簡介：中圖分類號UDC博士學位論文學校代碼密級10533公玨MICRORNA430靶向調控CXCR7對膀胱癌細胞生物學行為的影響及其機制的研究THESTUDYONROLESOFMIR430TARGETREGULATEDCXCR7INTHEBIOLOGICALBEHAVIOROFBLADDERCANCERCELLSANDTHEIRCORRESPONDINGMECHANISMS名劉磊業(yè)臨床醫(yī)學向外科學所湘雅二醫(yī)院師趙曉昆教授論文答辯日期一三■L答辯委員會主中南大學二。一三年五月姓專方系教者科究競導作學研學指博士學位論文中文摘要MICRORNA430靶向調控CXCR7對膀胱癌細胞生物學行為的影響及其機制的研究摘要目的膀胱癌是人類常見的惡性腫瘤，然而其增殖和侵襲的分子機制依舊不明。MICRORNASMIRNAS是一類微小的內源性非編碼的RNA，通過與靶位點MRNA的3’端非翻譯區(qū)UTR相互作用來抑制基因的表達。新近的數(shù)據(jù)表明，MIRNAS在各種生物過程，包括人類癌癥的發(fā)生發(fā)展侵襲轉移的調控中發(fā)揮著重要的作用。MIRNA430的研究主要是在斑馬魚上進行研究，MIR430已被證明與斑馬魚的早期胚胎發(fā)育有重要關系。然而，MIR一430在涉及人類惡性腫瘤的調控上暫時沒有報道。CXCR7是趨化因子SDF1A即CXCLL2的受體，其是一種具有7次跨膜的基質蛋白。CXCR7的高表達被很多研究報道在腫瘤的發(fā)生發(fā)展侵襲轉移中有增強作用，建議CXCR7作為癌癥治療中一個有吸引力的目標。YATES等發(fā)現(xiàn)CXCR7的表達在膀胱癌組織中增高，并且其增高的水平伴隨著高級別的腫瘤及腫瘤轉移。此外，CXCR7已被證實通過多種途徑與膀胱癌的增殖、遷移、侵襲有關，其中包括ERK，STAG與AKT等信號通路。本研究目的為驗證MIR430靶向作用于CXCR7，并進一步闡述這種靶向作用對膀胱癌細胞的影響及對其作用機制進行初步的研究。方法1、采用REALTIMEPCR檢測MIR一430在正常膀胱組織、癌旁組織

簡介：目的從SD雌性大鼠骨髓中分離培養(yǎng)骨髓間充質干細胞，并研究不同濃度確炎舒松對體外培養(yǎng)的骨髓間充質干細胞各種生物學特性的影響。方法1應用全骨髓貼壁法分離培養(yǎng)4周齡雌性SD大鼠骨髓間充質干細胞并鑒定。2以不同藥物濃度A1104MOLL，B5105MOLL，C1105MOLL，D1106MOLL，E1107MOLL，F(xiàn)0MOLL干預培養(yǎng)，顯微鏡觀察細胞形態(tài)變化。3以不同藥物濃度ABCDEF分別加入接種有BMSCS的96孔板中培養(yǎng)，另設一組只加培養(yǎng)基及相應的DMSO，每種濃度設6個復孔，24小時及48小時測定3孔對應吸光度值，分析實驗組與對照組增殖情況。4以不同濃度確炎舒松ABCDEF分別加入接種細胞后的六孔板中培養(yǎng)48小時，ANNEXINVFITC法檢測細胞凋亡情況，并記錄數(shù)據(jù)。5將BMSCS以適當濃度接種于若干六孔板中，A組加入地塞米松108ML抗壞血酸50UGMLΒ磷酸甘油10MMOLL，B組加入確炎舒松（106MOLL）抗壞血酸50UGMLΒ磷酸甘油10MMOLL，C組確炎舒松106MOLL，D組加入抗壞血酸50UGMLΒ磷酸甘油10MMOLL，E組不加任何藥物。每三天換液同時加入各自藥物培養(yǎng)21天，分別提取總RNA，應用RTPCR擴增OCN及ΒACTIN，并進行電泳，采取圖像進行應用QUANTITYONE軟件進行灰度分析。6將BMSCS以適當濃度接種于若干六孔板中，分為ABCDE（同上）五組，每三天換液同時加入各自藥物培養(yǎng)21天后進行茜素紅染色，觀察染色結果并拍照。結果1通過流式表面標記物的鑒定及分化能力的檢測表明此次試驗成功培養(yǎng)出大鼠骨髓間充值干細胞。2與對照組相比，ABCD組各組細胞數(shù)量減少，形態(tài)改變，而E組的數(shù)量及形態(tài)未見明顯不同。3各實驗組與對照組進行DUNTT檢驗，除E組（培養(yǎng)48小時）組外，余P值均＜001，有統(tǒng)計學意義。4流式細胞儀凋亡檢測結果經(jīng)統(tǒng)計學分析，DUNTT檢驗，除E組（107MOLL）外P1，其余各組與對照組相比都有統(tǒng)計學意義。5電泳結果應用QUANTITYONE軟件進行灰度分析（等高線定量法），結果與對照組（E組）相比，A、B組OCN表達變化與E組相比經(jīng)統(tǒng)計學分析有統(tǒng)計學意義，而C、D組無統(tǒng)計學意義。A、B組BMP2表達變化與對照組相比有統(tǒng)計學意義，C、D兩組BMP2變化與對照組相比無統(tǒng)計學意義。6ABC三孔茜素紅染色陽性，DE兩組茜素紅染色為陰性。結論1本次實驗通過全骨髓貼壁法成功分離培養(yǎng)出骨髓間充質干細胞。2本次實驗106104MOLL確炎舒松干預大鼠骨髓間充質干細胞后，其形態(tài)發(fā)生改變，對細胞生長具有抑制作用。3本次實驗106104MOLL確炎舒松組可引起大鼠骨髓間充質干細胞凋亡增加，提示我們局部注射時應控制濃度，減少副作用的產生。4本次試驗106MOLL確炎舒松與地塞米松108MOLL一樣，可促進大鼠骨髓間充質干細胞的成骨分化。

簡介：ATHESISSUBMITTEDTOZHENGZHOUUNIVERSITYFORTHEDEGREEOFMASTERIMPACTOFPHYTOESTROGENSDAIDZEINONAPOPTOSIS，DIFFERENTIATIONANDBIOLOGICALTRAITSINHUMANOSTEOSARCOMAM啪3CELLSBYJIELISUPERVISORPROFYUEBAILIDEPARTMENTOFBIOCHEMISTRYANDMOLECULARBIOLOGYBASICMEDICALCOLLEGEMARCH2014摘要植物雌激素大豆苷元對人骨肉瘤MG63細胞凋亡、分化和生物學性狀的影響研究生李潔導師李月白教授鄭州大學基礎醫(yī)學院生物化學與分子生物學教研室河南鄭州45000L摘要研究背景骨肉瘤OSTEO鼢RCO衄是骨組織中最常見的一種惡性程度高的骨腫瘤，其發(fā)生很可能起源于成骨細胞終末分化以及骨髓基質干細胞向成骨細胞分化的過程中。骨肉瘤細胞具有顯著的早期遷移能力與局部侵襲性，而這一特性也成為了骨肉瘤患者晚期致死的主要原因。因此深入研究骨肉瘤細胞的凋亡、分化及侵襲遷移等過程的信號通路并尋找可以有效的逆轉腫瘤細胞發(fā)生發(fā)展的分子靶點，可為骨肉瘤治療及腫瘤轉移抑制提供有價值的理論和實驗依據(jù)。研究表明，配體依賴轉錄因子核激素受體超家族的成員過氧化物酶體增殖活化受體PEROXISOMEPROLIFERATORACTIVATEDRECEPTOR，PPARV對多種腫瘤細胞凋亡和分化起著重要調控作用。近年來研究顯示，植物雌激素具有預防和抑制多種腫瘤，如乳腺癌、前列腺癌、子宮內膜癌、卵巢癌、結腸癌等的作用。作為PPARV激動劑配體的植物雌激素成員之一的大豆苷元DAIDZEIN，DAI，是一種從日常豆類食品中提取出來的黃酮類化合物，其藥理作用豐富，可誘導腫瘤細胞的凋亡、分化，且可抑制腫瘤遷移及癌組織血管生成的相關基因，但其機制目前尚未完全闡明。因此，探討DAI對入骨肉瘤細胞的凋亡、分化及生物學性狀的影響，揭示其作用機制，將為骨肉瘤的臨床治療提供新的思路和策略。

簡介：哮喘是一種嚴重的呼吸系統(tǒng)疾病。在哮喘中不僅存在氣道炎癥，并且還存在氣道組織的重塑（AIRWAYREMOLDELING）。在氣道重塑中，氣道壁增厚，上皮下纖維化，成肌纖維細胞（MYOFIBROBLASTS，MF）和平滑肌細胞﹙AIRWAYSMOOTHMUSCLECELL，ASMC﹚過度增生。氣道成纖維細胞不僅是氣道的結構細胞，其在氣道組織中的增值、遷移與分化等行為與氣道重塑的發(fā)展過程密切相關。已有研究表明，在轉化生長因子Β1（TRANSFMINGGROWTHFACTΒ1，TGFΒ1）的誘導下，氣道成纖維細胞可以向成肌纖維細胞分化。成肌纖維細胞的超微結構介于成纖維細胞和平滑肌細胞之間，并且也表達平滑肌細胞的特征性蛋白Α平滑肌肌動蛋白（ΑSMOOTHMUSCLEACTIN，ΑSMA），有人推測成肌纖維細胞是成纖維細胞向平滑肌細胞轉分化的過度形態(tài)。此外，在氣道重塑中，由于成肌纖維細胞過度合成和分泌細胞外基質（EXCELLULARMATRIX，ECM）蛋白，從而導致細胞外基底膜增厚和基底硬度增加。然而，細胞外基底硬度的增加能否影響氣道成纖維細胞的增殖、遷移等生物學行為，能否影響炎癥因子TGFΒ1誘導下的氣道成纖維細胞向成肌纖維細胞的分化以及分化細胞的力學行為，從而加重哮喘的發(fā)病，至今并未被研究過。為了研究這個問題，本課題以SD（SPRAGUEDAWLEY）大鼠氣道成纖維細胞作為實驗載體。首先，人工合成不同硬度的PDMS（POLYDIMETHYLSILOXANE，PDMS）基底，楊氏模量分別1KPA、10KPA、50KPA；其次，原代培養(yǎng)和鑒定大鼠氣道成纖維細胞。然后，將大鼠氣道成纖維細胞接種在不同硬度的基底上，測量基底硬度對氣道成纖維細胞形態(tài)、黏著斑、增殖和遷移等生物學行為的影響。最后，將大鼠氣道成纖維細胞接種在不同硬度的基底上，并用10NGML的TGFΒ1誘導其向成肌纖維細胞分化。測量基底硬度對TGFΒ1誘導的氣道成纖維細胞向成肌纖維細胞分化的影響以及分化細胞力學行為的影響。本文的主要研究內容和結果如下①基底硬度對氣道成纖維細胞形態(tài)、黏著斑、增殖與遷移等生物學行為的影響用相差顯微鏡觀察并記錄基底硬度對氣道成纖維細胞粘附形態(tài)的影響；免疫熒光法檢測基底硬度對氣道成纖維細胞黏著斑（VINCULIN）的影響；細胞計數(shù)法測量不同硬度基底上氣道成纖維細胞的生長曲線；MTT法檢測基底硬度對氣道成纖維細胞增殖活力的影響；劃痕法檢測基底硬度對氣道成纖維細胞遷移的影響。研究發(fā)現(xiàn)，基底硬度對氣道成纖維細胞的生物學行為有重要影響。首先，不同硬度基底上的氣道成纖維細胞的粘附形態(tài)明顯不同?；子捕仍礁撸瑲獾莱衫w維細胞的鋪展面積越大、細胞長短徑比值越高；其次，免疫熒光檢測結果顯示，基底硬度對氣道成纖維細胞黏著斑（VINCULIN）的形成有影響作用，基底硬度越高，黏著斑（VINCULIN）的大小越大；然后，不同硬度基底上的氣道成纖維細胞的生長曲線顯示，在細胞未長至融合狀態(tài)時，基底硬度越高，氣道成纖維細胞的生長速度越快；另外，MTT試驗的結果表明，將氣道成纖維細胞接種于不同硬度基底上24H、48H和72H后，細胞的OD值均有極顯著性差異（P②基底硬度對TGFΒ1誘導的氣道成纖維細胞向成肌纖維細胞分化的影響用PRPCR法測量基底硬度對分化的細胞中ΑSMA和I型膠原（COLLAGENI）MRNA表達的影響；酶聯(lián)免疫吸附分析（ENZYMELINKEDIMMUNOSBENTASSAY，ELISA）檢測基底硬度對分化過程中細胞分泌到胞外基質中COLLAGENI蛋白表達的影響；WESTERNBLOT檢測基底硬度對分化的細胞中ΑSMA蛋白表達的影響。研究發(fā)現(xiàn)，基底硬度能促進氣道成纖維細胞向成肌纖維細胞的分化。首先，PRPCR的結果表明，和硬度為1KPA基底上分化的細胞相比，硬度為10KPA基底上分化的細胞的ΑSMA和COLLAGENIMRNA的表達量分別增加了014和032倍。而在硬度為50KPA的基底上分化的細胞的ΑSMA和COLLAGENIMRNA的表達量分別增加了072（P③基底硬度對TGFΒ1誘導的氣道成纖維細胞向成肌纖維細胞細胞分化過程中細胞力學行為的影響利用磁微粒扭轉細胞測量術（OPTICALMAGICTWISTINGCYTOMETRY，OMTC）測量基底硬度對分化的細胞的硬度和收縮反應的影響。OMTC的測量結果顯示，所有分化的細胞都呈典型的冪率響應行為細胞的硬度（G’）隨著測量頻率（F）的升高而增大，并且兩者呈指數(shù)關系，G’（F）FΑ，Α為擬合直線的斜率。而且，基底硬度越高，細胞的硬度也越大。冪率指數(shù)Α，隨著硬度增加，從0102增加到0122；另外，測量結果顯示，基底硬度越高，分化的細胞的收縮反應也越大。和硬度為1KPA的基底上分化的細胞相比，硬度為50KPA基底上分化的細胞的收縮反應明顯增加（P因此，在氣道重塑中，當細胞外基底硬度增加，首先影響氣道成纖維細胞的形態(tài)、黏著斑、增殖與遷移?；子捕仍礁?，氣道成纖維細胞的增殖與遷移速度越快，成纖維細胞增殖速度的增加使氣道上皮下纖維化進一步加重。而氣道成纖維細胞遷移速度的提高將可能導致氣道的其他病變。有人推測能引起氣道功能異常的氣道平滑肌細胞是由氣道成纖維細胞分化而來，氣道成纖維細胞可能通過遷移到平滑基層并分化為平滑肌細胞，因此成纖維細胞遷移速度的提高將可能影響哮喘的病變速度。其次，在氣道炎癥因子TGFΒ1的誘導下，細胞外基底硬度的增加，能促進氣道成纖維細胞向成肌纖維細胞的分化以及影響分化細胞的力學行為，導致分化的細胞的收縮蛋白ΑSMA合成和表達增加、COLLAGENI等細胞外基質蛋白的合成和分泌增加、細胞硬度和細胞收縮反應提高。細胞硬度和收縮反應等力學行為的改變可能直接引起氣道阻塞和氣道高反應性的發(fā)生。而COLLAGENI等細胞外基質蛋白合成和分泌的升高，將導致細胞外基質的進一步沉積和硬度增加。這對哮喘的發(fā)生和發(fā)展是一個惡性循環(huán)的過程。綜上所述，本文從生物學和生物力學的角度探討了細胞外基底硬度變化在氣道重塑發(fā)生和發(fā)展中的作用，進一步加深了對哮喘和氣道重塑病理機制的了解。氣道組織的硬化程度不僅可能成為哮喘病診斷的重要依據(jù)，也有可能成為哮喘治療的重要靶點。

簡介：南華大學學位論文原創(chuàng)性聲明南華大學學位論文原創(chuàng)性聲明本人聲明，所呈交的學位論文是本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了論文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得南華大學或其他單位的學位或證書而使用過的材料。與我共同工作的同志對本研究所作的貢獻均已在論文中作了明確的說明。本人完全意識到本聲明的法律結果由本人承擔。作者簽名年月日南華大學學位論文版權使用授權書南華大學學位論文版權使用授權書本學位論文是本人在南華大學攻讀碩（博/碩）士學位期間在導師指導下完成的學位論文。本論文的研究成果歸南華大學所有，本論文的研究內容不得以其它單位的名義發(fā)表。本人同意南華大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，即學校有權保留學位論文，允許學位論文被查閱和借閱；學?？梢怨紝W位論文的全部或部分內容，可以采用復印、縮印或其它手段保留學位論文；學校可根據(jù)國家或湖南省有關部門規(guī)定送交學位論文。同意學校將論文加入中國優(yōu)秀博碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫，并按中國優(yōu)秀博碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫出版章程規(guī)定享受相關權益。同意授權中國科學信息技術研究所將本學位論文收錄到中國學位論文全文數(shù)據(jù)庫，并通過網(wǎng)絡向社會公眾提供信息服務。對于涉密的學位論文，解密后適用該授權。作者簽名導師簽名年月日年月日目錄中文摘要中文摘要1英文摘要英文摘要3前言5技術路線技術路線8材料與材料與方法10結果23討論38結論42參考文獻參考文獻43附錄一48附錄二49綜述50發(fā)表的論文發(fā)表的論文60致謝61

簡介：西北大學碩士學位論文DC對同源CIK細胞生物學活性及抗急性白血病細胞作用的研究姓名李玲申請學位級別碩士專業(yè)生物工程指導教師陳富林20100601／ML，按照DC細胞與CⅨ細胞之比為L5的比例將兩者混合培養(yǎng)，培養(yǎng)至第3天與第6天收集共培養(yǎng)的細胞，進行生物學活性測定。結果研究結果表明，DC細胞與CIK細胞共培養(yǎng)后，其細胞增殖能力、細胞毒活性、免疫表型的表達、細胞因子分泌水平與單獨CIK細胞相比有明顯或顯著性差異。結論與DC細胞共培養(yǎng)可以提高CIK細胞的增殖速度；DC細胞可增強CIK細胞的殺傷活性，在同一效靶比對急性白血病細胞的殺傷活性各型之間無明顯差異，隨著效靶比的增高對急性白血病細胞的殺傷活性增強；共培養(yǎng)細胞CD3CD8及CD3CD56雙陽性細胞比值明顯高于同條件下單獨CIK細胞培養(yǎng)組；共培養(yǎng)細胞分泌細胞因子水平較單獨CIK細胞培養(yǎng)組分泌水平高。關鍵詞樹突狀細胞，細胞因子誘導的殺傷細胞，生物學活性，白血病LI

簡介：南方醫(yī)科大學2010級碩士學位論文MICRORNA一3715P對結直腸癌細胞生物學特性的影響IMPACTOFMIR3715PONBIOLOGICALFUNCTIONOFCOLORECTALCANCERCELLS課題來源自選學位申請人呂真冰導師姓名丁彥青教授梁莉教授專業(yè)名稱病理學與病理生理學培養(yǎng)類型學術型培養(yǎng)層次碩士研究生所在學院基礎醫(yī)學院2013年6月30日廣州摘要用靶基因及上游調控分子，并結合臨床標本分析其表達與臨床病理的關系。本研究不僅助于理解結直腸癌進展的分子機制，還為臨床診斷及治療提供了新的靶點。研究方法1MILL3715P在結直腸癌中生物學特性的研究1利用結直腸癌組織MICRORNA芯片挑選出幾個與結直腸相關的MICRORNA，并選取8種結直腸癌細胞株，利用REALTIMERTPCR檢測候選MICRORNAS的表達。2利用陽離子脂質體法，將商品化的MIR3715PINHIBITOR瞬時轉染至結直腸癌細胞株SW480和HCTL16中，通過體外增殖及侵襲實驗研究MIR3715P在結直腸癌中的作用，確定MIR3715P為研究對象。3設計并構建慢病毒載體，A、MIR371過表達載體進行病毒包裝后將之感染至結直腸癌細胞株SW620和LOVO中，B、MIR3715P／SHRNA穩(wěn)定干擾載體進行病毒包裝后，將之感染至結直腸癌細胞株HCTL16和SW480中；用有限稀釋法篩選并獲得穩(wěn)定的細胞株，并行REALTIMERTPCR檢測MIR3715P的表達。4利用CCK8法、平板克隆形成、流式細胞儀和體外侵襲實驗，檢測過表達MIR371或穩(wěn)定干擾MIR3715P后對體外結直腸癌細胞增殖、侵襲能力的影響。5利用整體可視化動物模型，檢測過表達MIR371或穩(wěn)定干擾MIR3715P后對裸鼠皮下成瘤和轉移能力的影響。6從南方醫(yī)院普外科收集77對新鮮結直腸癌組織及遠端正常組織，利用實時熒光定量PCR檢測MIR3715P的表達情況及與臨床病理的聯(lián)系。2MIR3715P靶基因的篩選及驗證1以MIR3715P為檢索詞，在MICRORNAORG、TARGETSCAN、MIRDB和DIANAMICROTCDS四個數(shù)據(jù)庫進行靶基因的預測，將4個數(shù)據(jù)庫得分前50的預測結果取交集，即預測得到的可信度和準確性較高的靶基因。II

簡介：分類號密級R7371L內部2年學位類別科學學位團專業(yè)學位口學校代碼10062學號2010601108學科門類醫(yī)學又肄眚科鼻辱鬻|蒸翱|鶼糕纛豢萋簍瀑蠛黼麓|讖薰耄器|琴擎博士學位論文DOCTORALDISSERTATION論文題目VASOHIBIN1在腎細胞癌中的表達及其生物學作用的初步研究TITLEAPRELIMINARYSTUDYOFVASOHIBIN一1EXPRESSIONANDITSBIOLOGICALEFFECTSINRENALCELLCARCINOMA一級學科臨床醫(yī)學二級學科外科學泌尿外論文作者趙廣寧指導教師韓瑞發(fā)教授導師組成員孫巖楊宇明湯洋天津醫(yī)科大學研究生院二O一三年五月天津醫(yī)科大學博士學位論文中文摘要目的研究探討VASOHIBINIVASHL在腎細胞癌組織中的表達特性及其與缺氧誘導因子10HIF1A，微血管密度MVD，CD34標記以及腎細胞癌臨床病理特征之間的關聯(lián)性；研究VASHL對人臍靜脈血內皮細胞HUVEC增殖、細胞周期、凋亡，以及對腎細胞癌細胞78601增殖、細胞周期、凋亡、侵襲能力等一系列細胞生物學行為方面的影響，初步探討VASHL的生物學作用，以期能夠為腎細胞癌找到新的分子標志物和抗腫瘤血管生成有效的治療靶點奠定理論基礎。方法1免疫組織化學染色法對46例腎細胞癌組織和20例癌旁正常腎組織中的VASHL、HIF1A以及MVDCD34標記進行檢測，分析其在腎細胞癌中表達的相關性及其與臨床病理參數(shù)之間存在的關聯(lián)；2利用真核表達載體PRECEIVERM61和含VASHLCDNA的質粒T7VASHL通過基因重組技術構建PRECEIVERM61VASHL，酶切以及測序鑒定重組質粒；利用含VASHLCDNA的質粒T7VASHL、GV287慢病毒系列載體、PHELPERL0載體和PHELPER20載體三質粒組成的慢病毒載體系統(tǒng)來獲得過表達VASHL的慢病毒顆粒，PCR以及測序鑒定重組質粒，定量PCR檢測病毒滴度；3將PRECEIVERM61一VASHL轉染HUVEC以及7860細胞，應用MTT法、流式細胞儀以及TRANSWELL小室研究探討過表達VASHL對HUVEC細胞增殖、細胞周期、凋亡以及對7860細胞增殖、細胞周期、凋亡、侵襲能力的影響。結果1在癌旁正常腎組織中，VASHL主要表達于’腎小管上皮細胞，部分表達于血管內皮細胞以及腎小球系膜細胞；在腎細胞癌組織中，VASHL主要表達于腫瘤細胞的細胞質以及細胞膜，部分表達于血管內皮細胞的細胞質以及細胞膜；VASHL在癌旁正常腎組織中的表達強度顯著高于腎細胞癌組織PO05，VASHL的表達在不同組織學類型，不同臨床分期的腎細胞癌中差異有統(tǒng)計學意義，隨著腫瘤惡性程度的增加其表達強度呈下降趨勢PO05；VASHL，HIF10及MVD在腎細胞癌組織中表達的相互關系顯示，VASHL與HIF一10具有顯著負相關性P005，VASHL與MVD具有顯著負相關性P005，HIF10與MVD具有顯著正相關性釁005。2重組PRECEIVERM61VASHL經(jīng)過酶切以及測序鑒定證實VASHLCDNA片段正確地插入真核表達載體PRECEIVERM61中；重組GV287VASHL經(jīng)PCR以及測序鑒定證實VASHLCDNA片段正確地插入慢病毒

簡介：中南大學博士學位論文PPFP基因轉染對人正常甲狀腺細胞生物學特性的影響及蛋白質組學研究姓名劉劍鳴申請學位級別博士專業(yè)外科學指導教師王志明20100501博上學位論文中文摘要?？寺∧０錚EGFP．C1．PPFP中，利用PCR方法調取目的基因PPFP，將該基因克隆到慢病毒載體表達質粒PGC．FU含F(xiàn)LAG基因中，得到重組的PGC．FU．PPFP，通過PCR、測序和分析比對驗證PPFP基因后，將PGC．FUPPFP質粒和包裝質粒PHELPERL．0、PHELPER2．0共同轉染人胚胎腎上皮細胞株293T細胞，獲得攜帶PPFP基因的重組慢病毒，收集并濃縮病毒上清液，測定重組慢病毒的滴度。再以攜帶PPFP基因的重組慢病毒感染目的細胞SV40大T抗原永生化人正常甲狀腺細胞系NTHYORI3．1，觀察感染效率。選擇感染效率滿意的細胞通過RTPCR和WESTERNBLOT多次檢測PPFP的表達，以確定PPFP基因穩(wěn)定表達細胞株的建立。結果1PCR方法成功獲得目的基因片段PAX8．1．7，PAX8．9及PPAIQ．1．6，并成功將PAX8和PPAIⅥ拼接，構建了PAX8與PPARY的融合基因的重組真核表達質粒PEGFP．CLPAX8／PPARY。2以重組真核表達質粒PEGFP．C1．PAX8／PPARY為模板，PCR方法成功獲得目的基因PPFP，并成功構建PPFP基因的重組慢病毒表達質粒PGC．FU．PPFP，以該質粒與包裝質粒共轉染293T細胞，成功獲得攜帶PPFP基因的高滴度的重組慢病毒，病毒滴度達3．5X107TU／ML。3以攜帶PPFP基因的重組慢病毒和空白慢病毒分別感染人正常甲狀腺細胞NTHV．耐3．1，感染效率高，大于90％，以RTPCR和WESTERNBLOT檢測證實PPFP基因在MRNA和蛋白水平順利表達，PPFP基因穩(wěn)定表達細胞株成功建立，為進一步研究PPFP基因的功能及其作用機制奠定了基礎。結論1成功克隆了人PAX8與PPARY的融合基因PPFP基因，并構建了PPFP基因的重組慢病毒載體；2慢病毒載體是理想的基因轉移載體，可以高效的將PPFP基因轉染至人正常甲狀腺細胞NTHY．ORI3。1，轉染后PPFP基因可持續(xù)穩(wěn)定表達。第二章PPFP基因促進人正常甲狀腺細胞NTHY．ORI3一L增殖和迂徙運動能力的體外實驗研究目的探討PPFP基因轉染對人正常甲狀腺細胞NTHY．ORI3．1生物學特性的影響，以明確PPFP基因在FTC發(fā)生發(fā)展過程中的作用。方法以PPFP基因穩(wěn)定表達細胞株NTHY．ORI3．1PPFP、空白慢病毒感染細胞株NTHY．ORI3．1VEC附以及未感染細胞株NTHY．ORI3．1為研究對象，通過MTT檢測各組細胞增殖能力、平板克隆形成實驗檢測各

簡介：分類號VDC博士學位論文密級ROR2在骨肉瘤組織及細胞中的表達及其對骨肉瘤細胞生物學行為影響的初步研究THEPRELIMINARYSTUDYOFEXPERESSIONOFROR2INOSTEOSARCOMATISSUESANDCELLSANDTHEEFFECTOFROR2ONOSTEOSARCOMACELLBIOLOGYBEHAVIOR作者姓名學科專業(yè)學院系、所指導教師黃建軍外科學骨科專業(yè)湘雅醫(yī)院廖前德教授論文答辯日期出Z7答辯委員會主席中南大學二。一O年十月原創(chuàng)性聲明LILLITIIIIIIIIIIIIIIIIY1918213本人聲明，所呈交的學位論文是本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了論文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得中南大學或其他單位的學位或證書而使用過的材料。與我共同工作的同志對本研究所作的貢獻均己在論文中作了明確的說明。作者簽名竺壁蘭堇日期絲年二月丑日學位論文版權使用授權書本人了解中南大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，即學校有權保留學位論文并根據(jù)國家或湖南省有關部門規(guī)定送交學位論文，允許學位論文被查閱和借閱；學校可以公布學位論文的全部或部分內容，可以采用復印、縮印或其它手段保存學位論文。同時授權中國科學技術信息研究所將本學位論文收錄到中國學位論文全文數(shù)據(jù)庫，并通過網(wǎng)絡向社會公眾提供信息服務。作者簽名窶蘭互導師簽名么莖圭倡期絲年二月三日

簡介：分類號分類號R7815學校代碼學校代碼10392學科專業(yè)代碼學科專業(yè)代碼100302學號號2120904370碩士學位論文微溝槽鈦表面抗菌肽生物涂層的抗菌性能及其對牙微溝槽鈦表面抗菌肽生物涂層的抗菌性能及其對牙齦成纖維細胞生物學行為的影響齦成纖維細胞生物學行為的影響B(tài)IOFUNCTIONALIZATIONOFMICROGROOVETITANIUMSURFACESWITHANANTIMICROBIALPEPTIDETOENHANCETHEIRBACTERICIDALACTIVITYANDCYTOCOMPATIBILITY學位類型型醫(yī)學碩士醫(yī)學碩士所在學院院口腔醫(yī)口腔醫(yī)學院學院申請人姓名申請人姓名周麟學科學科、專業(yè)專業(yè)口腔臨床醫(yī)學口腔臨床醫(yī)學導師師陳江教授教授研究起止日期研究起止日期2013年9月至月至2015年3月答辯委員會主席答辯委員會主席李龍江李龍江教授教授答辯日期期2015年5月27日二○一五○一五年五月年五月福建醫(yī)科大學碩士學位論文1目錄英文縮略詞索引英文縮略詞索引1中文摘要中文摘要2ABSTRACT5前言8第一部分第一部分抗菌肽抗菌肽GL13K修飾到微溝槽鈦表面及其理化性能的研究和修飾到微溝槽鈦表面及其理化性能的研究和抗菌肽涂層機械穩(wěn)定性的研究抗菌肽涂層機械穩(wěn)定性的研究12實驗一抗菌肽GL13K修飾到具有微溝槽結構的鈦表面12材料與方法12結果16討論25結論26實驗二微溝槽鈦表面硅烷化修飾抗菌肽涂層的機械性能穩(wěn)定性檢測與其表面修飾抗菌肽濃度的確定27材料與方法27結果29討論34結論34第二部分抗菌肽生物涂層對牙齦卟啉單胞菌的殺菌效果及其粘附、第二部分抗菌肽生物涂層對牙齦卟啉單胞菌的殺菌效果及其粘附、代謝活性的影響代謝活性的影響35材料與方法35結果38

簡介：目的探討體外尼古丁對大鼠髕腱肌腱干細胞（TENDONDERIVEDSTEMCELLS，TDSCS）的細胞活力，細胞早期凋亡以及肌腱相關基因表達的影響，揭示吸煙導致肌腱病變以及損傷肌腱延遲愈合潛在的細胞學發(fā)病機制。方法無菌條件下取8周齡SD大鼠的髕腱，Ⅰ型膠原酶消化分離獲得單個有核細胞，以最適密度（50個CM2）進行接種，細胞呈克隆樣生長，獲得原代TDSCS?；A培養(yǎng)細胞至第3代，行成骨、成脂、成軟骨誘導分化鑒定其干細胞的特性。然后將其分為兩組，實驗組用不同濃度的尼古丁培養(yǎng)基107M，106M，105M，104M和102M干預，對照組繼續(xù)采用基礎培養(yǎng)基0M培養(yǎng)。處理6H、24H、48H和72H后分別應用四唑鹽MTT比色法檢測尼古丁對TDSCS體外存活的影響，72H后應用ANNEXINⅤFITCPI雙染法檢測尼古丁對TDSCS體外早期凋亡的影響，實時熒光定量PCRREALTIMEPCR檢測肌腱相關基因COLLAL和SCX的表達。結果大鼠髕腱TDSCS體外培養(yǎng)呈克隆樣集落生長，首次換液后，細胞呈長梭形和多角形兩種形態(tài)，傳至第3代，細胞表現(xiàn)為成纖維細胞樣的紡錘形和星形的扁平細胞。TDSCS成骨誘導7天，茜素紅染色陽性成脂誘導10天，油紅O染色陽性成軟骨誘導14天，蘇木精伊紅染色陽性。與對照組相比，實驗組不同濃度的尼古丁干預下，TDSCS的細胞活力呈下降趨勢，呈時間依賴性和濃度依賴性，濃度高于104M時作用顯著，差異具有統(tǒng)計學意義P＜005。流式細胞儀檢測TDSCS早期凋亡ANNEXINⅤPI的數(shù)量隨著尼古丁濃度的增加而增加，差異具有統(tǒng)計學意義P＜005。同時，REALTIMEPCR檢測結果顯示與對照組相比，實驗組中COLLAL和SCX的MRNA表達水平均降低，濃度高于105M時作用顯著，差異具有統(tǒng)計學意義P＜005。結論大鼠髕腱中可以分離培養(yǎng)出具有體外克隆形成以及多向分化潛能的肌腱干細胞。體外尼古丁可抑制大鼠髕腱TDSCS的細胞活力，導致TDSCS早期凋亡，同時抑制TDSCS中成肌腱分化轉錄、細胞外基質合成相關基因的表達。這可能是吸煙導致肌腱病變以及損傷肌腱延遲愈合的潛在細胞學發(fā)病機制。

簡介：分類號R737．33密級公開單位代碼10422學號200913438碩士學位論文論文題目子宮內膜癌SREBPI表達及SREBPLSHRNA對內膜癌細胞生物學行為的影響SREBPLEXPRESSIONLNENDOMETRIALCANCERANDTHEINFLUENCEOFSREBPLSHRNAONTHEBIOLOGICALBEHAVIOROFENDOMETRIALCANCERCEI。I。S作者學院專業(yè)指導合作姓名名稱名稱李衛(wèi)華醫(yī)學院婦產科教師差渣塾壁導師王屋盤麴攫討論結論附表附圖參考文獻致謝攻讀頎1‘學批期間發(fā)表的學術論_立

簡介：第二軍醫(yī)大學加一十IZ∑／＼下碩士學位論文ERKL小干擾RNA對肝癌細胞生物學特性的影響THEEFFECTOFERKISIRNAONTHEBIOLOGICALCHARACTERISTICSOFHEPATOMACELLS研究生姓名申請學位類別學科和專業(yè)導師培養(yǎng)單位于尊芳臨床醫(yī)學碩士專業(yè)學位內科學消化謝渭芬教授第二軍醫(yī)大學附屬長征醫(yī)院消化內科第二軍醫(yī)大學2012年6月獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學位論文是我個人在導師指導下進行的研究工作。除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均己在論文中作了明確的說明并表示謝意。本人承擔本聲明的法律責任。學位論文作者簽名毛每瑰劃喲繡日期2012年06月01日學位論文版權使用授權聲明本人完全了解第二軍醫(yī)大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，第二軍醫(yī)大學有權保留并向國家有關部門或機構送交論文的復印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權第二軍醫(yī)大學可以將學位論文全文或部分內容編入中國學位論文全文數(shù)據(jù)庫、中國優(yōu)秀博碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫等數(shù)據(jù)庫進行檢索?？梢圆捎糜坝　⒖s印或掃描等復制手段保存、匯編學位論文。保密的學位論文在解密后適用本授權書學位論文作者簽名專鳥％導師簽名日期伽牌多月／日日期加R啤易月／日

簡介：第三軍醫(yī)大學碩士學位論文IGFIR、IGFⅡR反義基因對SMMC7721肝癌細胞生物學行為的影響姓名劉志鵬申請學位級別碩士專業(yè)內科學（消化內科）指導教師楊建民200161EFFECT0NBIOLOGICALBEHAVL0ROFSMMC7721HUMANHEPATOMACELLSBYIGFIR、IGFIIRANTISENSEGENETRANSFECTIONABSTRACTTHESIMULTANEOUSOVEREXPRESSIONOFBOTHINSULINLIKEGROWTHFACTORRECEPTORIIGFIRANDIGFIIRBYAUTOCRINEAND／ORPARACRINEISONEOFIMPORTANTCAUSESFORMALIGNANTPROLIFERATIONOFHUMANHEPATOCELLULARCARCINOMAHCCINTHISRESEARCH，WETRANSFECTED7721一IGFIRASCELLSHUMANHEPATOMASMMC7721CELLSTRASFECTEDWITHIGFIRANTISENSEGENEINOURPREVIOUSSTUDYWITHAPLASMIDVECTOREXPRESSINGIGFIIREDNAINMEANTISENSEORIENTATIONUSINGDOTAPLIPOSOMETHERESULTSOFPCRANDSOUTHERNBLOTHYBRIDIZATIONEXHIBITEDTHATTHERECOMBINANTCONTAININGIGFIIRANTISENSEGENEHAVEINTEGRATEDINTOCHROMOSOMEOF7721IGFIRASCELLSFOLLOWINGCHANGESWEREFOUNDINTHESMMC7721CELLSAFTERTRANSFECTEDWITHTHEIGFIRANDIGFIIRANTISENSEGENES①CELLMORPHOLOGICALCHANGESIMPROVEDINOBSERVATIONWITHLIGHTMICROSCOPEANDELECTRONICALMICROSCOPE；②THEGROWTHCAPABILITYINSOFTAGARANDTHEIRTUMORIGENICITYINNUDEMICEWERESIGNIFICANTLYDECREASEDHOWEVER，INTHECONTROLGROUPS，THESMMC7721CELLSTRANSFECTEDWITHIGFIRANDIGF1IRSENSEEDNAANDSMMC7721CELLSTRANSFECTEDWITHOUTANYEXTERNALGENESHADNOSUCHCHANGESBUT，THECELLGROWTHCURVESHADNOSIGNIFICANTDIFFERENCESAMONGTHESETHREEGROUPSOURSTUDYIMPLICATETHATANTISENSEIGFIRANDIGFIIRGENESCOULDSIGNIFICANTLYRESTRAINTHEMALIGNANTBEHAVIOROFSMMC一7721HUMANHEPATOMACELLS，ANDSUGGESTSUPPRESSINGTHE