簡介：分類號R782密級公開單位代碼10422學(xué)號200913712只番UNIVERSITY博士學(xué)位論文DISSERTATIONFORDOCTORALDEGREE論文題目PHF8在細(xì)胞成骨分化及骨修復(fù)過程中的作用研究EPIGENETICREGULATIONOFOSTEOGCNICDIFFERENTIATIONANDBONEREGENERATIONBYPHF8作者姓名培養(yǎng)單位專業(yè)名稱指導(dǎo)教師韓倩倩口腔醫(yī)學(xué)院口腔臨床醫(yī)學(xué)楊丕山教授合作導(dǎo)師DAKECHEN教授2014年4月17日鄉(xiāng)冪姍H戶N，，A夕∥姒山東人學(xué)博士學(xué)位論文目錄中文摘要1英文摘要6符號說明11前言12參考文獻(xiàn)15第一部分PHF8組織與細(xì)胞內(nèi)定位及在BMSCS成骨分化中的改變18材料與方法19結(jié)果27討論29參考文獻(xiàn)31第二部分PHF8對小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞及前成骨細(xì)胞MC3T3一E1成骨分化的影響及作用機制35材料與方法37結(jié)果48討論54參考文獻(xiàn)56第三部分絲蛋白支架復(fù)合PHF8修飾的BMSCS對小鼠顱骨極量骨缺損修復(fù)的作用60材料與方法62結(jié)果65討論71參考文獻(xiàn)73全文結(jié)論77致謝78攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄79

簡介：國際十進(jìn)分類號（UDC）第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)位論文CD147、PCNA、VEGF和MMPS在骨巨細(xì)胞瘤中的表達(dá)及臨床意義韓躍虎指導(dǎo)教師姓名羅卓荊教授（主任醫(yī)師）指導(dǎo)教師單位第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院骨科申請學(xué)位級別碩士專業(yè)名稱外科學(xué)（骨科學(xué)）論文提交日期201204答辯日期201205論文起止時間2010年09月至2012年03月學(xué)位授予單位第四軍醫(yī)大學(xué)3CD147CD147CD147CD147、、、、PCNAPCNAPCNAPCNA、、、、VEGFVEGFVEGFVEGF和和和和MMPSMMPSMMPSMMPS在在在在骨巨細(xì)胞瘤中的表達(dá)及臨床意義骨巨細(xì)胞瘤中的表達(dá)及臨床意義骨巨細(xì)胞瘤中的表達(dá)及臨床意義骨巨細(xì)胞瘤中的表達(dá)及臨床意義研究生韓躍虎學(xué)科專業(yè)外科學(xué)（骨科學(xué)）所在單位第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院導(dǎo)師羅卓荊教授（主任醫(yī)師）輔導(dǎo)教師楊柳（講師）黃景輝（主治醫(yī)師）資助基金項目資助基金項目國家重點基礎(chǔ)研究發(fā)展計劃973計劃，2009CB521700關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞骨巨細(xì)胞瘤；細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子；基質(zhì)金屬蛋白酶；血管內(nèi)皮生長因子；免疫組織化學(xué)中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)二O一二年四月

簡介：目的觀察克炎健骨丸對強直性脊柱炎AS的臨床治療效果。方法選擇診斷明確的強直性脊柱炎患者88例，隨機分為中藥組44例和中西醫(yī)結(jié)合組44例，中藥組予以克炎健骨丸治療，中西醫(yī)結(jié)合組予以克炎健骨丸聯(lián)合甲氨喋呤（MTX）治療，連續(xù)用藥3個月以上，選取治療前、治療1個月、治療3個月作為評價時點，分別觀察其治療前后臨床癥狀、體征的改善情況及兩組實驗室指標(biāo)ESR、CRP的變化。結(jié)果中藥組和中西醫(yī)結(jié)合組總有效率分別為8181％和8333％，兩組比較差異差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞005），但治療第1個月，中藥組和中西醫(yī)結(jié)合組的總有效率分別為1818％和3056％，兩組比較差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義P＜001；兩組患者BATH病情活動指數(shù)、BATH功能指數(shù)、疼痛、晨僵等臨床癥狀均有明顯改善，SCHOBER試驗、胸廓活動度、ESR、CRP亦有改善；克炎健骨丸治療AS療效具有明顯的時效性，隨著治療時間延長，療效逐漸增強P＜005或P＜001；中西醫(yī)結(jié)合組起效時間早于中藥組。結(jié)論克炎健骨丸對AS患者具有療效穩(wěn)定、安全、服用方便等優(yōu)點，值得臨床進(jìn)一步推廣。

簡介：目的觀察交鎖髓內(nèi)針和加壓鋼板固定治療無菌性股骨干骨折內(nèi)固定失效伴骨不連的療效，并進(jìn)行臨床對比研究。方法回顧性分析2003年1月～2008年6月入院的無菌性股骨干骨折內(nèi)固定失效伴骨不連的患者40例，23例采用交鎖髓內(nèi)針固定其中10例進(jìn)行了髂骨移植，17例采用加壓鋼板固定均輔以自體髂骨移植治療，術(shù)后定期拍片并隨訪患肢功能恢復(fù)情況。結(jié)果交鎖髓內(nèi)針組的平均骨折愈合時間顯著短于加壓鋼板組P＜005，且術(shù)后遠(yuǎn)期療效膝關(guān)節(jié)功能交鎖隨內(nèi)針組的優(yōu)良率高于加壓鋼板組并有顯著性差異P＜005。結(jié)論交鎖髓內(nèi)針是治療無菌性股骨干骨折內(nèi)固定失效伴骨不連的有效方式，優(yōu)于加壓鋼板。交鎖髓內(nèi)針可作為治療無菌性股骨干骨折內(nèi)固定失效伴骨不連的首選方法。

簡介：中國人物畫在二十世紀(jì)的一百年經(jīng)歷了一個巨大的變革中國社會歷經(jīng)的動蕩和變革、民主與科學(xué)的廣泛傳播、各種東西方思想潮流的風(fēng)起云涌對中國傳統(tǒng)寫意人物畫產(chǎn)生了巨大影響人物畫的創(chuàng)作理念和表現(xiàn)方法上的發(fā)展與創(chuàng)新超過了歷史上的任何一個時期用沒骨寫意的方式表現(xiàn)中國畫中的人物特征成為當(dāng)今中國畫重要的創(chuàng)作表現(xiàn)形式之一。從中國畫的歷史發(fā)展來看沒骨畫法偏重于山水畫和花鳥畫相比而言沒骨人物畫的發(fā)展形式單一、進(jìn)程緩慢。當(dāng)代沒骨人物畫在借鑒和吸收西方人體繪畫藝術(shù)的特點并結(jié)合中華民間傳統(tǒng)藝術(shù)的特點在構(gòu)圖、技法、工具材料、審美觀念等方面都有了很大的轉(zhuǎn)變。從而更加豐富了現(xiàn)代人物畫的表現(xiàn)力題材內(nèi)容方面也更貼近生活具有較強的現(xiàn)實意義和時代感為當(dāng)今的寫意人物畫增添了藝術(shù)感染力。本文通過沒骨人物畫發(fā)展歷程的整理和沒骨畫的概念界定對沒骨人物畫的發(fā)展、傳統(tǒng)沒骨畫及中國畫沒骨人物畫的特點進(jìn)行分析結(jié)合現(xiàn)代美學(xué)和審美思想理念對當(dāng)代中國畫沒骨人物畫及代表畫家作品的藝術(shù)表現(xiàn)進(jìn)行分析結(jié)合自身創(chuàng)作實踐就其繪畫材料、筆墨語言、創(chuàng)作內(nèi)容及情感表現(xiàn)進(jìn)行總結(jié)以尋求表現(xiàn)形式和創(chuàng)作內(nèi)容的創(chuàng)新以期對沒骨人物畫的創(chuàng)作有一定的指導(dǎo)意義。

簡介：點擊查看更多祛毒生肌收斂法在肛瘺術(shù)后創(chuàng)面促愈及腫痛防治方面的臨床研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：目的改良HULTH法制作大鼠膝骨關(guān)節(jié)炎模型，評價造模的有效性；在有效的模型中，分析關(guān)節(jié)軟骨和滑膜基質(zhì)金屬蛋白酶的變化特點；研究降鈣素CALCITONIN，CT對膝關(guān)節(jié)軟骨、滑膜及軟骨下骨改變的影響，探討CT對關(guān)節(jié)軟骨的保護作用，以及對軟骨下骨骨吸收的抑制作用。方法105只SD大鼠隨機分為對照組ACLTMMX、降鈣素CT干預(yù)組和假手術(shù)組SHAM，每組各35只。1改良HULTH法行骨關(guān)節(jié)炎OA造模，對照組ACLTMMX前交叉韌帶橫斷和內(nèi)側(cè)半月板切除；SHAM組打開關(guān)節(jié)腔，不切斷交叉韌帶和切除半月板；CT組造模術(shù)后第二天始行降鈣素15IUKG隔日皮下注射，對照組和SHAM組注射等量的生理鹽水。在造模1W、2W、4W、6W、8W、12W處死大鼠。膝關(guān)節(jié)標(biāo)本肉眼大體觀察，取股骨內(nèi)側(cè)髁軟骨，脛骨內(nèi)側(cè)平臺軟骨下骨及關(guān)節(jié)內(nèi)滑膜作為組織標(biāo)本，HE染色、甲苯胺藍(lán)染色、MASSON染色。以MANKIN評分為標(biāo)準(zhǔn)，增加MASSON染色的結(jié)果評分，對OA的病程進(jìn)行分期。2取軟骨和滑膜標(biāo)本，軟骨標(biāo)本來自股骨內(nèi)側(cè)髁。各個時間點的標(biāo)本經(jīng)處理后，液氮保存，酶聯(lián)免疫吸附法ELISA檢測SOX9、Ⅱ型膠原、MMP1、3、13的蛋白含量，實時熒光定量PCRREALTIMEPCR檢測SOX9、Ⅱ型膠原、MMP1、3、13基因表達(dá)的變化，分析OA基質(zhì)金屬蛋白酶的變化特點及降鈣素干預(yù)對骨關(guān)節(jié)炎軟骨的保護作用。3取各期脛骨內(nèi)側(cè)平臺標(biāo)本，研磨后提取RNA，實時熒光定量PCRREALTIMEPCR檢測RANK和組織蛋白酶KCK表達(dá)量的變化，分析降鈣素對OA早期軟骨下骨骨吸收的影響。同時通過HE染色切片計數(shù)軟骨下骨骨小梁的體積、數(shù)目、分離度，比較OA造模后2W和12W時骨小梁的差異。結(jié)果1大體及組織觀察對照組造模2W關(guān)節(jié)軟骨失去光澤，色暗，HE染色軟骨細(xì)胞數(shù)量輕度增生；4W見軟骨破壞，細(xì)胞數(shù)量增多，MASSON染色紅染，少許藍(lán)色出現(xiàn)；6W軟骨潰瘍破壞明顯，骨贅增生，細(xì)胞排列紊亂，MASSON染色紅藍(lán)相間；8W軟骨缺損，骨贅增生明顯，有軟骨細(xì)胞壞死；12W可見軟骨下骨外露，細(xì)胞數(shù)量明顯減少。CT組病理改變時期延后2W。SHAM組大體和組織切片接近正常。2ELISA測定和REALTIMEPCR對照組和SHAM組比較軟骨MMP1顯著上調(diào)P＜0OL，組內(nèi)變化呈下調(diào)趨勢P＜001MMP3顯著上調(diào)P＜001，組內(nèi)變化呈上調(diào)趨勢P＜005MMP13顯著上調(diào)P＜001，病程進(jìn)展呈上調(diào)趨勢P＜001。滑膜中MMP1、3、13表達(dá)高于SHAM組，呈上升趨勢P＜001。CT組與對照組比較SOX9的表達(dá)上調(diào)，變化有差異P＜005；Ⅱ型膠原在OA造模前4W，表達(dá)下調(diào)，6W起上調(diào)表達(dá)，變化有顯著差異P＜001MMP1、13的表達(dá)顯著下調(diào)P＜001MMP3在OA早期2W是上調(diào)表現(xiàn)P＜001中晚期是下調(diào)P＜001；CK的表達(dá)下調(diào)P＜001RANK的表達(dá)在OA早期是下調(diào)P＜001。3骨組織計量學(xué)參數(shù)變化對照組和SHAM組比較2W時，骨小梁的體積和骨小梁數(shù)目顯著小于SHAM組，骨小梁分離度大于SHAM組P＜001，軟骨下骨體積和數(shù)目減少，間距增加。12W時骨小梁體積、骨小梁數(shù)目均高于SHAM組，骨小梁分離度小于SHAM組P＜001。CT組與對照組比較2W時，骨小梁的體積和骨小梁數(shù)目均高于對照組，骨小梁分離度小于對照組P＜O0112W時沒有顯著差異P＞005。SHAM和SHAMCT組沒有差異P＞005。結(jié)論1改良HULTH法制作大鼠OA模型，即橫斷前交叉韌帶及內(nèi)側(cè)半月板，是一種較為實用有效的膝關(guān)節(jié)OA模型制作方法。MANKIN評分能基本反映OA的早、中、晚分期，MASSON染色可以作為MANKIN評分的補充。2引發(fā)軟骨細(xì)胞外基質(zhì)降解的MMPS分泌有時相性。軟骨細(xì)胞MMP1、13在OA早期是高表達(dá)，而MMP3的表達(dá)則是早期低表達(dá)，中晚期高表達(dá)。3滑膜在OA的發(fā)生過程中扮演重要的角色。早期即有降解軟骨的作用，而不僅僅是繼發(fā)的滑膜炎。4CT促進(jìn)關(guān)節(jié)軟骨形成和抑制軟骨基質(zhì)的降解。5CT在OA早期抑制骨吸收。OA早期軟骨下骨骨吸收活躍，骨小梁體積和數(shù)量減少，間隔增寬，與破骨細(xì)胞標(biāo)記物的變化一致。CT治療OA要在早期應(yīng)用。

簡介：中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文下頜角截骨定位保護拉鉤設(shè)計的研究姓名王超申請學(xué)位級別碩士專業(yè)口腔醫(yī)學(xué)；口腔臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師劉強201203下頜角肥大；下頜骨整形；截骨定位保護拉鉤；2

簡介：河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文使用授權(quán)擴知識產(chǎn)權(quán)歸屬承諾本學(xué)位論文在導(dǎo)師或指導(dǎo)小組的指導(dǎo)下，由本人獨立完成。本學(xué)位論文研究所獲的研究成果，其知識產(chǎn)權(quán)歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。河北醫(yī)科大學(xué)有權(quán)對本學(xué)位論文進(jìn)行交流、公開和使用。凡發(fā)表與學(xué)位論文主要內(nèi)容相關(guān)的論文，第一署名單位為河北醫(yī)科大學(xué)，試驗材料、原始數(shù)據(jù)、申報的專利等知識產(chǎn)權(quán)均歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。否則，承擔(dān)相應(yīng)的法律責(zé)任。研究一繃導(dǎo)師擗荀勺鵲二級學(xué)院姊DO{牛年辭其}SB河北醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明本論文是在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特別加以標(biāo)注等內(nèi)容外，文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果，指導(dǎo)教師對此進(jìn)行了審定。本論文由本人獨立撰寫，文責(zé)自負(fù)。研究生簽名鋤導(dǎo)師虢相看魯≥，≮年冬日1F日中文摘要遺傳性骨骼肌疾病相關(guān)心臟病研究摘要遺傳性骨骼肌疾病屬于單基因遺傳病，遺傳方式包括常染色體隱性遺傳AUTOSOMALRECESSIVEINHERITANCE，AR、常染色體顯性遺傳AUTOSOMALDOMINANTINHERITANCE，AD、X連鎖遺傳X．1INKEDINHERITANCE以及散發(fā)。發(fā)病機制為致病基因變異、編碼骨骼肌細(xì)胞相關(guān)蛋白缺失或功能異常，導(dǎo)致肌細(xì)胞膜破壞、胞漿蛋白結(jié)構(gòu)異常、代謝紊亂、細(xì)胞膜離子通道異常，引發(fā)肌無力、肌萎縮、肌強直等骨骼肌受累臨床表現(xiàn)，可伴有心、腦、肝、骨關(guān)節(jié)、內(nèi)分泌、周圍神經(jīng)等多系統(tǒng)受累。遺傳性骨骼肌疾病疾病譜廣泛，包括進(jìn)行性肌營養(yǎng)不良、先天性肌病、先天性肌營養(yǎng)不良、離子通道肌病、代謝性肌病線粒體肌病、糖原貯積癥、脂質(zhì)沉積病、肌原纖維病，依據(jù)致病基因、編碼蛋白、特征性臨床及病理表現(xiàn)，每類疾病分為若干亞型。臨床表型、活檢骨骼肌病理分析是診斷、研究遺傳性骨骼肌疾病的基礎(chǔ)，致病基因檢測是確診疾病的重要方法。遺傳性骨骼肌疾病，以進(jìn)行性加重的肌無力、肌萎縮為主要臨床表現(xiàn)，多于兒童、青壯年起病，肌無力、肌萎縮主要累及骨骼肌，甚至累及平滑肌、心肌，肌無力、肌萎縮逐漸加重至生活不能自理，病程晚期，累及呼吸肌、心肌呼吸衰竭和／或心力衰竭導(dǎo)致死亡。近年，無創(chuàng)機械通氣的應(yīng)用，明顯改善了晚期遺傳性骨骼肌疾病患者的呼吸功能，降低了因呼吸衰竭致死的風(fēng)險，心肌損害成為遺傳性骨骼肌疾病致死的首要原因。遺傳性骨骼肌疾病繼發(fā)／伴發(fā)心肌損害主要表現(xiàn)為擴張／肥厚鄺艮制型心肌病、房性／室性一TL,律失常、心臟傳導(dǎo)阻滯、心力衰竭、心源性猝死。目前，電生理及影像學(xué)技術(shù)廣泛應(yīng)用于遺傳性骨骼肌疾病相關(guān)心臟病研究或臨床評判，為早期診斷、早期干預(yù)和治療心肌病變及心功能異常提供診斷學(xué)依據(jù)。提高心臟內(nèi)科及神經(jīng)內(nèi)科醫(yī)生對遺傳性骨骼肌疾病繼發(fā)／伴發(fā)心臟病的認(rèn)識及診斷意識，減少誤診、漏診，早期干預(yù)、施治，延長生命，提高患者的生存質(zhì)量。本研究從骨骼肌遺傳資源標(biāo)本庫中篩選DYSTROPHINOPATHY133例、疑診SARCOGLYCANOPATHY9例、EMERY．DREIFUSS型肌營養(yǎng)不良3家系

簡介：南方醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文Y500RCHA人工骨及氟化物Y500RCHA復(fù)合人工骨在兔顱面成骨效應(yīng)的實驗探索姓名郭毅申請學(xué)位級別碩士專業(yè)口腔臨床醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師周磊20090519中文摘要灰石人工骨的研制開發(fā)，以及氟離子對種植體骨界面成骨效應(yīng)影響的發(fā)現(xiàn)，都將使制造更高性能的復(fù)合骨替代材料并將其應(yīng)用于臨床成為可能。本論文將通過動物體內(nèi)實驗對新型珊瑚骨羥基磷灰石人工骨在引導(dǎo)骨再生能力上的表現(xiàn)進(jìn)行評估，以及觀察在此其基礎(chǔ)上加入一定濃度的氟離子對骨代用品引導(dǎo)骨再生效能所帶來的變化。目的探索Y500R珊瑚骨羥基磷灰石CHA人工骨在兔顱面成骨效應(yīng)以及氟離子對Y500R珊瑚骨羥基磷灰石CHA人工骨成骨效應(yīng)的影響。方法1利用直徑115MM醫(yī)學(xué)純鈦棒，機械加工成一定規(guī)格的鈦金屬隔離杯，充分拋光后進(jìn)行多次超聲及化學(xué)試劑表面清洗，分裝、高溫高壓消毒、干燥備用。2制備Y500RCHA人工骨，規(guī)格顆粒大小MO25I0㈣，配置一定濃度的氟化鈉溶液，將CHA人工骨浸泡于氟化鈉溶液中，使氟離子吸附于骨粉表面，在烘箱80℃烘干至完全干燥狀態(tài)，分別包裝，消毒滅菌鉆60備用。3新西蘭大白兔48只，隨機分成A、B、C三組動物，A組24只大白兔，通過手術(shù)方法于顱面制備環(huán)形骨陷窩及新鮮骨創(chuàng)面后，各固定一個裝有自體骨的鈦隔離帽及一個充滿骨髓血的鈦隔離帽，B組12只大白兔，顱面各固定兩個裝有Y500RCHA人工骨的鈦隔離帽，C組12只大白兔，顱面各固定兩個裝有含氟CHA人工骨的鈦隔離帽，松解皮膚嚴(yán)密縫合關(guān)閉創(chuàng)口，術(shù)后3天均肌注青霉素20萬單位以預(yù)防感染，單獨喂養(yǎng)。于術(shù)后10日、11日皮下注射四環(huán)素，而處死前3日、4日皮下注射鈣黃綠素。分別于2、4、6周后A組各處殺8只動物，而B、C組各處殺4只動物，將鈦帽連同顱骨完整取下并修整后以10％福爾馬林4。C浸泡固定，進(jìn)行大體標(biāo)本的觀察，以酒精梯度脫水，三氯甲烷浸泡透明，塑料包埋制作帶金屬硬組織切片，熒光顯微鏡下以及經(jīng)過甲苯胺藍(lán)酸性品紅染色后在光學(xué)顯微鏡下作組織學(xué)觀察，通過應(yīng)用圖像測量軟件對硬組織切片進(jìn)行分11

簡介：目的從人脂肪組織中提取培養(yǎng)脂肪組織來源干細(xì)胞ADIPOSETISSUEDERIVEDSTROMALCELLS，ADSCS，了解其生物學(xué)特性；從人血管組織中分離提取血管內(nèi)皮生長因子VULARENDOTHELIALGROWTHFACT，VEGF，并與含綠色熒光蛋白的雙順反子表達(dá)載體連接成重組質(zhì)粒PGFPZEOVEGF，將其分別轉(zhuǎn)染分離培養(yǎng)的不同代ADSCS，檢測轉(zhuǎn)染后的ADSCS對VEGFMRNA的表達(dá)、VEGF蛋白水平的變化以及成骨活性。方法膠原酶消化脂肪獲取細(xì)胞后，接種于培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)傳代。通過流式細(xì)胞儀鑒定體外培養(yǎng)細(xì)胞的表面標(biāo)志，觀察其形態(tài)學(xué)特點，測定培養(yǎng)細(xì)胞的生長曲線。選取第2代ADSCS分別于條件培養(yǎng)基進(jìn)行成脂、成骨及成軟骨誘導(dǎo)分化，并分別采用油紅“O”、VONKOSSA染色、堿性磷酸酶染色及甲苯胺藍(lán)進(jìn)行染色。另外，采用TRIZOL法提取人血管組織總RNA，逆轉(zhuǎn)錄合成CDNA，通過巢式PCR從CDNA中擴增編碼VEGF成熟肽的基因序列，將獲得的目的基因VEGF與PGEMTEASY線性載體進(jìn)行連接，再將連接成功的質(zhì)粒載體轉(zhuǎn)化感受態(tài)大腸桿菌DH5Α，經(jīng)鑒定測序，進(jìn)行回收。然后對重組克隆載體PTA2VEGF和含綠色熒光蛋白的雙順反子表達(dá)載體PGFPZEOMCS進(jìn)行酶切處理和連接以獲得重組表質(zhì)粒PGFPZEOVEGF，經(jīng)再次鑒定測序，大量回收。最后經(jīng)脂質(zhì)體介導(dǎo)將重組表質(zhì)粒PGFPZEOVEGF分別轉(zhuǎn)染第2、3、4、5代ADSCS，并進(jìn)行免疫熒光鑒定，經(jīng)RTPCR檢測VEGFMRNA的表達(dá)水平。轉(zhuǎn)染后分別于6H、12H、48H、72H回收轉(zhuǎn)染組和空載體轉(zhuǎn)染組ADSCS上清液，采用ELISA對VEGF的分泌進(jìn)行定量檢測，并進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。另外，取第2代轉(zhuǎn)染后的ADSCS設(shè)為VEGF基因轉(zhuǎn)染組，另建兩對照組分別為空載體轉(zhuǎn)染組和空白細(xì)胞組，分別于成骨條件下進(jìn)行培養(yǎng)，檢測上清液中堿性磷酸酶、骨鈣蛋白以及層粘連蛋白的分泌水平。結(jié)果膠原酶消化結(jié)合密度梯度離心及差速貼壁培養(yǎng)法分離出的細(xì)胞表面標(biāo)記CD49D和CD44等呈現(xiàn)陽性表達(dá)，為具有干細(xì)胞特性的ADSCS。ADSCS于條件培養(yǎng)基培養(yǎng)后，經(jīng)染色證實具有成脂、成骨及成軟骨等多分化潛能。VEGF可以與含綠色熒光蛋白雙順反子表達(dá)載體成功構(gòu)建為重組質(zhì)粒PGFPZEOVEGF。熒光顯微鏡提示脂質(zhì)體介導(dǎo)的VEGF目的基因片段能夠成功轉(zhuǎn)染至體外培養(yǎng)的ADSCS；經(jīng)ELISA定量檢測，上清液中VEGFMRNA表達(dá)水平在轉(zhuǎn)染組顯著增高，空載體轉(zhuǎn)染組無明顯變化，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析P結(jié)論膠原酶消化結(jié)合密度梯度離心法及差速貼壁培養(yǎng)法可有效地從脂肪組織中獲得具有定向誘導(dǎo)分化能力的ADSCS。經(jīng)脂質(zhì)體介導(dǎo)可成功將人VEGF目的基因片段轉(zhuǎn)染至人ADSCS，并能夠在體外持續(xù)有效的表達(dá)具有生物學(xué)活性的VEGFMRNA，分泌VEGF蛋白。在成骨條件培養(yǎng)下轉(zhuǎn)染后的ADSCS能夠大量分泌堿性磷酸酶、骨鈣蛋白以及層粘連蛋白，其成骨能力明顯增強。本試驗可以將促血管治療和干細(xì)胞移植有效結(jié)合起來，轉(zhuǎn)染后的ADSCS可以有效促進(jìn)成骨及成血管化，并可以更好的粘附于支架材料，用以修飾構(gòu)建組織工程骨與軟骨進(jìn)行體內(nèi)修復(fù)，從而對骨折不愈合、延遲愈合或骨缺損等的治療奠定了試驗基礎(chǔ)。

簡介：分類號密級國際十進(jìn)分類號（UDC）第四軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文成人骨性Ⅲ類錯成人骨性Ⅲ類錯牙合牙合患者下切牙區(qū)牙槽骨形態(tài)特征的CBCT研究患者下切牙區(qū)牙槽骨形態(tài)特征的CBCT研究（孫伯陽）培養(yǎng)類別學(xué)歷研究生申請學(xué)位類型專業(yè)學(xué)位學(xué)科領(lǐng)域?qū)I(yè)口腔醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師丁寅教授（主任醫(yī)師）指導(dǎo)教師單位第四軍醫(yī)大學(xué)口腔醫(yī)院正畸科二O一二年五月成人骨性Ⅲ類錯成人骨性Ⅲ類錯牙合牙合患者下切牙區(qū)牙槽骨形態(tài)特征的CBCT研究患者下切牙區(qū)牙槽骨形態(tài)特征的CBCT研究研究生孫伯陽學(xué)科專業(yè)口腔臨床醫(yī)學(xué)（正畸）所在單位第四軍醫(yī)大學(xué)口腔醫(yī)院正畸科導(dǎo)師丁寅教授（主任醫(yī)師）關(guān)鍵詞骨性Ⅲ類錯牙合；CBCT；正畸去代償；牙槽骨形態(tài)；下切牙中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)二O一二年五月

簡介：點擊查看更多濃縮自體骨髓-注射型骨泰復(fù)合修復(fù)空心椎的實驗研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：四川大學(xué)博士學(xué)位論文抑郁對大鼠心室肌電生理學(xué)特性的影響及其機理研究姓名陳進(jìn)申請學(xué)位級別博士專業(yè)內(nèi)科學(xué)（心內(nèi)）指導(dǎo)教師黃德嘉20070501中文摘要抑郁對大鼠心室肌電生理學(xué)特性的影響及其機理研究導(dǎo)師黃德嘉教授研究生陳進(jìn)背景與目的多項研究資料顯示抑郁是心臟性猝死SUDDENCARDIACDEATH，SCD的獨立危險因素之一。其具體機制尚不清楚。SCD的最主要原因是惡性室性心律失常VENTRICULARARRHYTHMIA，VA，而心室肌電生理學(xué)特性的改變是VA發(fā)生的病理生理學(xué)基礎(chǔ)。抑郁對心室肌電生理學(xué)特性有何影響尚未見報道。本實驗通過建立大鼠抑郁模型，研究抑郁對大鼠心室肌電生理學(xué)特性的影響，并在此基礎(chǔ)上檢測大鼠左室游離壁心肌組織離子通道的表達(dá)情況，以期闡明其分子機制．方法將64只雄性SD大鼠隨機分為健康對照組、抑郁組、糖尿病組和抑郁合并糖尿病組。抑郁動物模型通過持續(xù)4周的慢性溫和應(yīng)激獲得，糖尿病動物模型通過皮下注射四氧嘧啶獲得。從第5周開始對各組大鼠逐只進(jìn)行在體心室肌電生理學(xué)檢查。以阿托品和美托洛爾阻滯自主神經(jīng)支配后，在心外膜右室流出道RVOT以170MS為基礎(chǔ)周長起搏，測定右室流出道、右室心尖部RVA、左室流出道LVOT和左室心尖部LVA四個部位的90％單相動作電位時程MAPD90和興奮時間AT，通過S1S2刺激法測定心室有效不應(yīng)期VERP，計算90％單相動作電位時程離散度姒PD90D、心室有效不應(yīng)期離散度VERPD和興奮時間離散度

簡介：人工關(guān)節(jié)置術(shù)是目前公認(rèn)的治療人體各關(guān)節(jié)終末期病變的最佳方法。經(jīng)過一百多年不斷實踐、改良，再加上現(xiàn)代科技與人工關(guān)節(jié)假體在外形設(shè)計、制造材料、制造工藝、生物相容性、固定方式等多個方面的融合，使得現(xiàn)代人工關(guān)節(jié)假體在植入人體后使用壽命明顯延長、并發(fā)癥顯著減少。但長時間隨訪研究發(fā)現(xiàn)，在部分患者中，人工關(guān)節(jié)假體即使在正常使用情況下，仍然會隨著使用時間的延長發(fā)生松動，影響手術(shù)療效。以往的研究認(rèn)為這種假體松動的發(fā)生多與假體放置位置不佳、假體與相鄰骨組織貼合不緊密或植入假體存在微動等生物力學(xué)因素相關(guān)。但近年來通過對于取出的松動假體及其周圍組織的分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，人工關(guān)節(jié)置換術(shù)后假體無菌性松動的發(fā)生主要是由于內(nèi)植物磨損產(chǎn)生的碎屑誘導(dǎo)的假體周圍組織、細(xì)胞的一系列生物學(xué)反應(yīng)所致。這一系列反應(yīng)主要包括，假體磨損碎屑的產(chǎn)生、巨噬細(xì)胞的聚集、磨損碎屑的吞噬、促炎細(xì)胞因子的釋放、破骨細(xì)胞的生成、破骨細(xì)胞的骨吸收等。在這一系列反應(yīng)過程中，磨損顆粒誘導(dǎo)的局部無菌性炎癥反應(yīng)起到承上啟下的作用。巨噬細(xì)胞吞噬磨損顆粒后釋放大量促炎細(xì)胞因子，其中以TNFΑ和IL1Β最為重要，它們可以通過多種細(xì)胞信號傳導(dǎo)通路調(diào)節(jié)破骨細(xì)胞的形成和分化，并與骨溶解發(fā)生過程中的關(guān)鍵分子RANKL起協(xié)同作用，最終介導(dǎo)破骨細(xì)胞的骨吸收作用。而目前對于人工關(guān)節(jié)置換術(shù)后假體無菌性松動的治療仍主要使用翻修手術(shù)，這不僅消耗了大量的社會醫(yī)療資源，而且增加了患者痛苦，增大了手術(shù)風(fēng)險。為了解決這一問題，目前越來越多的研究者開始關(guān)注使用適當(dāng)?shù)乃幬飳θ斯りP(guān)節(jié)置換術(shù)后磨損顆粒誘導(dǎo)的骨溶解進(jìn)行治療。本研究旨在通過對當(dāng)歸水溶性制備液對于磨損顆粒誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞釋放促炎細(xì)胞因子的抑制情況、以及當(dāng)歸水溶性制備液對于磨損顆粒誘導(dǎo)的小鼠顱骨骨溶解的抑制情況的觀察，闡明當(dāng)歸水溶性制備液是否能夠在磨損顆粒誘導(dǎo)的骨溶解發(fā)生過程中起到通過抑制促炎細(xì)胞因子的釋放作用，并且進(jìn)一步地抑制破骨細(xì)胞的生成，抑制骨溶解的發(fā)生。通過培養(yǎng)小鼠巨噬細(xì)胞系RAW2647細(xì)胞，觀察UHMWPE磨損顆粒在細(xì)胞培養(yǎng)條件下是否可以誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞吞噬，并刺激巨噬細(xì)胞釋放促炎細(xì)胞因子。觀察當(dāng)歸水溶性制備液在體外培養(yǎng)的條件下是否具有明顯的細(xì)胞毒性。觀察不同濃度的當(dāng)歸水溶性制備液對于UHMWPE磨損顆粒誘導(dǎo)釋放的促炎細(xì)胞因子的抑制作用；使用UHMWPE磨損顆粒和C57BL6J小鼠制造小鼠顱骨骨溶解模型，觀察不同劑量的當(dāng)歸水溶性制備液能否在體內(nèi)實驗的條件下抑制由于巨噬細(xì)胞吞噬UHMWPE磨損顆粒后誘導(dǎo)的促炎細(xì)胞因子的釋放，并通過組織學(xué)切片觀察其能否抑制小鼠顱骨骨溶解的發(fā)生；通過高分辨率顯微CT掃描分析由不同濃度當(dāng)歸水溶性制備液治療的顱骨骨溶解小鼠標(biāo)本，通過掃描數(shù)據(jù)的三維重建比較各組之間骨組織計量學(xué)指標(biāo)的不同，更加精確地反映出當(dāng)歸水溶性制備液的療效。體外細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果顯示，當(dāng)歸水溶性制備液對于小鼠巨噬細(xì)胞系RAW2647細(xì)胞沒有毒副作用，并且可以明顯抑制其在UHMWPE磨損顆粒誘導(dǎo)下的促炎因子的產(chǎn)生；在使用腹腔注射當(dāng)歸水溶性制備液治療UHMWPE磨損顆粒誘導(dǎo)的小鼠顱骨骨溶解時發(fā)現(xiàn)，低劑量藥物雖然可以降低促炎細(xì)胞因子的產(chǎn)生、破骨細(xì)胞的形成和骨溶解的面積，但經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析發(fā)現(xiàn)與陽性對照組沒有顯著性差別。而在使用高劑量藥物治療時，促炎細(xì)胞因子濃度、破骨細(xì)胞數(shù)量和骨溶解面積均顯著減少，骨溶解相關(guān)指標(biāo)與藥物濃度之間存在明顯的劑量依賴關(guān)系；在使用更為精確地顯微CT對于小鼠顱骨標(biāo)本進(jìn)行掃描，并數(shù)據(jù)重建分析后發(fā)現(xiàn)，反應(yīng)小鼠顱骨骨質(zhì)量相關(guān)的BMC、BMD、BVTV、CMT等參數(shù)也顯示出與二維切片觀察數(shù)據(jù)相同的趨勢。人工關(guān)節(jié)置換術(shù)是解決終末期關(guān)節(jié)疾病的最佳手段，植入假體遠(yuǎn)期無菌性松動是目前影響關(guān)節(jié)置換術(shù)臨床療效的最主要術(shù)原因。目前已經(jīng)有諸如TNFΑ抑制劑、二膦酸鹽類藥物、骨保護素（OPG）、RANKLRANK信號通路抑制劑、非甾體類抗炎藥、四環(huán)素類藥物、可注射細(xì)胞因子等多種藥物進(jìn)行了動物或臨床試驗，但仍然沒有找到一種能夠有效地抑制磨損顆粒誘導(dǎo)的假體周圍骨吸收作用的藥物。本實驗通過對于中藥當(dāng)歸水溶性制備液的研究發(fā)現(xiàn)，其可以在體外細(xì)胞培養(yǎng)和體內(nèi)動物實驗的條件下，通過抑制巨噬細(xì)胞釋放促炎細(xì)胞因子，進(jìn)而抑制破骨細(xì)胞生成和骨溶解發(fā)生，為使用藥物治療人工關(guān)節(jié)置換術(shù)后磨損顆粒誘導(dǎo)的假體周圍骨溶解提供了新的可能的研究方向。