胃癌BGC-823細胞中HIF-1α、HIF-2α對GLUT1、PKM2的調控作用.pdf

1、目的：檢測HIF-1α、HIF-2α、GLUT1、PKM2在胃癌BGC-823細胞中的表達情況，研究siRNA技術特異性沉默人胃癌BGC-823細胞中缺氧誘導因子（HIF-1α、HIF-2α）后葡萄糖載體蛋白-1（GLUT1）、M2型丙酮酸激酶（PKM2）的蛋白及mRNA表達情況，探索HIF-1α、HIF-2α對胃癌細胞內GLUT1、PKM2的調控作用。
　　方法：實驗總共分為4組，分別是對照組、轉染Control siRNA組、

2、轉染HIF-1αsiRNA組、轉染 HIF-2α siRNA組，利用實時熒光定量 RT-PCR法及 Western-blot法檢測轉染HIF-1α siRNA、HIF-2α siRNA及Control siRNA后細胞內GLUT1、PKM2蛋白及mRNA的表達情況。
　　結果：利用RNA干擾技術能有效沉默BGC-823細胞中的HIF-1α、HIF-2α蛋白及mRN A的表達。轉染H IF-1αs iRN A、HIF-2αs iRN

3、 A后細胞內G LU T1、PKM2在mRNA及蛋白表達水平均下降（P＜0.05），其中siRN A抑制HIF-1α后PKM2下調較siRN A抑制HIF-2α更明顯（P＜0.05），HIF-1α、HIF-2α對GLUT1的調控比較差異結果無明顯統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。
　　結論：研究結果提示HIF-1α和HIF-2α均可在轉錄及翻譯水平參與調控GLUT1、PKM2的表達，其中HIF-1α對PKM2起到主要調控作用，HIF-1