簡(jiǎn)介：關(guān)于學(xué)位論文原創(chuàng)性和使用授權(quán)的聲明本人所呈交的學(xué)位論文，是在導(dǎo)師指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行科學(xué)研究所取得的成果。對(duì)在論文研究期間給予指導(dǎo)、幫助和做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人或集體，均在文中明確說(shuō)明。本聲明的法律責(zé)任由本人承擔(dān)。本人完全了解山東農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留和使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留和按要求向國(guó)家有關(guān)部門(mén)或機(jī)構(gòu)送交論文紙質(zhì)本和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)山東農(nóng)業(yè)大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存論文和匯編本學(xué)位論文，同時(shí)授權(quán)中國(guó)科學(xué)技術(shù)信息研究所將本學(xué)位論文收錄到中國(guó)學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)，并向社會(huì)公眾提供信息服務(wù)。保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定。論文作者簽名導(dǎo)師簽名絳妮翻茲江日期列驢06FFPRDCPRRSRCRREPSAMSSCSVPORCINERESPIRATORYDISEASE豬呼吸道病復(fù)合征COMPLEXPORCINEREPRODUCTIVEAND豬繁殖與呼吸綜合征RESPIRATORYSYNDROMEROLLINGCIRCLEREPLICATIONREPLICATIONRELATEDPROTEINS滾環(huán)式復(fù)制復(fù)制相關(guān)蛋白THEPIGABORTIONANDDEATH豬流產(chǎn)和死亡綜合征SYNDROMESUBTERRALLEAJLCLOVERSTUNTVIRUS三葉草侏儒病毒

簡(jiǎn)介：分類(lèi)號(hào)分類(lèi)號(hào)S852授予學(xué)位單位代碼授予學(xué)位單位代碼10434研究生學(xué)號(hào)號(hào)2013110467山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文馬立克氏病毒馬立克氏病毒SC92株生物學(xué)活性的比較研究及株生物學(xué)活性的比較研究及表達(dá)表達(dá)NDVF基因重組病毒的構(gòu)建基因重組病毒的構(gòu)建COMPARATIVESTUDIESOFTHEBIOLOGICALACTIVITIESOFMDVSC92ANDCONSTRUCTIONOFRECOMBINANTMDVEXPRESSINGTHENDVFGENE研究生孫鵬學(xué)科專(zhuān)業(yè)學(xué)科專(zhuān)業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)研究方向研究方向分子分子病毒學(xué)病毒學(xué)學(xué)院動(dòng)物科技學(xué)院動(dòng)物科技學(xué)院指導(dǎo)教師指導(dǎo)教師崔治中崔治中教授教授2016年6月6日關(guān)于學(xué)位論文原創(chuàng)性和使用授權(quán)的聲明本人所呈交的學(xué)位論文，是在導(dǎo)師指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行科學(xué)研究所取得的成果。對(duì)在論文研究期間給予指導(dǎo)、幫助和做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人或集體，均在文中明確說(shuō)明。本聲明的法律責(zé)任由本人承擔(dān)。本人完全了解山東農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留和使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留和按要求向國(guó)家有關(guān)部門(mén)或機(jī)構(gòu)送交論文紙質(zhì)本和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)山東農(nóng)業(yè)大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存論文和匯編本學(xué)位論文。保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定。論文作者簽名導(dǎo)師簽名日期

簡(jiǎn)介：分類(lèi)號(hào)分類(lèi)號(hào)S8551S8551授予學(xué)位單位代碼授予學(xué)位單位代碼10434研究生學(xué)號(hào)研究生學(xué)號(hào)2013110488山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文水貂阿留申病病毒分子流行病學(xué)調(diào)查及間接水貂阿留申病病毒分子流行病學(xué)調(diào)查及間接ELISAELISA檢測(cè)檢測(cè)方法的建立及初步應(yīng)用方法的建立及初步應(yīng)用MOLECULAREPIDEMIOLOGYESTABLISHMENTOFINDIRECTELISAMETHODPRELIMINARYAPPLICATIONOFALUETIANMINKDISEASEVIRUS姓名姓名韓鎧懌韓鎧懌學(xué)科專(zhuān)業(yè)學(xué)科專(zhuān)業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)研究方向研究方向動(dòng)物傳染病動(dòng)物傳染病學(xué)院動(dòng)物科技學(xué)院動(dòng)物科技學(xué)院指導(dǎo)教師指導(dǎo)教師謝之景謝之景副教授副教授2016年6月6日關(guān)于學(xué)位論文原創(chuàng)性和使用授權(quán)的聲明本人所呈交的學(xué)位論文，是在導(dǎo)師指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行科學(xué)研究所取得的成果。對(duì)在論文研究期間給予指導(dǎo)、幫助和做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人或集體，均在文中明確說(shuō)明。本聲明的法律責(zé)任由本人承擔(dān)。本人完全了解山東農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留和使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留和按要求向國(guó)家有關(guān)部門(mén)或機(jī)構(gòu)送交論文紙質(zhì)本和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)山東農(nóng)業(yè)大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存論文和匯編本學(xué)位論文，同時(shí)授權(quán)中國(guó)科學(xué)技術(shù)信息研究所將本學(xué)位論文收錄到中國(guó)學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)并向社會(huì)公眾提供信息服務(wù)。保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定。論文作者簽名導(dǎo)師簽名日期

簡(jiǎn)介：浙江大學(xué)博士學(xué)位論文葡萄扇葉病毒杭州分離物生物學(xué)特性和基因組結(jié)構(gòu)研究姓名李紅葉申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專(zhuān)業(yè)果樹(shù)學(xué)指導(dǎo)教師陳力耕周雪平200151塑堅(jiān)叁蘭竺蘭絲堡苧推導(dǎo)的GFLVH移動(dòng)蛋白氨基酸序列與其他5個(gè)NEPOVIRNSES的對(duì)應(yīng)區(qū)域多序列比較發(fā)現(xiàn)GFLVHMP只與番茄環(huán)斑病毒TOMRSVMP有較高的同源性385％，與其他4個(gè)種的同源率均在30％以下。在這些NEPOVIRUSESJIIP上游區(qū)段的疏水域P基序發(fā)現(xiàn)一個(gè)輔氨基殘基。P基序在COMO一、CAPILLO一和CALIMOVIRUSES病毒中也存在，已經(jīng)明確這些病毒是通過(guò)由移動(dòng)蛋白參與構(gòu)成的管狀結(jié)構(gòu)作胞間移動(dòng)。J74電鏡觀察了葡萄扇葉病毒侵染莧色藜CAMARANTICOLOR和昆諾藜￡QUINOA的細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)變化。L病毒粒子存在于葉肉組織薄壁細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，常成單縱列排列在小管結(jié)構(gòu)中，小管形成聚集體。在系統(tǒng)感染的昆諾藜細(xì)胞中位于管狀結(jié)構(gòu)中的病毒粒子穿過(guò)胞問(wèn)連絲。兩種細(xì)胞質(zhì)內(nèi)膜結(jié)構(gòu)增生，形成含細(xì)纖維狀物質(zhì)的小囊泡，液泡膜邊緣存在少許小泡，有多泡體和髓鞘樣結(jié)構(gòu)伸入液泡，葉綠體和線粒體等細(xì)胞器也發(fā)生明顯的病變。WESTERNBLOT表明來(lái)自法國(guó)的GFLVF13P38移動(dòng)蛋白重組蛋白兔抗血清能與GFLV一1T移動(dòng)蛋白產(chǎn)生反應(yīng)。利用6FLVF13P38蛋白抗體，通過(guò)免疫膠體金將GFL卜H移動(dòng)蛋白定位于靠近細(xì)胞壁的細(xì)胞質(zhì)、細(xì)胞壁、胞闖連絲和管狀結(jié)構(gòu)的表面，結(jié)合組織病變研究發(fā)現(xiàn)病毒粒子可以在管狀結(jié)構(gòu)中通過(guò)胞間連絲，進(jìn)一步明確了P38蛋白與病毒的在胞問(wèn)擴(kuò)散有關(guān)。Y5本研究克隆了6FLVH外殼蛋白基因，并構(gòu)建包含該基因的植物表達(dá)載體，通過(guò)三親交配法將該基因?qū)朕r(nóng)桿菌LBA4404中。＼以鮮食葡萄白香蕉無(wú)菌苗的莖段為材料，誘導(dǎo)產(chǎn)生胚性愈傷組織，再以胚性愈傷組織為外植體，開(kāi)展對(duì)葡萄的遺傳轉(zhuǎn)化研究。以胚性愈傷組織與農(nóng)桿菌共培養(yǎng)2天后進(jìn)行除菌處理，接著在胚狀體分化培養(yǎng)基上預(yù)培養(yǎng)，再轉(zhuǎn)入含KAN的篩選培養(yǎng)基中進(jìn)行篩選，所獲得的抗性胚性愈傷組織轉(zhuǎn)入成梢和生根的培養(yǎng)基中，大約2個(gè)月后，長(zhǎng)出少量小植株，對(duì)其中7株小植株進(jìn)行PCR鑒定，其中4株顯示PCR陽(yáng)性反應(yīng)。對(duì)這些陽(yáng)性植株正在繼續(xù)培養(yǎng)觀察，進(jìn)一步的SOUTHERN，NORTHERN分析有待小苗稍大一點(diǎn)時(shí)進(jìn)行。、／關(guān)鍵詞葡萄扇Ⅱ編毒，線蟲(chóng)介體，鑒定，基日攬隆，序列分析，細(xì)胞病理學(xué)，免疫膠體金，組織定位，電子顯微鏡表達(dá)載體構(gòu)建，遺傳轉(zhuǎn)化?！獸

簡(jiǎn)介：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文引起長(zhǎng)豇豆不同癥狀的黑眼豇豆花葉病毒兩個(gè)分離物基因組學(xué)研究及其外殼蛋白的原核表達(dá)姓名鄭紅英申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)植物病理學(xué)指導(dǎo)教師侯明生陳劍平200251插圖目錄第一章圖11推測(cè)的菜豆普通花葉病毒基因組結(jié)構(gòu)圖第二章圖21末端序列擴(kuò)增的示意圖圖22蛋白質(zhì)從凝膠轉(zhuǎn)移至硝酸纖維膜上電轉(zhuǎn)移示意圖第三章圖31黑眼豇豆花葉病毒粗提純方法圖示圖32BICMVR、BICMVY兩個(gè)分離物在豇豆品種一點(diǎn)紅上所致的癥狀圖33BICMVR導(dǎo)致的寄主細(xì)胞內(nèi)風(fēng)輪狀內(nèi)含體、卷簡(jiǎn)體圖34BLCMVR病毒粒子形態(tài)圖35PSTV抗血清修飾的BICMVR病毒粒子圖36BICMVR、BLCMVY兩個(gè)分離物病毒粒子CP的SDSPAGE電泳第四章圖41BICMVR全基因組擴(kuò)增圖示圖42BICMVR基因組各段PCR產(chǎn)物圖43BICMVY基因組各段PCR產(chǎn)物圖44BICMVR的核苷酸及其編碼的氨基酸全序列圖45BICMVY的核苷酸及其編碼的氨基酸全序列圖46BICMVR、BICMVY兩個(gè)分離物的基因組結(jié)構(gòu)圖示圖47浙江豇豆線狀病毒、BICMV、PSTV、BCMV、DEMV、AZMV和CABMVCP氨基酸序列的系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)分析圖48BCMV成員CP核苷酸序列的系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)分析圖49BICMVR、BICMVY和PSTVU34972推導(dǎo)的編碼氨基酸全序列的比較圖410BICMVYP3蛋白跨膜結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)第五章圖51表達(dá)載體POEX3X圖52BICMVRCP基因原核表達(dá)的質(zhì)粒構(gòu)建策略圖53BICMVRCP基因的RTPCR擴(kuò)增圖54BICMVRCP基因的原核表達(dá)圖55BICMVRCP基因表達(dá)產(chǎn)物的免疫印跡917212426262727276364656667弛”“M”舵郇鴝船∞

簡(jiǎn)介：中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文腺胃源傳染性支氣管炎病毒的分離、鑒定及分子流行病學(xué)姓名吳延功申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專(zhuān)業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師楊漢春200251分離毒SDYT9901株理化特性基本一致；中和試驗(yàn)結(jié)果表明SDQD97株僅與腎型分離毒SD9901株屬于同一血清型的不同亞型而與美國(guó)的腎型毒GRAY株、疫苗毒H120株為不同的血清型。／。3腺胃源IBV基質(zhì)蛋白基因、氨基酸和部分纖突量魚(yú)薹固的序列分析與分子流行病學(xué)研究，／參考GENEBANK上的IBV序列，自行設(shè)計(jì)合成了一對(duì)引物，對(duì)從表現(xiàn)TP的病雞腺胃組織中分離獲得的7株IBVRNA進(jìn)行RTPCR擴(kuò)增，擴(kuò)增出含基質(zhì)蛋白M的約700BP的基因。通過(guò)對(duì)7株腺胃源IBV分離毒株的基因和氨基酸序列分析，可以根據(jù)病毒的進(jìn)化關(guān)系分為4種類(lèi)型第一種類(lèi)型的代表是SDWF97株，其來(lái)源是ILL20疫苗株；第二種類(lèi)型的代表是DFC97株，是在疫苗毒株和嗜腎性毒株的基礎(chǔ)上，發(fā)展起來(lái)的一株偏向于向嗜腺胃性毒株發(fā)展的一個(gè)過(guò)渡毒株；第三種類(lèi)型的代表是LNDL97株是IBV從目前流行的嗜腎性毒株向嗜腺胃性發(fā)展的過(guò)渡產(chǎn)物。第四種類(lèi)型則是完全的嗜腺胃性毒株，包括SDQD97、SDQD98、SDDY97和SDXJ97株等大多數(shù)TP分離毒株都屬于這一類(lèi)，與19個(gè)參考毒株屬于不同來(lái)源，可能是引起TP的病原之一參考GENBANK上的IBVS基因守列，自行設(shè)計(jì)合成了一對(duì)跨幅約09KB的引物，該區(qū)段包括了S1基因C末端的400BP和S2基因N末端的500BP。利用RTPCR對(duì)15株IBV分離株RNA進(jìn)行RTPCR擴(kuò)增。序到分析顯示，SOQD97株和12株嗜腎性、嗜呼吸道性分離毒株屬于一個(gè)與參考毒株包括疫苗毒株完全不同的群。這些病毒從疫病流行時(shí)間、空間、組織嗜性和病雞品種上都沒(méi)有明顯的規(guī)律可循。另1株從TP病雞中獲得的病毒SDQD98株也屬于既不同于國(guó)內(nèi)其它分離毒株，義不同于國(guó)際參考毒株的獨(dú)立一群。腺胃源IBV與我國(guó)目前流行的IBV毒株具有較高的同源性，可能是IBV組織嗜性發(fā)生變化的新變異株。通過(guò)對(duì)我國(guó)近3年來(lái)的IBV的分析。可以得出以下結(jié)論我國(guó)現(xiàn)流行的IBV己發(fā)生了很大的變異，分別利用針對(duì)嗜腎性和嗜呼吸道性的毒株、針對(duì)嘈腺胃的一2一

簡(jiǎn)介：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文馬傳染性貧血強(qiáng)弱毒嵌合病毒的構(gòu)建及生物學(xué)特性研究姓名涂亞斌申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師童光志陳煥春200251華中農(nóng)業(yè)大學(xué)2002年碩士學(xué)位論文馬傳染性貧M強(qiáng)／弱毒嵌合病毒的構(gòu)建及生物學(xué)特性研究的。從中我們初步推測(cè)，LTR很可能不是決定EIAV毒力的主要因素。至于LTR是否是決R’、一、定EIAV在馬體內(nèi)復(fù)制水平的主要因素，目前正在進(jìn)一步的研究中。＼L關(guān)鍵詞馬傳染性貧血病毒長(zhǎng)末端重復(fù)序列囊膜基因，感染性分子克隆嵌合病毒

簡(jiǎn)介：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文盾殼霉真菌病毒（CMRV）基因組的分子生物學(xué)特性研究姓名程家森申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)植物病理學(xué)指導(dǎo)教師姜道宏20030501華中農(nóng)業(yè)大學(xué)2003屆碩士學(xué)位論文MOLECULARCHARACTERIZATIONOFADSRNATOTIRIVUSINFECTINGTHESCLEROTIALPARASITECONIOTHYRIUMMINITANSABSTRACTCONIOTHYRIUMMINITANS，ANIMPORTANTSCLEROTIALMYCOPARASITEOFSCLERO“NIASCLEROTIORUMWITHWORLDWIDEDISTRIBUTIONHASGREATPOTENTIALFORBIOLOGICALCONTROLOFPLANTDISEASESCAUSEDBYSSCLEROTIORUMANDOTHERSCLEROHNIASPPTHECOMPLETENUELEOTIDESEQUENCE，4975BP，OFTHEDOUBLESTRANDEDRNADSRNAMYCOVIRUSINFECTINGTHESELEROTIALPARASITECONIOTHYRIUMMINITANSCMRVWASDETERMINEDSEQUENOEANALYSISREVEALEDTHEOCCURRENCEOFTWOOVERLAPPINGOPENREADINGFRAMESORFSTHE5’PROXIMALLARGEORFOVWL；NUCLEOTIDEPOSITIONS622389ENCODESAPUTATIVECOATPROTEINCPWITHAPREDICTEDMOLECULARMASSOF80344DA，ANDTHE3’一PROXIMALORFORF2，NUCLEOTIDEPOSITIONS23864875ENCODESAPUTATIVERNADEPENDENTRNAPOLYMERASERDRPWITHAPREDICTEDMOLECULARMASSOF82551DATHETETRANUCLEOTIDEAUGAATNUCLEOTIDEPOSITIONS23862389INCLUDESTHEPREDICTEDSTARTCODONOFORF2，WHICHOVERLAPSWITHTHESTOPEODONFOROKFL，BASEDONGENOMEORGANIZATIONANDSEQUENCEANALYSISENCODEDPROTEINS，THEVIRUSINFECTINGCMINITANSSTRAINCHYL，DESIGNATEDCMINITANSRNAVIRUSCN餓V，BELONGSTOTHEFAMILYTOTIVIRIDAEPAIRWISESEQUENCECOMPARISONSOFTHEDEDUCEDAMINOACIDSEQUENCESENCODEDBYCMRVASWELLASPHYLOGENTICANALYSISINDICATEDTHATITISMORECLOSELYRELATEDTOTHETOTIVIRUSESTHATINFECTFILAMENTOUSFUNGITHANTOTHOSEINFECTINGPROTOZOA，YEASTANDSMUTFUNGITOTESTTHESTABILITYOFC刪INCMINITANS100SINGLECONIDIUMISOLATIONCULTURESWEREOBTAINEDANDOBSERVEDFORDEVELOPMENTOFCOLONYMORPHOLOGYALLOFTHE100CULTURESHADASIMILARCOLONYMORPHOLOGYCOMPAREDTOTHEORIGINALSTRAINCHYI，AMONGTHEM32CULTURESRANDOMLYSELECTEDWEREPROVEDTOCALTYDSRNAGENOMEOFCMRVSPORESOFCHY1WEREBURIEDINTOFIELDSOILFORTWOMONTHS。AND8CULTURESWERERECOVEREDFROMSOILWITHSCLEROTIALBAITINGALLTHE8CULTURESHADTHESAMEPHENOTYPEOFCHYL，ANDVIRALDSRNAWASEXTRACTEDFROMALLTHE8CULTURESNORTHEMBLOTTINGSSHOWEDTHATALLTHEVIRAIDSRNAOFTHE8CULTURESWERETHEVIRALGENOMEOFCMRVTHESERESULTSSUGGESTEDTHATCMRVINEMINILAMWASSTABLETWENTYEIGHTCMINITANSARAINSINCLUDING5FROMUNITEDKINGDOMAND3WTREATEDCHY一1WEREUSEDTOCHECKTHEDSRNAOFMYCOVIRUS，AMONGTHEM12STRAINSWEREPROVEDINFECTEDBYMYCOVIRUSNORTHERNBLOTTINGANALYSISREVEALEDTHATTHEVIRALDSRNAINALLTHESETENSTRAINSCOULDBEHYBRIDIZEDWITHTHEPROBEMADEFROMACDNACLONEDERIVEDFROMCMRVDSRNASUGGESTINGTHATTHOSEVIRUSESMIGHTBEINTHESAMEGROUPFSPECIESITINFERREDTHATVIRUSINCMINITANSMIGHTBEVERYCOMMONKEYWORDSCONIOTHYRIUMMINITANS，DSRNAELEMENT，CMRVMYCOVIRUS，TOTIVIRUS2

簡(jiǎn)介：廣西大學(xué)碩士學(xué)位論文傳染性法氏囊病病毒的分子生物學(xué)快速鑒別診斷技術(shù)的研究姓名龍進(jìn)學(xué)申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師韋平李康然200351震P大警2003屆碩士學(xué)位論文義的兩種限制性?xún)?nèi)切酶SACI和SSPI建立的REA，對(duì)5株屬于CLBDV的疫苗株和6株標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)毒株；屬于VVLBDV的毒株GXL0、YLL、YL2和YLZ等分離毒；屬于VLBDV的美國(guó)變異E株進(jìn)行酶切分析，結(jié)果與前人的研究相符。另外，針對(duì)不同強(qiáng)弱毒株的IBDV的VP2高變區(qū)序列的差異設(shè)計(jì)合成了VVLBDV的型特異性引物VVLBDAVVIBDS，建立型特異的RTPCR，只需一次反應(yīng)即可區(qū)分CLBDV和VVLBDV。第三，應(yīng)用本研究建立的REA和VVLBDV型特異性RTPCR技術(shù)，對(duì)34份采自廣西不同地區(qū)的IBDV病料，其中PCR反應(yīng)陽(yáng)性的23份的PCR產(chǎn)物，進(jìn)行酶切分型和特異性引物擴(kuò)增。結(jié)果發(fā)現(xiàn)1993年至2003年的病料或分離的毒株中，有8株確定為VVIBDV，13株確定為CLBDV，另外，有兩株不能確定。關(guān)鍵詞IBDV，‘RTPCR／NESTEDPCR快速診斷病毒分離限制性酶切分析型特異性引物

簡(jiǎn)介：揚(yáng)州大學(xué)碩士學(xué)位論文犬細(xì)小病毒VP2基因的分子生物學(xué)特性的研究姓名楊玲申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師劉秀梵張如寬20020401ABSTRACTAPAIROFPRIMERSWEREDESIGNEDANDSYNTHESIZEDBASEDONVP2GENEOFCPVFROMGENEBANKTHEGENOMICDNASAMPLESOFCANINEPARVOVIRUSSTRAINISOLATEDINYANGZL30UWEREEXTRACTEDANDUSEDASTEMPLATESFORPOLYMERASECHAINREACTIONPCRTOAMPLIFYTHEVP2GENETHESPECIFIC1740BPBANDWASAMPLIFEDANDCLONEDINTOPUCL8VECTORATTHERESTRICTIONENDONUCLEASEECORIANDSALISITESTHERECOMBINANTPALSMIDSWEREIDENTIFIEDBYRESTRICTIONENDONUELEASEANALYSISTHEEXOGENOUSINSERTOFRECOMBINANTPLASMIDWASFURTHERCONFIRMEDBYSEQUENCEANALYSISAFTERSEQUENCING，VV2GENEOFYANGZHOUISOLATIONWASCOMPAREDWITHTHATOFAMERICANREFERENCESTRAINSCPVDTYPE2，CPV15TYPE2A，CPV39TYPE2BTHERESULTSSHOWED995％，997％997％HOMOLOGYAMONGTHESEDIFFERENTSTRAINSVP2FRAGMENTSFIROMCPVYANGZHOUSTRAINWEREAMPLIFIEDWITHANOTHERTWOPAIRSOFPRIMERSPCRFRAGMENTSWERECLONEDTOTHEDOWNSTREAMOFGSTGENEACCORDINGTOTHEFIGHTOPENREADINGFRAMEINPGEX6P1VECTORAFTERINDUCINGWITH10MMIPTGAND37。CTHEINSERTSWEREEXPRESSEDASTWOFUSIONPROTEINSCONTAININGTHEGSTPROTEINACCORDINGTOSDSPAGEANALYSISTWOGSTVP2FUSIONPROTEINSWEREFOUNDAS54KDAND61KDBANDSRESPECTIVELYTHEEXPRESSEDPRODUCTSⅥ啪EXTRACTEDFROMTHEGELANDADDED髂IMMUNOGENTOIMMUNIZEMICEINTRAPEDTONEALLY5DOSESWITHONEWEEKINTERVALSTHESPECIFICITYOFANTIBODYW觴DETECTEDPOSITIVELYAGAINSTCPVINFECTEDFK81CELLINTHEINDIRECTINAMUNOFLUORESCENTASSAYIFATHERESULTSOFTHESTUDYSHOWEDTHATTHEINVITROEXPRESSEDPRODUCTSOFVP2GENEMAINTAINEDTHENAIVEANTIGENICITYOFCPVTHESEQUENCEANALYSISOFVP2GENEWILLCONTRIBUTETOTHESTUDYOFANTIGENICDRIFT，ANDTHEFUSIONPROTEINSWILLBEUSEFULFORTHEGENERATIONOFSPECIFICMONOCLONALANTIBODIESANDRECOMBINANTVACCINESKEYWORDSCANINEPARVOVIRNS；POLYMERASECHAINREACTION；VP2GENE；SEQUENCEANALYSIS；HOMOLOGY；EXPRESSION；INDIRECTIMMUNOFLUORESCENTASSAY

簡(jiǎn)介：中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)博士學(xué)位論文中國(guó)傳染性法氏囊病病毒分子流行病學(xué)及其毒力的研究姓名喬素蘭申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專(zhuān)業(yè)生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師張曼夫20020801度不同的保護(hù)力。為進(jìn)一步研究VIY2高變區(qū)對(duì)IBDV毒力的影響，初步探索反轉(zhuǎn)錄遺傳基因工程疫苗的研制方向。本實(shí)驗(yàn)首先采用雙融合PCR將弱毒BJ疫苗株的VP2高變區(qū)替換到WLBDVHARBINI的相應(yīng)位置，井將3’非編碼區(qū)及5’非編碼區(qū)連接到正確位置，弗在病毒CDNA5’端引入T7RNA聚合酶啟動(dòng)子序列，連于載體PUCL8和PMDL8得到兩個(gè)載有IBDVCDNA嵌合體的的侵染性克隆PUCLHA△，PMDL8HAA。PUCISHA△含有全基因組序列PMDL8HA△不含37非編碼區(qū)。采用融合PCR將B節(jié)段5’菲編碼區(qū)連RB節(jié)段的相應(yīng)位置并引入T7啟動(dòng)子序列，連于載體PMDL8得到侵染性克隆PMDL8HBA。采用ORNA介導(dǎo)的反轉(zhuǎn)錄遺傳系統(tǒng)在CEF細(xì)胞上重獲嵌合體病毒，表明新的重組病毒產(chǎn)生了細(xì)胞適應(yīng)性。RTPCR和熒光抗體法鑒定證明了成功重獲嵌合體病毒。測(cè)定兩個(gè)嵌合體病毒的EID∞。用2000個(gè)E1D“接種4周齡SPF雞，測(cè)定其毒力。結(jié)果發(fā)現(xiàn)兩個(gè)重獲的嵌合體病毒在SPF雞上的毒力較WLBDVHARBINI有所降低，病理切片顯示兩個(gè)重獲的嵌合體病毒對(duì)法氏囊組織造成的損傷明顯減輕。兩個(gè)重獲的嵌合體病毒在對(duì)雞的死亡率和對(duì)法氏囊組織造成的損傷無(wú)明顯差異。以上結(jié)果表明VI2高變區(qū)是IBDV細(xì)胞適應(yīng)性和毒力的重要因素，3’非編碼區(qū)對(duì)IBDV細(xì)胞適應(yīng)性和毒力不是必需的。關(guān)鍵詞WLBDV，VP2高變區(qū)，分子流行病學(xué)，RT／NESTEDPCR，免疫保護(hù)，片段替換雙融合PCR，體外轉(zhuǎn)錄，CRNA介導(dǎo)的反轉(zhuǎn)錄遺傳體系，細(xì)胞適應(yīng)性，毒力2

簡(jiǎn)介：揚(yáng)州大學(xué)碩士學(xué)位論文馬立克氏病病毒類(lèi)白細(xì)胞介素8基因表達(dá)及生物學(xué)特性研究姓名張?chǎng)斡钌暾?qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師秦愛(ài)建20030501塑矍盔蘭矍查蘭壘笙苧一一2分離盤(pán)滇，靂闋接受疫熒光法檢測(cè)撓俸滾度。蘇PERIL8擺矮粒與黼活疫鎣聯(lián)合免疫雛雞。試驗(yàn)結(jié)果表明，試驗(yàn)組與對(duì)照組抗體滴度無(wú)顯著荔異，這些結(jié)果表明，上述免疫途徑簸方法船入辯VLL一8，對(duì)梳體俸液免疫無(wú)疆顯靜調(diào)節(jié)依靂，然而透過(guò)其它途徑能否對(duì)機(jī)體免疫有調(diào)節(jié)作用還裔特進(jìn)一步的研究。關(guān)鍵詞馬立克氏病病毒；病毒類(lèi)白細(xì)胞介素8；序歹0分祈；表達(dá)；趨化性；兔疫源性；免疫調(diào)節(jié)

簡(jiǎn)介：揚(yáng)州大學(xué)碩士學(xué)位論文鵝出血性壞死性肝炎病毒的生物學(xué)特性研究姓名康孟佼申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師朱國(guó)強(qiáng)王永坤20030401揚(yáng)州大學(xué)碩士學(xué)位論文ABSTRACTANEWDISEASEWASOUTBREAKINGINTHEGEESENOOLDERTHANONEMONTHINJIANGSUPROVINCEWITH70％MORTALITYWENAMEDTHEDISEASEGOOSEHEMORRHAGICNECROTICHEPATITISACCORDINGTOITSMAINLYPATHOLOGICCHANGESREPLICATETHEDISEASEBYINOCULATINGGOOSETHESUSPENSIONOFLIVER；THEDESIREDDISEASEAPPEARED7DAYSLATER，WHICHWASCONSISTENTWITHTHENATUREINDUCEDONETHELIVER，SPLEENANDKIDNEYOFGOOSEWEREMADEOUTPATHOLOGICSLICESTHEVIRUSINTHELIVERSUSPENSIONDEALINGWITHTHETECHNOLOGYOFIONEXCHANGECAPTURESHOWEDSPHERICAL，NOENVELOPE，HAVINGDOUBLEDECKCAPSID，WHICHRANGEFROM75NM50NMINDIAMETERBYTEMTHEVIRUSRESISTTOAETHER，CHLOROFORM，TYPTON，HEATANDACID；THEVIRUSGIVETHECHICKENEMBRYO，DUCKEMBRYO，GOOSEEMBRYOA80％MORTALITYINOCULATINGBYTHEWAYOFALLANTOCHORIONANDCAN’TADAPTTOALLANTOICCAVITYTHEVIRUS，AFTERCONTINUOUSLYPROPAGATINGINCHICKENEMBRYOFIBROBLASTFOR5GENERATIONS，WILLINDUCETHECEFSTABLEPATHOGENESISSUCHASFUSIONCELLTHEULTRATHINSECTIONSWHICHWEREMADEOUTFROMTHEINFECTEDCEFATPROGRESSIVETIMEANDFROMTHECHICKENEMBRYOINFECTING72HLATERWEREOBSERVEDBYTEM，THERESULTSSUGGESTEDTHATTHEVIRUSEXISTBYSINGLEORENDOBODYANDREPLICATEINCYTOPLASMACCORDINGTOTHEICTVPRINCIPLES，ALLTHEINFORMATIONABOVEINDICATETHISVIRUSREOVIRIDAE，ORTHOREOVIRUS，AVIANREOVIRUSKEYWORDSGOOSEHEMORRHAGICNECROTICHEPATITIS；REOVIRUS；PHYSIEALCHARACTERSELECTRONMICROSCOPY2

簡(jiǎn)介：漸；工大學(xué)博士論文摘要以浙江省的水稻黑條矮縮病、河北省的小麥綠矮病和湖北省的玉米粗縮病的病毒分離物為材料，對(duì)我國(guó)3個(gè)病毒分離物進(jìn)行了系列比較研究A3個(gè)病毒分離物粒子大小形態(tài)相似，且在血清學(xué)上密切相關(guān)；三者的介體、寄主相同，并引起相同的癥狀。提純3個(gè)病毒分離物的基因組片段，凝膠電泳顯示它們相應(yīng)的基因組片段之間大小極其相似，推測(cè)3個(gè)病毒分離物可能是同一種病毒。然后根據(jù)水稻黑條矮縮病毒RICEBLACKSTREAKED咖口礦VIRUS，RBSDV日本分離物的S10設(shè)計(jì)一對(duì)引物，利用RTPCR技術(shù)，以3個(gè)中國(guó)分離物基因組片段S10為模板，均特異擴(kuò)增到預(yù)期大小的片段?？寺?個(gè)中國(guó)分離物基因組片段S10并測(cè)定其全序列，比較分析發(fā)現(xiàn)3個(gè)中國(guó)分離物基因組片段S10相應(yīng)部分之間的核苷酸同源性為979％～989％，和日本RBSDV分離物基因組片段S10的相應(yīng)部分核苷酸同源性為928％一931％，和意大利的玉米粗縮病毒MAIZEROUGHAW口RFV／RUS，MRDV基因組片段SIO相應(yīng)部分的核苷酸同源性分別為876％～883％，因此，3個(gè)中國(guó)分離物都應(yīng)該是RBSDV，而不是MRDV也就是說(shuō)中國(guó)不同地區(qū)發(fā)生的水稻黑條矮縮病、玉米粗縮病和小麥綠矮病都是由RBSDV引起的。緊接著在克隆基因組片段S10中間部分序列的基礎(chǔ)上，采取了一種基于RTPCR技術(shù)的簡(jiǎn)便方法克隆了河北分離物基因組片段S7～S10、浙江分離物的S7～S10以及湖北分離物的S9～S10，并測(cè)定了它們的全序列FEMBL／DDBJ。＼／GENBANK數(shù)據(jù)庫(kù)的登錄號(hào)分別為AJ297427RBSDVZJS7、A3297431RBSDVZJS8、AJ297430RBSDVZJS9、AJ297433RBSDVZJS10、A3297428ITBSDVHEBS7、AJ297432RBSDVHEBS8、A3297429RBSDVHEBS9、A3297434RBSDVHEBS10、AJ291706RBSDVHUBS9、A3291707RBSDVHUBS10。3個(gè)中國(guó)RBSDV之間的同源性最高核苷酸同源性940％99O％，氨基酸同源性963％～100％，與RBSDVJAD的同源性次之核苷酸同源性90O％～949％，氨基酸同源性911％～986％，與意大利MRDV的同源性較低核苷酸同源性851％～881％，氨基酸同源性855％943％。進(jìn)一步明確了在中國(guó)發(fā)生的小麥綠矮病、玉米粗縮病、水稻黑浙江大學(xué)博士淪文ABSTRACTTHREEISOLATESOFPLANTREOVIMSESCAUSINGSEVERESTUNTINGANDDARKLEAFSYMPTOMSOILWHEATINHEBEIPROVINCE，ONRICEINZHEJIANGPROVINCEANDONMAIZEINHUBEI，CHINA，HAVEBEENCHARACTERIZEDTHE、IRUSPARTICLESOFTHREEISOLATESWEREABOUT60RIMINDIAMETERANDCLOSELYRELATEDSEROLOGICALLYTHEIRDSRNAELECTROPHORETICPROFILESINAGAROSEGELWERESIMILARTHE3、、EREBOTHTRANSMITTEDEFFICIENTLYBYTHEPLANTHOPPERLAODELPHAXSTRIATELLUSTOMAIZEANDRICEFROMTHEIRORIGINALHOSTSBUTMAIZEWASNOTAVERYSUITABLEHOSTFORTHEVECTORANDⅥ’ASAPOORSOURCEOFVIRUSTHEFRAGMENTSCORRESPONDINGTOGENOMESEGMENTS10OFRICEBLACKSTREAKED咖萬(wàn)V批RBSDVWEREAMPLIFIEDBYRTPCRFROMTHREECHINESEISOLATESANDSEQUENCEDTHEREWERE979％一989％IDENTICALNUCLEOTIDESBETWEENTHETHREECHINESEISOLATESWHICHAPPEARTOBERBSDV92_8％。931％IDENTICALNUCLEOTIDESTOJAPANESEISOLATERATHERTHANMAIZEROUGHDWARFVIRUSMRD＼7876％。883％IDENTICALNUCLEOTIDESTOITALIANISOLATETHEREFORE，ALLTHREECHINESEISOLATESSHOULDBECLASSIFIEDASRBSDVTHATIS，THEDWARFDISEASEONMAIZE，WHEAT，RICEINDIFFERENTREGIONINCHINAISCAUSEDBYRBSDVAFTERTHEINTERNALREGIONOFGENOMESEGMENTSS10OFTHREECHINESEISOLATESWASDETERMINED，GENOMESEGMENTSS7’SIOOFRBSDVZJ，S7一S10OFRBSDVHEB，ANDS9～S10OFRBSDVHUBHADBEENCLONEDANDSEQUENCEDUSINGASETOFSTRATEGYBASEDONTHERTPCRTHECOMPLETENUCLEOTIDESEQUENCESOFEACHGENOMESEGMENTWEREASSEMBLEDANDDEPOSITEDINTHEGENBANK／EMBL／DDBJDATABASESTHEACCESSIONNUMBERSAREAJ297427RBSDVZJS7，AJ297431RBSDVZJSS，AJ297430RBSDVZJS9，AJ297433BSDVZJS1O，AJ297428RBSDVHEBS7，AJ297432RBSDVHEBSS，AJ297429RBSDVHEBS9，AJ297434RBSDVHEBS10，AJ291706RBSDVHUBS9，AJ291707RBSDVHUBS10，RESPECTIVELYGENOMESEGMENTOFTHREECHINESEISOLATESSHARED94O％～99O％AND963％一100％HOMOLOGYATLEVELOFNUCLEOTIDEANDAMINOACIDSEQUENCE，RESPECTIVELYTHEYSHARED90O％’949％AND911％’988％HOMOLOGYWITHTHOSEOFRBSDVJAPATLEVELOF3

簡(jiǎn)介：中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文白草花葉病毒生物學(xué)特性的測(cè)定和玉米矮花葉毒原山西分離物的鑒定姓名王文靜申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)植物病理學(xué)指導(dǎo)教師李懷方20030601ABSTRACTTHISPAPERCOMPRISESTWOMAJORPARTSONEISABOUTTHEBIOLOGICALPROPERTIESOFPENNISETUMMOSAICVIRUS，WHICHISANEWSPECIESOFPOTYVIRUSTHEOTHERISTHEIDENTIFICATONOFMAIZEDWARFMOSAICDIEASEINSHARTXIPROVINCE，CHINABYMETHODSOFBIOLOGYSEROLOGYANDMOLECULARBIOLOGYPENMVANDSCMVBJCOULDBEDISCRIMINATEDBASEDONTHEIRSYMPTOMEXPRESSIONONTHEFOURDIFFERENTIALSORGHUMHOSTS，XINLIANG7，XINLIANG52，XIONGYUEL91ANDATLASPENMVCAUSEDMOSAICONALLFOURDIFFERENTIALHOSTSHOWEVERSCMVBJLEDTODIFFERENTSYMPTOMONTHEMSCMVBJCAUSEDREDLONGNECROTICSTREAKSANDDEADONXINLIANG7ANDXIONGYUE191SOONAREUINTERESTINGLYWHENXINLIANG52WASMECHANICALLYINOCULATEDBYSCMVBJ，SOMEPLANTSSHOWEDMOSAICANDSOMESHOWEDREDLONGNECROTICSGEAKSANDEVIDENTLYDWARFTHELATTERWASDEADSOONAFTERNOSYMPTOMWASABSERVEDONATLASINOCULATEDWI山SCMV_BJTHEHOSTRANGEOFPENMVISLIMITEDTOGRAN咖E∞SUCHASMAIZE，BUTEXCEPTOATANDJOHNGRASSSORGHUMHALEPENSEPENMVCOULDBETRANSMITTEDBYMYZUSPERSICAEINANONPERSISTENTMANFFLERANDALSOBEMECHANICALLYINOCULATEDPEILMVPOSSESSEDTHEFEATURESHAREDBYALLPOTYVIMSESIETHEINDUCTIONOFCHARACTERISTICPINWHEELINCLUSIONBODIESINTHECYTOPLASMOFTHEINFECTEDCELLSTHEMAXIMUMABSORPTIONOFPURIFIEDPEILMVISAT25898NMWHILETHEMINIMUMISAT23829NMTHERATIOOFOD260ANDOD2S0IS16923THEVIRUSPARTICLESAREFIEXUOUSLYFILAMENTOUSANDFROM500NMTO750MRLLONGTHETIPIS53℃THEDEPIS10“ANDTHEL1VIS48HOURSTHEMOLECULARWEIGHTOFCOATPROTEINIS38L【DATHEANTISERIUMAGAINSTTHEPANMVWASRAISEDINRABBITANDITSTITERWAS11024TWENTYFOURSAMPLESOFMAIZESHOWINGMOSAICFROMSHANXLPROVINCE，CHINAHAVEBEEN1DENTIFIEDBYBIOLOGICAL，SEROLOGICALANDMOLECULARMETHODSTHEBIOLOGICALANDSEROLOGICALASSAYSSHOWEDTHATFOURSAMPLESCONTAINEDSCMVBJ，ONESAMPLECONTAINEDPENMVANDONESAMPLEWASSEROLOGICALLYDISTANTLYRELATEDTOPENMVTHEISOLATEWHICHWASCHARACTERIZEDASPENMVBYSEROLOGICALMETHODWASFURTHERIDENTIFIEDBYMOLECULARMETHODITSCPGENEWASCLONEDBYRTPCRANDTHENUCLEOTIDESEQUENCEWASDETERMINEDTHENUCLEOTIDESEQUENCEANALYSISSHOWEDTHATTHEIDENTITYBETWEENTHISISOLATEANDPENMVIS994％THUSITSHOULDBEPENMVACCORDINGTOTHENEWCRITERIAPUBLISHEDBYICTVIN2000KEYWORDSPENNISETUMMOSAICVIRUS，SCMVBJ，BIOLOGICALPROPERTIESMOLECULARIDENTIFICATION，COATPROTEIN