簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多肌纖生成調(diào)節(jié)因子-1致心肌細(xì)胞肥大的分子機(jī)制研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：目的探討骨折后不同階段骨痂回植后的成骨效果并與自體髂骨植骨作對(duì)比觀察。方法選擇新西蘭家兔為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。閉合三點(diǎn)法造成雙側(cè)肱骨干骨折后，隨機(jī)分為2周、3周、4周三組。1、左側(cè)切開(kāi)取肱骨干骨折周?chē)丘?，剪成碎塊狀。切開(kāi)顯露左橈骨中段，以骨剪剪斷后，將骨痂植入骨折端。2、取與左側(cè)骨痂等量髂骨剪成小塊狀，同左側(cè)相同法切開(kāi)剪斷右側(cè)橈骨，將髂骨塊植入。每組動(dòng)物分別于不同階段分別處死后行X線、大體及組織學(xué)觀察。結(jié)果自體髂骨植入側(cè)早期呈死骨樣改變，通過(guò)軟骨化骨，“爬行替代”過(guò)程而最終完成骨折修復(fù)；第2、3周骨痂植入后無(wú)壞死發(fā)生，繼續(xù)完成軟骨化骨過(guò)程，骨折后早期階段（第1－3周）的化骨過(guò)程各階段比同期髂骨植骨提前1－2周，但在骨折后晚期兩者差別不明顯，最終均演變?yōu)槌墒旃墙M織；第4周骨痂植入組與髂骨植入組比較無(wú)明顯差別。結(jié)論家兔骨折后第2、3周骨痂，具有旺盛成活及成骨能力，回植后可直接成活，優(yōu)于自體髂骨植骨，骨折后4周骨痂回植與自體髂骨植骨相同。根據(jù)骨折后骨痂質(zhì)和量可以部分或全部替代自體髂骨移植。

簡(jiǎn)介：分類(lèi)號(hào)R783密級(jí)單位代碼10422學(xué)號(hào)200913726⑧∥蔡辦G碩士學(xué)位論文論文題目專(zhuān)業(yè)學(xué)位P38MAPK在偏側(cè)咀嚼大鼠咬肌適應(yīng)性改建中的作用RESEARCHABOUTTHEFUNCTIONOFP38MAPKDURINGMASSETERADAPTIVECHANGESINUNILATERALCHEWINGRATS作者姓名割室I學(xué)院名稱(chēng)旦腔醫(yī)堂院專(zhuān)業(yè)學(xué)位名稱(chēng)旦腔裂筮赳瞠拉旦腔峭指導(dǎo)教師汲堊教授合作導(dǎo)師2012年5月20日目錄中文摘要1英文摘要3符號(hào)說(shuō)明5正文前言66月U看材料和方法10結(jié)果17討論29結(jié)論35附圖表36參考文獻(xiàn)38致謝43攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)位論文目錄44

簡(jiǎn)介：中山大學(xué)碩士學(xué)位論文可降解骨組織工程支架生物相容性及其復(fù)合RHBMP2后成骨效能的研究姓名李軼申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專(zhuān)業(yè)口腔頜面外科指導(dǎo)教師冉煒20040520中山大學(xué)碩十學(xué)位論文可降解骨組織工程支架生物相容性駛北復(fù)合RHBMP．2后成骨效能的研究體標(biāo)本、組織學(xué)觀察體內(nèi)異位成骨隋況。20只成年新西蘭兔雙側(cè)下頜骨下緣形成15MMX6MM全層骨質(zhì)缺損，然后將復(fù)合RHBMP一2的支架材料植入一側(cè)缺損，未復(fù)合RHBMP一2的支架材料植入另一側(cè)作為陰性對(duì)照。術(shù)后2周、4周、8周、L2周取材行大體標(biāo)本、X片觀察、組織學(xué)觀察、電鏡觀察及計(jì)算機(jī)圖像分析。結(jié)果①新型骨組織工程支架A、B、C與對(duì)照材料D均系多IL支架材料，平均孔隙率80～85％，微孔直徑分布在200～3001JM，大孔附壁上有小孔，其問(wèn)有相互貫通的微孔，表面粗糙O發(fā)現(xiàn)支架材料A、B、C與對(duì)照材料D相比，支架材料C生物相容性好，同期成骨量最大。支架材料A、B組出現(xiàn)明顯的異物肉芽腫反應(yīng)。O復(fù)合RHBMP一2的支架材料C植入背部肌袋里2周后發(fā)現(xiàn)材料有少量降解并被纖維組織包繞、間充質(zhì)細(xì)胞聚集、炎癥反應(yīng)輕微。4周后材料進(jìn)一步降解并見(jiàn)類(lèi)骨質(zhì)、軟骨組織以及纖細(xì)的骨小梁形成。8周見(jiàn)骨組織進(jìn)一步成熟。對(duì)照組始終無(wú)骨組織形成；復(fù)合RHBMP一2的支架材料C修復(fù)缺損成骨時(shí)間早，成骨面積多，血管增生明顯，同期成骨量大。在缺損邊緣區(qū)可見(jiàn)新生骨從斷端向中央網(wǎng)孔內(nèi)生長(zhǎng)，包括膜內(nèi)成骨、軟骨成骨和直接成骨；缺損中央?yún)^(qū)可見(jiàn)直接成骨呈多中心成骨。至12周時(shí)缺損基本修復(fù)。對(duì)照側(cè)未見(jiàn)多中心成骨現(xiàn)象，缺損未能完全修復(fù)。術(shù)后12周實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組材料均有殘留。結(jié)論①支架材料C生物相容性好，成骨效果優(yōu)于對(duì)照材料D，是一種較為理想的骨組織工程生物支架材料。支架材料A、B不適宜作為骨組織工程生物支架材料；⑦支架材料C復(fù)合RHBMP一2后植入體內(nèi)有較強(qiáng)的異位成骨能力，是BMP的良好載體；O支架材料C在體內(nèi)具有傳導(dǎo)骨形成功能，復(fù)合RHB船2后有誘導(dǎo)一傳導(dǎo)雙重功能，是一種很有前途的骨組織支架材料。但是由于其本身的生物力學(xué)及降解速度方面的缺陷，使其應(yīng)用受到限制，故需要更深入的研究。關(guān)鍵詞骨組織工程支架；頜骨缺損；異位成骨；骨形成蛋白；兔；

簡(jiǎn)介：目的骨骼組織因創(chuàng)傷、腫瘤、感染、畸形等造成的骨缺損在臨床中極為常見(jiàn)對(duì)缺損的修復(fù)主要采用骨移植術(shù)的方法進(jìn)行治療。有文獻(xiàn)報(bào)道在美國(guó)因各種因?yàn)樾枰M(jìn)行的骨移植術(shù)僅次于輸血占所有組織移植手術(shù)中的第二位。目前對(duì)骨缺損修復(fù)主要是采用自體骨移植以及同種異體骨或異種骨移植的方法進(jìn)行治療。由于自體骨來(lái)源極為有限且不可避免會(huì)增加新的創(chuàng)傷因而很多國(guó)家目前都采用經(jīng)過(guò)深低溫冷凍處理并保存的同種異體骨進(jìn)行移植但同樣存在來(lái)源困難以及免疫排斥、感染或疾病傳播等問(wèn)題。而植入物在植入體內(nèi)后如何才能更快的生長(zhǎng)同樣是一個(gè)重要的研究課題。由于以上因?yàn)槭古R床上目前對(duì)骨缺損尤其大范圍骨缺損的修復(fù)成為棘手的難題。已有的研究表明血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子VULARENDOTHELIALGROWTHFACTVEGF、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子BASICFIBROBLASTGROWTHFACTBFGF、骨形態(tài)發(fā)生蛋白BONEMPHOGEICPROTEINBMP及轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子1TRANSFMINGGROWTHFACTΒ1TGFΒ1等在血管生成過(guò)程中都起到重要的調(diào)節(jié)作用而VEGF已被證實(shí)是其中誘導(dǎo)血管生成作用最強(qiáng)的細(xì)胞因子。在成骨作用方面BMP的作用也早已得到確認(rèn)。隨著分子生物學(xué)、材料科學(xué)及基因工程技術(shù)等多學(xué)科的迅猛發(fā)展和交叉滲透給應(yīng)用細(xì)胞因子來(lái)促進(jìn)局部血管再生和加速骨生長(zhǎng)帶來(lái)了光明的前景。目前利用VEGF促進(jìn)局部組織再血管化BMP促進(jìn)骨生長(zhǎng)的研究較多但大多是采用局部注射、體內(nèi)基因轉(zhuǎn)染或?qū)⑵渑c載體復(fù)合后植入體內(nèi)的方法。由于體內(nèi)存在血液稀釋、定向轉(zhuǎn)染效果差等因?yàn)槭股鲜龇椒ù嬖诨虮磉_(dá)量低、表達(dá)時(shí)限短等缺點(diǎn)限制了其臨床應(yīng)用。采用過(guò)氧化氫乙醚法制備的脫蛋白骨DEPROTEINEDBONEDPB支架材料可較徹底的去除材料中主要的免疫原性物質(zhì)即蛋白質(zhì)和脂質(zhì)成份避免其植入體內(nèi)后引起排斥反應(yīng)。由于制作材料來(lái)源于松質(zhì)骨其孔隙率高孔徑在100300ΜM左右較好的保留了原骨組織的三維孔隙網(wǎng)架結(jié)構(gòu)系統(tǒng)。該材料因網(wǎng)架有效空間大保證了良好的骨傳導(dǎo)性并可為細(xì)胞的貼附、生長(zhǎng)、增殖和成骨提供理想場(chǎng)所。基于以上因?yàn)槲覀冊(cè)O(shè)想將VEGF和BMP在體外與生物衍生骨支架材料DPB復(fù)合成重組合人工骨植入兔橈骨缺損模型了解其在體內(nèi)的再血管化及成骨作用并與國(guó)內(nèi)經(jīng)批準(zhǔn)可臨床應(yīng)用的山西奧瑞深低溫冷凍骨比較研究其能否更好的促進(jìn)大段骨缺損的修復(fù)為臨床運(yùn)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。本實(shí)驗(yàn)從兩個(gè)方面進(jìn)行研究主要方法、結(jié)果及結(jié)論如下1生物衍生骨支架材料異種脫蛋白骨的制作取牛股骨下端松質(zhì)骨采用過(guò)氧化氫乙醚法制作成生物衍生骨支架材料。2RHVEGF165RHBMP2修飾于DPB支架材料中控干、稱(chēng)重、消毒后備用。3RHVEGF165RHBMP2DPB修復(fù)大段骨缺損動(dòng)物模型的實(shí)驗(yàn)研究。方法68只成年新西蘭大白兔隨機(jī)分成A、B兩組左前臂制成橈骨15MM骨缺損模型隨機(jī)植入RHVEGF165RHBMP2DPBA組或山西奧瑞深低溫冷凍骨B組。術(shù)后第1、2、4、8、12、16周隨機(jī)抽取兩組動(dòng)物各2只處死后分別行X線片、組織切片HE染色檢查；第3天及1、2、4、8周隨機(jī)抽取兩組動(dòng)物各2只行上肢墨汁灌注微血管分析；第4、8、12、16周隨機(jī)抽取兩組動(dòng)物各3只行生物力學(xué)測(cè)試。結(jié)果在各時(shí)間段A組血管生成明顯多于B組；A組骨痂形成、材料與宿主骨的愈合均好于B組；A組引起的免疫排斥反應(yīng)與B組無(wú)明顯差別。綜上所述RHVEGF165RHBMP2DPB復(fù)合骨能在局部持續(xù)、有效釋放RHVEGF和RHBMP誘導(dǎo)骨痂形成并促進(jìn)移植物的早期血管化為骨愈合帶來(lái)豐富的靶細(xì)胞和生長(zhǎng)因子創(chuàng)造成骨的最佳微環(huán)境使移植物逐漸“活化”達(dá)到移植體與受體早期骨性愈合并最終成為受體自身組織并具有良好的生物學(xué)功能及生物力學(xué)功能為大段骨缺損的修復(fù)提供了一種有效地治療手段。

簡(jiǎn)介：目的微血管減壓術(shù)MICROVULARDECOMPRESSION，MVD是治療面神經(jīng)痙HEMIFACIALSPASMHFS的首選外科方法，由于小腦橋腦角解剖結(jié)構(gòu)復(fù)雜，且責(zé)任血管常穿行于面神經(jīng)之間，分離責(zé)任血管時(shí)易造成神經(jīng)及血管機(jī)械性損傷，這增加了術(shù)后并發(fā)癥的出現(xiàn)機(jī)會(huì)，如術(shù)后眩暈、聽(tīng)力障礙、面癱以及后組顱神經(jīng)麻痹等。隨著手術(shù)經(jīng)驗(yàn)的積累和手術(shù)技巧的不斷提高，手術(shù)過(guò)程中對(duì)神經(jīng)和血管的機(jī)械性損傷逐漸減少，但有時(shí)為將責(zé)任血管和神經(jīng)充分分離，對(duì)血管和神經(jīng)的刺激仍難以避免，可因?qū)ρ艿倪^(guò)度牽拉而導(dǎo)致血管痙攣、血栓形成甚至分支斷裂，使術(shù)后并發(fā)癥出現(xiàn)的機(jī)會(huì)大大增加。鈣離子拮抗劑尼膜地平能抑制鈣離子進(jìn)入細(xì)胞，可有選擇的擴(kuò)張腦血管，起到抑制血管平滑肌收縮的作用，它可以自由通過(guò)血腦屏障而直接作用于神經(jīng)細(xì)胞和腦血管，改善大腦供血，大大提高了對(duì)缺氧的耐受力。研究表明，尼莫地平還能夠增加神經(jīng)內(nèi)毛細(xì)血管的密度，使微血管生長(zhǎng)加快和促進(jìn)毛細(xì)血管的開(kāi)放和功能恢復(fù)，減輕組織水腫，促進(jìn)側(cè)支循環(huán)的建立，能夠使神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)和功能得到改善。這就為鈣離子拮抗劑防治面肌痙攣微血管減壓術(shù)引起的腦血管痙攣和神經(jīng)刺激性損傷并發(fā)癥提供了理論依據(jù)。本研究將鈣離子拮抗劑尼莫地平應(yīng)用于面肌痙攣圍手術(shù)期，來(lái)觀察是否能減少術(shù)后并發(fā)癥的出現(xiàn)，是否能夠縮短術(shù)后并發(fā)癥的治愈的時(shí)間。方法選擇行乙狀竇后入路面神經(jīng)微血管減壓術(shù)治療的面肌痙攣病人112例，全部病例均為單側(cè)發(fā)病，常規(guī)行MRI檢查以排除患側(cè)橋腦角占位性病變，術(shù)前行腦干聽(tīng)覺(jué)誘發(fā)電位BRAINSTEMAUDITYEVOKEDPOTENTIAL，BAEP檢測(cè)，均在正‘常范圍內(nèi)，無(wú)眩暈、耳鳴、聽(tīng)力障礙、面癱癥狀，術(shù)后隨訪3個(gè)月。根據(jù)圍手術(shù)期有無(wú)使用鈣離子拮抗劑按序貫隨機(jī)法分為兩組圍手術(shù)期應(yīng)用鈣離子拮抗劑為治療組56例；圍手術(shù)期不應(yīng)用鈣離子拮抗劑為對(duì)照組56例。兩組在性別、患側(cè)、年齡、病程、BAEP檢測(cè)方面均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異P＞005。治療組56例于術(shù)前一天口服鈣離子拮抗劑尼莫地平60MGQ4H，術(shù)中面神經(jīng)微血管解剖前半小時(shí)持續(xù)靜脈泵入尼莫地平注射液08MGH，術(shù)后繼續(xù)應(yīng)用尼莫地平注射液持續(xù)靜脈泵入08MGH，連續(xù)5天，停用靜脈藥后繼續(xù)60MGQ4H至術(shù)后第7天停用。對(duì)照組圍手術(shù)期不應(yīng)用鈣離子拮抗劑尼莫地平。比較兩組術(shù)后并發(fā)癥的出現(xiàn)情況。結(jié)果術(shù)后第7天行腦干聽(tīng)覺(jué)誘發(fā)電位結(jié)果顯示20例異常，全部病例術(shù)后均為無(wú)腦干梗死發(fā)生。治療組術(shù)后第7天頭痛5例，頭暈7例，耳鳴7例，聽(tīng)力下降6例，面部麻木3例，面癱6例，感染2例，腦脊液漏L例；對(duì)照組術(shù)后頭痛10例，頭暈16例，耳鳴17例，聽(tīng)力下降14例，面部麻木3例，面癱15例，感染3例，腦脊液漏1例。術(shù)后隨訪3個(gè)月，兩組頭痛癥狀全部消失，顱內(nèi)感染、腦脊液漏均治愈，兩組中21例面癱緩解，出現(xiàn)遲發(fā)型面癱2例，發(fā)生時(shí)間為術(shù)后7～16D，平均12D，均有不同程度的緩解，其中治療組遺留面癱2例，對(duì)照組遺留5例。治療組術(shù)后3月隨訪頭暈癥狀均消失，遺留耳鳴2例，聽(tīng)力障礙1例，面部麻木L例；對(duì)照組遺留頭暈2例，耳鳴3例，聽(tīng)力障礙3例，面部麻木1例。可見(jiàn)術(shù)后第7天聽(tīng)力正常組與異常組BEAP各值比較統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著P＜001；術(shù)后第7天治療組與對(duì)照組頭暈、耳鳴、聽(tīng)力障礙、面癱有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異P＜005；術(shù)后第7天治療組與對(duì)照組頭痛、面部麻木、感染及腦脊液漏未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異P＞005；術(shù)后3月隨訪治療組與對(duì)照組頭暈、耳鳴、聽(tīng)力障礙、面癱有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異P＜005；術(shù)后3月隨訪治療組與對(duì)照組頭痛、面部麻木、感染及腦脊液漏未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異P＞005。結(jié)論L、鈣離子拮抗劑尼莫地平在面肌痙攣圍手術(shù)期的應(yīng)用不能減少術(shù)后頭痛、面部麻木、感染及腦脊液漏并發(fā)癥的出現(xiàn)。2、鈣離子拮抗劑尼莫地平在面肌痙攣圍手術(shù)期的應(yīng)用能減少頭暈、耳鳴、聽(tīng)力障礙及面癱并發(fā)癥的出現(xiàn)，能夠縮短術(shù)后并發(fā)癥的治愈的時(shí)間，可作為面肌痙攣圍手術(shù)期的常規(guī)治療手段。

簡(jiǎn)介：雌激素對(duì)于女性生殖器官的發(fā)育及第二性征的維持具有不可替代的地位，對(duì)骨質(zhì)代謝和脂類(lèi)代謝有著重要的調(diào)節(jié)作用。女性進(jìn)入絕經(jīng)期后，隨著卵巢功能的衰退和體內(nèi)雌激素水平的下降，女性將出現(xiàn)更年期綜合癥，骨質(zhì)疏松、心血管疾病、老年癡呆等疾病的發(fā)病率也隨之上升。雌激素替代療法ESTROGENREPLACEMENTTHERAPYERT應(yīng)運(yùn)而生，它是給予具有雌激素活性的藥物，以糾正機(jī)體由于雌激素分泌不足所造成疾病的一種醫(yī)療措施。ERT可緩解由于雌激素降低引起的各種更年期癥狀，可降低骨質(zhì)疏松性骨折和冠心病的發(fā)生率。但長(zhǎng)期應(yīng)用雌激素有誘發(fā)子宮內(nèi)膜癌、乳腺癌等的危險(xiǎn)。植物雌激素作為雌激素的替代品，以其安全性及顯著的效果，受到越來(lái)越多的關(guān)注。本課題在前期研究卷柏具有類(lèi)雌激素樣活性的基礎(chǔ)上，以我國(guó)不同產(chǎn)地、種屬的十種卷柏為研究對(duì)象，利用整體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、體外細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)并結(jié)合報(bào)告基因檢測(cè)技術(shù)探討了各自植物雌激素樣作用及其可能的作用機(jī)制和影響因素；并利大鼠成骨肉瘤細(xì)胞模型，對(duì)卷柏抗絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松活性成分進(jìn)行了篩選。本論文分兩部分第一部分卷柏雌激素活性篩選的實(shí)驗(yàn)研究目的評(píng)價(jià)十種卷柏的雌激素活性，并探討卷柏具有植物雌激素作用的活性部位。方法首先，采用小鼠子宮增重法，觀察用藥前后小鼠子宮系數(shù)和體重變化情況；采用MTT法檢測(cè)受試物含藥血清及受試物直接對(duì)MCF7細(xì)胞增殖作用的影響；并結(jié)合報(bào)告基因技術(shù)，比較了醇提和水提兩種不同提取方法以及十種卷柏的雌激素活性，綜合評(píng)價(jià)篩選出雌激素活性最強(qiáng)的卷柏。然后，采用MTT法觀察卷柏總提物及卷柏上D101所得不同部位流份對(duì)乳腺癌細(xì)胞MCF7增殖活性的影響，并結(jié)合報(bào)告基因技術(shù)對(duì)活性部位的雌激素活性進(jìn)行比較。結(jié)果分為三部分1不同提取方法對(duì)卷柏雌激素活性影響的實(shí)驗(yàn)研究。子宮增重實(shí)驗(yàn)顯示醇提部位組比水提部位組小鼠體重增長(zhǎng)快，水提部位組小鼠子宮平均濕重及子宮系數(shù)比醇提部位組高；MCF7細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)顯示卷柏醇提物和水提物在一定的濃度范圍內(nèi)均能顯著促進(jìn)MCF7細(xì)胞的增殖，但水提物比醇提物對(duì)MCF7細(xì)胞增殖能力強(qiáng)；血清藥理顯示卷柏醇提物和水提物含藥血清在血清含量為5％時(shí)，醇提比水提促細(xì)胞增殖作用強(qiáng)，而在血清含量為25％時(shí)，水提比醇提對(duì)MCF7促增殖能力強(qiáng)。2十種卷柏雌激素活性篩選的實(shí)驗(yàn)研究。子宮增重實(shí)驗(yàn)顯示灌胃JB6和JB7可使小鼠的子宮系數(shù)明顯升高，與正常組相比差異顯著P001；灌胃JB5可促進(jìn)小鼠體重增長(zhǎng)加速，與正常對(duì)照組比較P005；血清藥理顯示JB6、JB7、JB10、JB1和JB9五組中藥含藥血清可顯著促進(jìn)MCF7細(xì)胞增殖；MCF7細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示JB3，JB5具有較強(qiáng)的促進(jìn)MCF7細(xì)胞增殖的活性，在02MGML，03MGML時(shí)，與正常組比較差異極顯著P001，與E2無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；JB10在03MGML，JB9在04MGML，05MGML時(shí)對(duì)MCF7細(xì)胞也具有較強(qiáng)的促增殖活性，另外JB6和JB7在適當(dāng)?shù)膭┝繒r(shí)，對(duì)MCF7細(xì)胞也具有較強(qiáng)的增殖活性；JB8和JB1在適當(dāng)?shù)膭┝繉?duì)MCF7細(xì)胞有一定的促進(jìn)作用；報(bào)告基因結(jié)果顯示由ERΑ介導(dǎo)時(shí)，JB3、JB6、JB8、JB4及JB7均能誘導(dǎo)報(bào)告基因LUC的表達(dá)P001，P005；由ERΒ介導(dǎo)時(shí)，除JB3外均能誘導(dǎo)報(bào)告基因LUC的表達(dá)P001；3卷柏SELAGINELLATARMARISCINABEAUVSPRING活性部位的篩選。MCF7細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示卷柏總提物及卷柏水部位、10％ETOH、50％ETOH部位能夠顯著促進(jìn)MCF7細(xì)胞增殖，與正常組比較差異極顯著P001；報(bào)告基因結(jié)果顯示不論是由ERΑ或ERΒ介導(dǎo)，卷柏活性部位給藥孔，熒光素酶活性都顯著高于正?？譖001，P005，但仍低于E2孔P001。并且卷柏與ERΑ的親和力較由ERΒ介導(dǎo)時(shí)的親和力大。結(jié)論卷柏具有弱雌激素作用1卷柏水提物比醇提物具有更高的雌激素活性。2除JB2無(wú)明顯的雌激素樣活性外，其余9種卷柏都有一定的雌激素樣活性，JB6是十種卷柏中雌激素活性較強(qiáng)較穩(wěn)定的一種。3卷柏屬植物卷柏水提物上大孔吸附樹(shù)脂所得水部位、10％ETOH部位及50％ETOH部位具有較強(qiáng)的雌激素活性，且50％ETOH部位雌激素活性遠(yuǎn)高于水部位和10％ETOH部位。第二部分卷柏SELAGINELLATAMARISCINABEAUVSPRING對(duì)成骨樣細(xì)胞UMR106增殖作用的實(shí)驗(yàn)研究目的考察了卷柏屬植物卷柏總提物及其上大孔吸附樹(shù)脂所得不同部位對(duì)成骨樣細(xì)胞UMR106的增殖作用。方法通過(guò)卷柏不同部位和UMR106成骨樣細(xì)胞共同體外培養(yǎng)，用MTT方法檢測(cè)了各部位對(duì)UMR106細(xì)胞增殖的作用。結(jié)果卷柏總提物及30％ETOH、40％ETOH部位對(duì)細(xì)胞具有較強(qiáng)的促增殖作用，水部位也有一定的促增殖作用。而卷柏10％ETOH、20％ETOH、50％ETOH部位對(duì)細(xì)胞增殖無(wú)明顯影響。結(jié)論卷柏水部位、30％ETOH、40％ETOH可能含有直接作用于成骨細(xì)胞的活性成分。卷柏可能通過(guò)促進(jìn)成骨細(xì)胞的增殖來(lái)發(fā)揮健骨及抗骨質(zhì)疏松的作用。

簡(jiǎn)介：研究背景和目的骨質(zhì)疏松癥OSTEOPOSISOP是一種代謝性疾病其特征是骨量下降和骨的微細(xì)結(jié)構(gòu)破壞表現(xiàn)為骨的脆性增加因而骨折的危險(xiǎn)性大為增加。隨著我國(guó)乃至全球老年人口的增加骨質(zhì)疏松癥發(fā)病率處于上升趨勢(shì)被世界衛(wèi)生組織列為中老年三大疾病之一。OP主要發(fā)病機(jī)制是機(jī)體的骨重建失衡。當(dāng)破骨細(xì)胞OSTEOCLASTOC行使的骨吸收作用大于成骨細(xì)胞OSTEOBLASTOB行使的骨形成作用時(shí)就會(huì)發(fā)生OP。骨重建是一個(gè)多因素參與的復(fù)雜過(guò)程力學(xué)載荷和雌激素都是影響其主要因素。實(shí)驗(yàn)探討植物雌激素Α玉米赤酶醇ΑZEARALANOLΑZAL為代表的化學(xué)信號(hào)和以力學(xué)載荷為代表的物理信號(hào)耦合作用對(duì)骨重建的影響通過(guò)建立二維和三維組織工程化培養(yǎng)模型考察OB對(duì)這兩種不同信號(hào)的生物學(xué)響應(yīng)機(jī)制。研究結(jié)果為戰(zhàn)傷骨折救治提供了理論基礎(chǔ)也為預(yù)防OP由“被動(dòng)醫(yī)療”轉(zhuǎn)向“主動(dòng)健康”提供臨床參考。因此研究工作對(duì)于相關(guān)骨疾病的治療與康復(fù)進(jìn)行了有意義的探索。研究方法1傳代培養(yǎng)小鼠前成骨細(xì)胞系MC3T3E1采用不同濃度ΑZAL作用于細(xì)胞72H后MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖活性PNPP法檢測(cè)ALP活性RTPCR檢測(cè)ALP、OPG及RANKLMRNA的表達(dá)水平2采用四點(diǎn)彎曲力學(xué)加載裝置選擇頻率為05HZ強(qiáng)度1000ΜΕ和2500ΜΕ的力學(xué)拉伸應(yīng)變作為力學(xué)加載組ΑZAL106、108、1010M作為藥物作用組對(duì)MC3T3E1細(xì)胞進(jìn)行單獨(dú)作用及聯(lián)合作用。力學(xué)加載方式為1次D1H次。細(xì)胞處理72H后采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞增殖情況PNPP法檢測(cè)ALP活性REALTIMERTPCR檢測(cè)ALP、RUNX2、OPG及RANKLMRNA的表達(dá)水平WESTERNBLOT分析方法檢測(cè)RUNX2、OPG及RANKL蛋白表達(dá)3殼聚糖與透明質(zhì)酸進(jìn)行交聯(lián)改性改性后與膠原按不同比例制備三種改性殼聚糖膠原羥基磷灰石復(fù)合支架對(duì)改性后的殼聚糖進(jìn)行紅外和差示掃描量熱圖譜進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析考察復(fù)合支架的孔徑、孔隙率、密度、力學(xué)強(qiáng)度等理化性質(zhì)支架接種細(xì)胞后考察細(xì)胞生長(zhǎng)曲線并進(jìn)行HE染色等形態(tài)學(xué)觀察4應(yīng)用動(dòng)態(tài)載荷與循環(huán)灌流反應(yīng)器培養(yǎng)細(xì)胞支架復(fù)合物。CCK8法檢測(cè)三種不同流速51020MLMIN和3500ΜΕ力學(xué)壓載1HZ2HD的力學(xué)環(huán)境下成骨細(xì)胞的增殖能力SEM考察細(xì)胞支架復(fù)合物表面和內(nèi)部細(xì)胞的分布及形態(tài)免疫組化染色和WESTERNBLOT分析法考察細(xì)胞分化標(biāo)志蛋白表達(dá)情況。VONKOSSA礦化結(jié)節(jié)染色法考察細(xì)胞支架復(fù)合物動(dòng)態(tài)培養(yǎng)礦化情況5在三維動(dòng)態(tài)培養(yǎng)細(xì)胞支架復(fù)合物體系中加入不同濃度的ΑZAL106、108、1010MCCK8法檢測(cè)增殖PNPP法檢測(cè)ALP活性WESTERNBLOT分析OPGRANKL蛋白表達(dá)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果11061012MΑZAL可顯著抑制成骨細(xì)胞的增殖P2力學(xué)拉伸單獨(dú)作用于成骨細(xì)胞可促進(jìn)細(xì)胞增殖ALP活性以及RUNX2蛋白表達(dá)并可以提高OPGRANKL比值。雖然力學(xué)載荷與ΑZAL耦合后仍然抑制成骨細(xì)胞增殖但高濃度ΑZAL106M耦合高強(qiáng)度拉伸應(yīng)變2500ΜΕ能夠顯著提高ALP活性ΑZAL耦合高強(qiáng)度拉伸應(yīng)變能夠顯著上調(diào)RUNX2蛋白表達(dá)。ΑZAL耦合低強(qiáng)度拉伸應(yīng)變1000ΜΕ可顯著上調(diào)OPGRANKL比值3紅外和差示掃描量熱圖譜證明透明質(zhì)酸和殼聚糖以酰胺鍵形成交聯(lián)的新化合物掃描電鏡顯示孔徑在50250MM之間孔隙率分別為462±188504±514625±453％密度分別為01049±02400921±80100509±534GML彈性模量分別為151±0192931±0383694±025KPA生長(zhǎng)曲線結(jié)果前7天B、C樣品中活細(xì)胞數(shù)量明顯高于A樣品從第10D開(kāi)始三種樣品中細(xì)胞數(shù)量相差不大均出現(xiàn)平臺(tái)期HE染色發(fā)現(xiàn)成骨細(xì)胞在培養(yǎng)初期沿著支架材料內(nèi)部空隙貼壁生長(zhǎng)隨著培養(yǎng)天數(shù)的增加貼壁細(xì)胞呈集落樣生長(zhǎng)可明顯看到細(xì)胞間連接4利用生物反應(yīng)器動(dòng)態(tài)培養(yǎng)細(xì)胞支架復(fù)合物選擇灌流流速為10MLMIN顯著促進(jìn)MC3T3E1細(xì)胞增殖支架接種細(xì)胞并且動(dòng)態(tài)培養(yǎng)5D后細(xì)胞黏附于支架壁呈梭形和不規(guī)則形狀伸出偽足分泌少量的絨毛和ECMCOLI、OPN和OCN的免疫組化染色均為陽(yáng)性WESTERNBLOT分析結(jié)果動(dòng)態(tài)培養(yǎng)7D時(shí)COLI的表達(dá)量顯著上調(diào)OPN的表達(dá)顯著下降OCN在體外培養(yǎng)12D后表達(dá)量沒(méi)有發(fā)生改變5高濃度ΑZAL抑制三維動(dòng)態(tài)培養(yǎng)成骨細(xì)胞增殖并促進(jìn)ALP活性的增加。通過(guò)上調(diào)OPG蛋白表達(dá)下調(diào)RANKL蛋白表達(dá)而增加OPGRANKL比值。結(jié)論1ΑZAL為新近發(fā)現(xiàn)一類(lèi)植物雌激素對(duì)成骨細(xì)胞活性的影響尚未見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道。研究發(fā)現(xiàn)ΑZAL可抑制成骨細(xì)胞的增殖、促進(jìn)分化并可通過(guò)上調(diào)OPGRANKLMRNA表達(dá)比值抑制破骨細(xì)胞的活化有望成為OP的治療藥物2拉伸應(yīng)變可有效促進(jìn)成骨分化且具有強(qiáng)度依賴性當(dāng)與化學(xué)信號(hào)耦合能進(jìn)一步上調(diào)成骨細(xì)胞分化能力但低強(qiáng)度拉伸應(yīng)變耦合ΑZAL通過(guò)上調(diào)OPGRANKL比值更有利于抑制破骨細(xì)胞活化調(diào)節(jié)骨重建3透明質(zhì)酸改性殼聚糖膠原納米羥基磷灰石復(fù)合材料作為一種新型有機(jī)無(wú)機(jī)復(fù)合支架材料有利于促進(jìn)成骨細(xì)胞黏附、增殖同時(shí)也可為三維藥物篩選提供良好平臺(tái)4生物反應(yīng)器的研發(fā)與應(yīng)用成為三維培養(yǎng)不可缺少的技術(shù)平臺(tái)。應(yīng)用自主研發(fā)的循環(huán)灌流和動(dòng)態(tài)壓載反應(yīng)器可實(shí)現(xiàn)組織工程骨的體外培養(yǎng)。研究發(fā)現(xiàn)流速10MLMIN聯(lián)合3500ΜΕ壓應(yīng)變的參數(shù)條件較適合細(xì)胞支架復(fù)合物的動(dòng)態(tài)培養(yǎng)。OB在HACSCOLNHAP復(fù)合支架上動(dòng)態(tài)培養(yǎng)可上調(diào)或維持其成骨功能5骨組織工程化培養(yǎng)模型下ΑZAL可作為新型成骨促進(jìn)因子有利于OB分化通過(guò)提高OPGRANKL比值抑制骨吸收從而促進(jìn)成骨。6二維培養(yǎng)和三維培養(yǎng)模式下OB對(duì)不同性質(zhì)信號(hào)表現(xiàn)出不同的生物學(xué)響應(yīng)。骨組織工程化模型作為體外構(gòu)建與體內(nèi)相似的培育環(huán)境的技術(shù)平臺(tái)提供更加符合OB生存的物理環(huán)境更真實(shí)的勾勒OB對(duì)藥物與力學(xué)載荷耦合信號(hào)的響應(yīng)機(jī)制。

簡(jiǎn)介：目的檢測(cè)淀粉樣前體蛋白APP在骨肉瘤和骨軟骨瘤中的表達(dá)水平及其與臨床病理特征之間的關(guān)系。材料與方法收集中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院病理科2006年6月2010年6月未接受化療和放療骨肉瘤活檢標(biāo)本40例作為實(shí)驗(yàn)組，根據(jù)ENNEKING外科分期分為ⅡA期骨肉瘤20例，ⅡB期骨肉瘤20例。相仿年齡、性別、部位骨軟骨瘤手術(shù)切除標(biāo)本40例作為陰性對(duì)照組。標(biāo)本組織經(jīng)10％中性福爾馬林固定，石蠟包埋，連續(xù)切片，最后應(yīng)用免疫組織化學(xué)技術(shù)，檢測(cè)骨肉瘤和骨軟骨瘤病理切片中APP的表達(dá)水平，PBS代替一抗作為陰性對(duì)照。分析APP的表達(dá)水平與骨肉瘤臨床病理特征之間的關(guān)系，所有資料采用SPSS170軟件處理，以Α005作為檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果1骨肉瘤組織中APP的表達(dá)呈強(qiáng)陽(yáng)性，其平均累積光密度值是0154003791骨軟骨瘤組織中APP的表達(dá)呈弱陽(yáng)性，其平均累積光密度值是0091580248兩者之間的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P＜005）。2APP在骨肉瘤組織中的表達(dá)水平與患者年齡、性別、病理分型和病理分級(jí)無(wú)明顯相關(guān)性P＞005），與ENNEKING外科分期ⅡA期、ⅡB期有明顯相關(guān)性P＜005）。結(jié)論1APP在骨肉瘤組織中呈高水平表達(dá)，在骨軟骨瘤組織中低水平表達(dá)。2APP在骨肉瘤組織中的表達(dá)水平與骨肉瘤ENNEKING外科分期有明顯相關(guān)性。

簡(jiǎn)介：目的采用免疫組化法測(cè)定兔KOA關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞中MMP1、TIMP1表達(dá)的影響，探討自擬新方康健關(guān)節(jié)葆對(duì)關(guān)節(jié)軟骨修復(fù)和保護(hù)的可能機(jī)制，并闡明該藥在改善關(guān)節(jié)功能和保護(hù)關(guān)節(jié)軟骨等方面的作用，為臨床治療KOA提供實(shí)驗(yàn)及其理論依據(jù)。方法1分組、造模成年健康新西蘭大白兔50只，雌、雄各半，按體重從輕到重進(jìn)行編號(hào)，并隨機(jī)分成5組。A空白組，B模型組，C氨基葡萄糖組（西藥對(duì)照組），D壯骨關(guān)節(jié)丸組（中藥對(duì)照組）、E康健關(guān)節(jié)葆組（實(shí)驗(yàn)組），每組10只。所有實(shí)驗(yàn)的新西蘭大白兔在同等條件下飼養(yǎng)一周，無(wú)其它不適后，進(jìn)行造模，除空白組外，余組用4木瓜蛋白酶01ML右膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射，4周后建立兔右膝骨關(guān)節(jié)炎模型，是目前常用的造模方式。2給藥方法在常規(guī)喂養(yǎng)一周后，開(kāi)始造模、給藥，A組（空白組）不造模，生理鹽水20ML，二次日，10ML次，灌服。B組（模型組）只造模，生理鹽水20ML，二次日，10ML次，灌服。C組（氨基葡萄糖組）氨基葡萄糖液20ML（006GML）日，二次日，10ML次，灌服。D組（壯骨關(guān)節(jié)丸組）壯骨關(guān)節(jié)丸水溶液20ML（007GML）日，二次日，10ML次，灌服。E組（康健關(guān)節(jié)葆組）康健關(guān)節(jié)葆水溶液20ML（007GML）日，二次日，10ML次，灌服。3取材及檢測(cè)在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物造模4周結(jié)束后，分別取各組兔膝關(guān)節(jié)軟骨，行大體肉眼觀察、HE染色觀察及免疫組化法測(cè)定MMP1、TIMP－1的含量變化，行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果1從實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的解剖后，肉眼大體觀察顯示，模型組兔膝關(guān)節(jié)軟骨具有明顯的退行性改變，符合造模的要求，康健關(guān)節(jié)葆能很好的緩解關(guān)節(jié)軟骨破壞，且比其它對(duì)照組效果顯著。2HE染色后光學(xué)顯微鏡觀察及兔關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞MMP1、TIMP1免疫組化顯示康健關(guān)節(jié)葆組的MMP1表達(dá)較模型組明顯降低，P結(jié)論康健關(guān)節(jié)葆能顯著降低OA模型兔關(guān)節(jié)軟骨中MMP1含量，且對(duì)TIMP1據(jù)有升高作用，以減慢及延緩?fù)孟リP(guān)節(jié)炎中軟骨的破壞或降解，能起到改善關(guān)節(jié)功能的作用。這可能是該藥修復(fù)受損軟骨和保護(hù)未受損的軟骨機(jī)制之一。為康健關(guān)節(jié)葆在臨床治療OA提供了理論依據(jù)。

簡(jiǎn)介：本文對(duì)轉(zhuǎn)人胰島素樣生長(zhǎng)因子1基因成肌細(xì)胞促進(jìn)骨骼肌損傷后愈合進(jìn)行了研究。文章設(shè)計(jì)了以骨骼肌成肌細(xì)胞為載體，轉(zhuǎn)染HIGFⅠ基因，然后將轉(zhuǎn)基因成肌細(xì)胞輸注損傷局部，觀察其促進(jìn)損傷肌肉愈合質(zhì)量的實(shí)驗(yàn)方案。研究表明，急性骨骼肌鈍挫傷修復(fù)過(guò)程中，轉(zhuǎn)基因成肌細(xì)胞注射組能提高損傷后MHCⅡB蛋白表達(dá)量，促進(jìn)肌纖維的增生，加速骨骼肌愈合進(jìn)程；急性骨骼肌鈍挫傷修復(fù)后期，局部注射轉(zhuǎn)HIGFⅠ基因的成肌細(xì)胞使得愈合過(guò)程中VIMENTIN表達(dá)量少于另外兩組，一定程度上減輕了損傷后骨骼肌的纖維化程度，提高了愈合質(zhì)量；損傷局部注射轉(zhuǎn)基因成肌細(xì)胞，能抑制肌細(xì)胞器的腫脹、變性，提高肌細(xì)胞存活能力，加速肌纖維的融合。

簡(jiǎn)介：目的觀察壯藥骨痹方燙療對(duì)不同X線級(jí)別膝OA的臨床療效，探討壯藥骨痹方治療膝OA的可能的作用機(jī)制。方法選擇符合納入標(biāo)準(zhǔn)的膝骨關(guān)節(jié)炎患者共60例，依據(jù)X線片有否關(guān)節(jié)間隙改變分為兩組關(guān)節(jié)間隙無(wú)改變組（A組）關(guān)節(jié)間隙狹窄組B組，每組各30例。兩組均采用壯藥骨痹方對(duì)膝關(guān)節(jié)周?chē)M(jìn)行燙療治療，每天治療1次，每次30分鐘左右，7天為一個(gè)療程，連續(xù)治療兩個(gè)療程。療程結(jié)束時(shí)，進(jìn)行治療前與治療后兩組的疼痛、腫脹、關(guān)節(jié)功能、日?；顒?dòng)情況及最大步行距離等指數(shù)積分的自身比較和組間比較，并依據(jù)療效標(biāo)準(zhǔn)，評(píng)定治療效果。結(jié)果關(guān)節(jié)間隙無(wú)改變組（A組）30例，臨床控制6例，顯效16例，有效6例，無(wú)效2例，總有效率9333％，控顯率7333％關(guān)節(jié)間隙狹窄組（B組）30例，臨床控制1例，顯效8例，有效14例，無(wú)效7例，總有效率7667％，控顯率30％。兩組相比，關(guān)節(jié)間隙無(wú)改變組（A組）總有效率優(yōu)于關(guān)節(jié)間隙狹窄組（B組），（P＜005）控顯率明顯高于關(guān)節(jié)間隙狹窄組（P＜001），有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。說(shuō)明壯藥骨痹方燙療在治療不同X線級(jí)別的膝骨關(guān)節(jié)炎患者時(shí)，對(duì)關(guān)節(jié)間隙無(wú)改變組（A組）在改善疼痛、腫脹、關(guān)節(jié)功能等癥狀方面，療效優(yōu)于關(guān)節(jié)間隙狹窄組（B組）。結(jié)論壯藥骨痹方燙療治療對(duì)不同級(jí)別X線改變的膝骨關(guān)節(jié)炎患者均具有良好的止痛、消腫和改善關(guān)節(jié)功能等作用，尤其適用于無(wú)關(guān)節(jié)間隙改變者，是一種治療膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)病無(wú)關(guān)節(jié)間隙改變時(shí)的療效較好，操作簡(jiǎn)便，副作用少，且易于推廣的治療方法。

簡(jiǎn)介：目的骨骼肌損傷愈合是一個(gè)典型的炎癥修復(fù)過(guò)程。可人為地分成三個(gè)階段炎癥階段、增殖階段、再塑階段。這些階段在一定程度上相互重疊沒(méi)有明確的時(shí)間界限。炎癥細(xì)胞的激活如中性粒細(xì)胞的募集巨噬細(xì)胞的聚集及成纖維細(xì)胞的激活是一個(gè)錯(cuò)綜復(fù)雜且相互交流的事件。最近研究顯示外周血來(lái)源的纖維細(xì)胞CIRCULATINGFIBROCYTESCFCS也可以浸潤(rùn)到傷口局部通過(guò)轉(zhuǎn)化為肌成纖維細(xì)胞MYOFIBROBLASTSMYFBS參與了骨骼肌損傷愈合。CFCS是骨髓來(lái)源的間充質(zhì)前體細(xì)胞共表達(dá)造血干細(xì)胞抗原和成纖維細(xì)胞產(chǎn)物諸如CD45和Ⅰ型前體膠原PROCOLLAGENⅠPCOLⅠ被定義為一類(lèi)具有成纖維細(xì)胞特性的特殊白細(xì)胞亞群。在皮膚損傷愈合期間CFCS可以占浸潤(rùn)細(xì)胞的10％左右并推測(cè)CFCS在損傷愈合和組織修復(fù)進(jìn)程中發(fā)揮至關(guān)重要的作用。除了轉(zhuǎn)化為MYFBS外CFCS還可以通過(guò)其他可能的機(jī)制參與到損傷愈合諸如抗原呈遞產(chǎn)生重要的細(xì)胞因子、趨化因子和生長(zhǎng)因子分泌細(xì)胞外基質(zhì)EXTRACELLULARMATRIXECM促進(jìn)血管發(fā)生。到目前為止尚未發(fā)現(xiàn)有關(guān)CFCS在骨骼肌挫傷愈合過(guò)程中的研究。本研究首次研究大鼠骨骼肌挫傷愈合過(guò)程中不同損傷時(shí)間段CFCS的分布情況探討CFCS在骨骼肌損傷愈合過(guò)程中的作用及其在損傷時(shí)間推斷上應(yīng)用的可能性。材料與方法健康成年的雄性SPRAGUEDAWLEYSD大鼠50只體質(zhì)量220～250G隨機(jī)分為10組每組5只。其中9組為實(shí)驗(yàn)組1組為對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)組大鼠用2％戊巴比妥鈉30MGKG腹腔注射麻醉后后肢剪毛備皮。將大鼠后肢置于伸膝、踝背屈90°位置利用自制機(jī)械性打擊器使500G擊錘以3MS的速度一次性打擊大鼠右后肢距跟骨上2CM處傷后肌肉仍保持完整脛腓骨無(wú)骨折不給予任何處理。挫傷后每只大鼠分籠飼養(yǎng)并給予消毒飼料及自來(lái)水飼養(yǎng)保持墊料清潔及空氣通暢。于損傷后3H、6H、12H、1D、3D、5D、7D、10D和14D將大鼠乙醚麻醉后脫頸椎致死取右下肢骨骼肌。對(duì)照組大鼠后肢剪毛備皮后不致傷取相同部位同等大小腓腸肌以備HE染色、MASSON染色和免疫熒光染色應(yīng)用。應(yīng)用免疫熒光染色方法檢測(cè)50例大鼠腓腸肌挫傷后各時(shí)間段CFCS的變化情況以非挫傷組大鼠腓腸肌作對(duì)照共聚焦顯微鏡X600倍下在挫傷區(qū)隨機(jī)選取10個(gè)視野計(jì)數(shù)CFCS的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)及陽(yáng)性細(xì)胞率。用SPSS130FWINDOWS進(jìn)行單因素方差分析以P＜005為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。實(shí)驗(yàn)結(jié)果對(duì)照組大鼠骨骼肌中未見(jiàn)雙重染色陽(yáng)性CD45PCOLⅠ的CFCS分布。損傷組大鼠骨骼肌挫傷后6H～1D僅見(jiàn)少數(shù)CD45陽(yáng)性的單個(gè)核細(xì)胞而沒(méi)有CD45PCOLⅠ的染色傷后3D開(kāi)始有少量CFCS聚集于損傷區(qū)傷后5DCFCS的數(shù)量明顯增加傷后7DCFCS的數(shù)量達(dá)高峰此后數(shù)量逐漸減少同時(shí)還發(fā)現(xiàn)相對(duì)于3D組CFCS的細(xì)胞體積逐漸變大細(xì)胞胞質(zhì)逐漸豐富呈梭形傷后14DCFCS胞質(zhì)中的CD45和PCOLⅠ的表達(dá)強(qiáng)度都分別減弱。結(jié)論1、正常大鼠骨骼肌組織中無(wú)外周血來(lái)源的纖維細(xì)胞2、在骨骼肌挫傷后一定時(shí)間內(nèi)可見(jiàn)外周血來(lái)源的纖維細(xì)胞其數(shù)量變化呈一定的規(guī)律性可用于骨骼肌損傷時(shí)間的推斷。而且可以推測(cè)出外周血來(lái)源的纖維細(xì)胞對(duì)骨骼肌的纖維性修復(fù)具有促進(jìn)作用。

簡(jiǎn)介：目的體外分離、培養(yǎng)、鑒定骨骺干細(xì)胞并誘導(dǎo)其永生化，建立高水平誘導(dǎo)、低背景表達(dá)的骨骺干細(xì)胞株，研究甲狀旁腺相關(guān)蛋白亞基因PTHRP136、PTHRP3894和PTHRP107139對(duì)體外培養(yǎng)的骨骺干細(xì)胞的調(diào)控作用以及PTHRP107139與其他調(diào)控因子的相互影響。方法采用顯微取材和免疫磁性分選技術(shù)分離純化具有成纖維生長(zhǎng)因子受體3（FIBROBLASTGROWTHFACTRECEPT3，F(xiàn)GFR3）特異性表面標(biāo)志的骨骺干細(xì)胞。利用電穿孔轉(zhuǎn)染技術(shù)將含有猿腎病毒40大T抗原基因（SV40TAG）的質(zhì)粒PCMVSV40TPUR轉(zhuǎn)染骨骺干細(xì)胞，經(jīng)嘌呤霉素篩選，抗性克隆擴(kuò)大培養(yǎng)獲得永生化骨骺干細(xì)胞。提取骨骺干細(xì)胞的總RNA，以RTPCR方法獲得帶有酶切位點(diǎn)的PTHRP136、PTHRP3894和PTHRP107139基因片段，擴(kuò)增的DNA片段分別與載體PTRE2HYG雙酶切后連接，轉(zhuǎn)化擴(kuò)增后對(duì)重組質(zhì)粒進(jìn)行提取和酶切、測(cè)序鑒定。用脂質(zhì)體介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)染技術(shù)將PTETON質(zhì)粒轉(zhuǎn)染于骨骺干細(xì)胞，G418篩選得到穩(wěn)定克隆，再瞬時(shí)轉(zhuǎn)染PTRE2HYGLUC質(zhì)粒并篩選出高水平誘導(dǎo)、低背景表達(dá)的PTETON骨骺干細(xì)胞系。用脂質(zhì)體介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)染技術(shù)將將質(zhì)粒PTREPTHRP136、PTREPTHRP3894和PTREPTHRP107139分別轉(zhuǎn)染高水平誘導(dǎo)、低背景表達(dá)的PTETON骨骺干細(xì)胞株，放入誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，加入強(qiáng)力霉素進(jìn)行誘導(dǎo)，以RTPCR的方法檢測(cè)PCNA基因的表達(dá)變化。應(yīng)用RTPCR的方法檢測(cè)不同濃度的強(qiáng)力霉素下質(zhì)粒PTREPTHRP107139轉(zhuǎn)染組的COLⅡ、COLⅩ、IHH、PTC、SOX9、BMP6基因的表達(dá)變化。結(jié)果經(jīng)免疫細(xì)胞化學(xué)證實(shí)所取材分離并純化的細(xì)胞為骨骺干細(xì)胞。SV40TAG穩(wěn)定轉(zhuǎn)染入骨骺干細(xì)胞經(jīng)擴(kuò)大培養(yǎng)，命名為永生化骨骺干細(xì)胞。從骨骺干細(xì)胞中克隆出的PTHRP亞克隆基因PTHRP136、PTHRP3894和PTHRP107139經(jīng)酶切圖譜分析和DNA序列測(cè)定證實(shí)已經(jīng)插入重組質(zhì)粒PTREPTHRP136、PTREPTHRP3894和PTREPTHRP107139。PTETON質(zhì)粒轉(zhuǎn)染于骨骺干細(xì)胞，并瞬時(shí)轉(zhuǎn)染PTRE2HYGLUC質(zhì)粒獲得1株誘導(dǎo)后熒光素酶的表達(dá)活性增加50倍的PTETON骨骺干細(xì)胞株。強(qiáng)力霉素誘導(dǎo)的質(zhì)粒PTREPTHRP107139轉(zhuǎn)染組的PCNA表達(dá)明顯高于質(zhì)粒PTREPTHRP136轉(zhuǎn)染組和質(zhì)粒PTREPTHRP3894轉(zhuǎn)染組；在強(qiáng)力霉素誘導(dǎo)的質(zhì)粒PTREPTHRP107139轉(zhuǎn)染組中COLⅡ、SOX9表達(dá)明顯增強(qiáng)，IHH表達(dá)未見(jiàn)明顯變化，而PTC、COLⅩ、BMP6表達(dá)明顯降低。而且其表達(dá)量與強(qiáng)力霉素存在劑量依賴性。結(jié)論運(yùn)用顯微取材和免疫純化技術(shù)可以成功分離純化骨骺干細(xì)胞。經(jīng)SV40TAG轉(zhuǎn)染構(gòu)建了永生化的骨骺干細(xì)胞株。成功克隆出PTHRP亞克隆基因PTHRP136、PTHRP3894和PTHRP107139并構(gòu)建了反應(yīng)質(zhì)粒PTREPTHRP136、PTREPTHRP3894和PTREPTHRP107139。篩選得到的PTETON骨骺干細(xì)胞株受強(qiáng)力霉素誘導(dǎo)后能夠低背景、高水平表達(dá)。PTHRP107139可能是通過(guò)調(diào)控SOX9、PTC、BMP6的表達(dá)來(lái)促進(jìn)骨骺干細(xì)胞增殖并抑制其分化的，而PTHRP136、PTHRP3894對(duì)PCSCS的增殖并無(wú)明顯作用。PTETON質(zhì)粒系統(tǒng)在PCSCS能有效的調(diào)控外來(lái)基因的表達(dá)。

簡(jiǎn)介：非肌層浸潤(rùn)性膀胱癌治療非肌層浸潤(rùn)性膀胱癌治療現(xiàn)狀及展望現(xiàn)狀及展望NONMUSCLEINVASIVEBLADDERCANCERTREATMENTSTATUSPROSPECT論文類(lèi)別論文類(lèi)別專(zhuān)業(yè)學(xué)位型專(zhuān)業(yè)學(xué)位型作者姓名武玉猛武玉猛指導(dǎo)教師姓名指導(dǎo)教師姓名李慶文李慶文申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士學(xué)位授予單位學(xué)位授予單位蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)科專(zhuān)業(yè)外科學(xué)研究方向泌尿系統(tǒng)腫瘤泌尿系統(tǒng)腫瘤論文答辯時(shí)間論文答辯時(shí)間2012年5月學(xué)位授予日期學(xué)位授予日期2012年6月答辯委員會(huì)主席答辯委員會(huì)主席論文評(píng)閱人人分類(lèi)號(hào)R694密級(jí)學(xué)校代碼10367UDC6166編號(hào)學(xué)號(hào)20097031151學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明本人所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下獨(dú)立進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究工作所取得的成果，本論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或已經(jīng)獲取得的研究成果。在本論文撰寫(xiě)中所引用其他研究者的研究?jī)?nèi)容和成果時(shí)已在論文中給予特別標(biāo)注和明確說(shuō)明。對(duì)本論文的實(shí)驗(yàn)研究以及論文撰寫(xiě)過(guò)程中給予幫助和建議等貢獻(xiàn)的其他人士，也已作了致謝說(shuō)明。本人完全理解本聲明的法律責(zé)任，以及所涉及的結(jié)果將由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名日期年月日關(guān)于學(xué)位論文著作權(quán)的共享聲明根據(jù)中華人民共和國(guó)著作權(quán)法和高等院校知識(shí)產(chǎn)權(quán)管理?xiàng)l例，本學(xué)位論文，題目，是研究生在導(dǎo)師指導(dǎo)下完成的職務(wù)作品，得到蚌埠醫(yī)學(xué)院相關(guān)部門(mén)科室的物質(zhì)技術(shù)和經(jīng)費(fèi)支持，因此，本學(xué)位論文的著作權(quán)由研究生，導(dǎo)師和蚌埠醫(yī)學(xué)院三方共同享有，均享有署名權(quán)和使用權(quán)等權(quán)益；本學(xué)位論文成果歸屬蚌埠醫(yī)學(xué)院。根據(jù)國(guó)家學(xué)位授予條例，學(xué)校對(duì)本學(xué)位論文有使用權(quán)，包括保存本學(xué)位論文；因教學(xué)和科研的目的，保留在圖書(shū)館被查閱或借閱；學(xué)?？筛鶕?jù)國(guó)家規(guī)定將本學(xué)位論文送交國(guó)家有部門(mén)保留和使用。學(xué)校在公布本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容時(shí)，應(yīng)保障研究生和導(dǎo)師的署名權(quán)等權(quán)益。研究生和導(dǎo)師在公開(kāi)發(fā)表本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容時(shí)必須保障學(xué)校的署名權(quán)等權(quán)益，即在發(fā)表論文時(shí)蚌埠醫(yī)學(xué)院及相關(guān)部門(mén)科室應(yīng)署名為作者單位。