zhì)瘤的作用.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：【研究背景】增生性瘢痕和瘢痕疙瘩是臨床上常見的兩種病理性瘢痕，常引起局部不同程度的畸形和功能障礙。由于人們對(duì)增生性瘢痕和瘢痕疙瘩形成的原因、機(jī)理認(rèn)識(shí)不足，雖然治療方案較多，臨床療效還不盡如人意。迄今還沒有一種藥物或技術(shù)能夠確保成功預(yù)防和治療增生性瘢痕和瘢痕疙瘩。姜黃素是從姜科姜黃屬多年生的草本植物姜黃中提取的天然色素，為姜黃的主要活性成分。研究提示姜黃素可能是一種抗纖維化制劑。但是，姜黃素對(duì)生物學(xué)特性異常的增生性瘢痕和瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞有無(wú)抑制作用，機(jī)理如何，能否用于治療增生性瘢痕和瘢痕疙瘩，尚未見報(bào)道?！狙芯磕康摹?研究姜黃素濃度變化對(duì)體外培養(yǎng)的增生性瘢痕成纖維細(xì)胞增殖及膠原合成的影響，初步探討其治療增生性瘢痕的作用機(jī)制。2觀察在體外培養(yǎng)的瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞給予不同濃度的姜黃素處理后對(duì)細(xì)胞增殖及膠原合成的影響，初步分析其可能的作用機(jī)制?！狙芯?jī)?nèi)容】1姜黃素對(duì)體外培養(yǎng)的增生性瘢痕成纖維細(xì)胞的生物學(xué)影響；2姜黃素對(duì)體外培養(yǎng)的瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞的生物學(xué)影響?！狙芯拷Y(jié)果】1姜黃素對(duì)體外培養(yǎng)的增生性瘢痕成纖維細(xì)胞的增殖有明顯的抑制作用，并能明顯誘導(dǎo)增生性瘢痕成纖維細(xì)胞凋亡；同時(shí)可以抑制凋亡抑制基因BCL2的表達(dá)；2姜黃素處理后可明顯抑制增生性瘢痕成纖維細(xì)胞Ⅰ、Ⅲ型前膠原MRNA的表達(dá)；3姜黃素可明顯抑制瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞的增殖，并有效抑制細(xì)胞膠原的合成；4姜黃素可明顯抑制瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞Ⅰ、Ⅲ型前膠原MRNA的表達(dá)，同時(shí)可以抑制結(jié)締組織生長(zhǎng)因子的表達(dá)。【研究結(jié)論】1姜黃素具有體外抗增生性瘢痕的作用，并且具有促進(jìn)細(xì)胞凋亡的作用，其誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的作用機(jī)制可能與抑制凋亡抑制基因BCL2有關(guān)；2姜黃素具有體外抗瘢痕疙瘩的作用其作用機(jī)制可能與姜黃素抑制結(jié)締組織生長(zhǎng)因子在瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞的表達(dá)有關(guān)。