PD-1-PD-L1在胃癌中的表達(dá)及其臨床意義的相關(guān)研究.pdf

1、目的：胃癌（Gastric Cancer GC）是我國常見的消化系統(tǒng)惡性腫瘤之一，按照2012年全球腫瘤流行病統(tǒng)計數(shù)據(jù)（GLOBOCAN2012）可知，胃癌是全球第五大常見腫瘤，亦是第三位導(dǎo)致癌癥相關(guān)死亡的腫瘤。在中國，胃癌居常見惡性腫瘤順位的第三位，居癌癥相關(guān)死亡順位的第二位。我國每年胃癌新發(fā)的病例數(shù)約為40萬，約占全世界總發(fā)病例數(shù)的42％。多數(shù)胃癌患者在診斷時已為晚期，生存時間較短且整體生活質(zhì)量差。傳統(tǒng)的治療方法有手術(shù)、放療和化療，

2、但對于晚期胃癌，手術(shù)治愈率低，且放化療療效欠佳。近年來，免疫治療的進(jìn)步及取得一定的臨床療效使其成為一種新的治療模式，免疫治療包括T淋巴細(xì)胞過繼治療、腫瘤疫苗、Toll樣受體激動劑和免疫檢查點抑制劑等。其中，免疫檢查點抑制劑發(fā)揮了重要的作用，目前對其研究方興未艾，如程序性死亡因子1（programmed cell death-1 PD-1)及其配體（programmed cell death ligand1 PD-L1），它是機(jī)體免疫系統(tǒng)

3、中的抑制性通路，該檢查點通路對于調(diào)節(jié)生理性免疫應(yīng)答的持續(xù)時間和幅度、維持免疫耐受起著重要的作用，從而避免了免疫應(yīng)答對正常組織的損傷和破壞。另外，該抑制性檢查點是由受體/配體的相互作用所調(diào)控，可能參與介導(dǎo)了腫瘤免疫逃逸的過程。前期關(guān)于PD-1和PD-L1的研究主要集中在肺癌及黑色素瘤等實體腫瘤上，并已取得了一定的臨床療效，PD-1抑制劑Nivolumab和Pembrolizumab已獲美國FDA批準(zhǔn)分別用于晚期鱗狀非小細(xì)胞肺癌和不可切除/

4、轉(zhuǎn)移性黑色素瘤的臨床治療，但在胃癌患者的治療中尚缺乏有力證據(jù)。本研究主要通過免疫組織化學(xué)法檢測PD-1和PD-L1分子在胃癌中的表達(dá)狀況，并探討其與臨床病理特征及患者預(yù)后的關(guān)系。
　　方法：收集河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院2007年1月至2007年12月期間接受過手術(shù)的胃癌患者的腫瘤石蠟組織標(biāo)本及其對應(yīng)的臨床病例資料，選取術(shù)后病理分期（pTNM分期）為III期和IV期的胃癌患者共82例。收集患者的各臨床資料包括年齡、性別、腫瘤直徑大小、分

5、化程度、腫瘤部位（胃的切除范圍）、腫瘤浸潤深度、有無脈管瘤栓、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及術(shù)前有無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等指標(biāo)。電話隨訪患者的生存狀況，采用免疫組織化學(xué)法檢測腫瘤組織中蛋白表達(dá)狀況，根據(jù)染色強(qiáng)度分級和陽性細(xì)胞密度分級的乘積評定PD-1和PD-L1蛋白的表達(dá)情況，對所有數(shù)據(jù)采用SPSS21.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行分析，對PD-1與PD-L1間表達(dá)相關(guān)性比較及與其臨床病理特征的關(guān)系分析采用χ2檢驗，應(yīng)用Kaplan-Meier法進(jìn)行生存曲線分析， Log-R

6、rank檢驗生存率差異有無統(tǒng)計學(xué)意義，對胃癌患者各項臨床指標(biāo)與預(yù)后的關(guān)系進(jìn)行單因素和多因素COX回歸分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1.胃癌患者中，PD-L1蛋白表達(dá)陽性率為42.68%，主要定位在腫瘤細(xì)胞和瘤間質(zhì)浸潤淋巴細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜上，腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞顯微鏡下可呈現(xiàn)小圓形，核大漿少，點樣分布，其中腫瘤細(xì)胞上的陽性表達(dá)率為32.93%，癌間質(zhì)浸潤淋巴細(xì)胞上陽性表達(dá)率為21.95%。PD-1蛋白

7、表達(dá)的陽性率為13.41%，且主要定位在腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞（TIL）的細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜上。腫瘤組織中PD-1蛋白表達(dá)陽性率低于PD-L1表達(dá)陽性率，其中43例胃癌組織呈現(xiàn)出既無PD-L1也無PD-1蛋白陽性表達(dá)。
　　2.胃癌組織中PD-1分子表達(dá)陰性患者中瘤細(xì)胞PD-L1表達(dá)陰性率、陽性率分別為70.42%、29.58%，胃癌組織中PD-1分子表達(dá)陽性患者中癌細(xì)胞PD-L1表達(dá)陰性率、陽性率分別為45.45%、54.55%（P>0.

8、05）；胃癌組織中PD-1表達(dá)陰性患者中癌間質(zhì)PD-L1表達(dá)陰性率、陽性率分別為77.46%、22.54%，胃癌組織中PD-1表達(dá)陽性患者中癌間質(zhì)PD-L1表達(dá)陰性、陽性率分別為81.82%、18.18%（P>0.05）。胃癌組織中PD-1蛋白表達(dá)與癌細(xì)胞和癌間質(zhì)浸潤淋巴細(xì)胞中PD-L1蛋白表達(dá)均無顯著相關(guān)性。
　　3.胃癌組織中PD-1表達(dá)陽性率在術(shù)前無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及術(shù)前有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的患者中分別為3.28%、42.86%（P<0.05

9、），癌細(xì)胞中PD-L1表達(dá)陽性率在術(shù)前無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及術(shù)前有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的患者中分別為13.11%、90.48%（P<0.05），癌間質(zhì)中PD-L1表達(dá)陽性率在術(shù)前無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及術(shù)前有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的患者中分別為13.11%、47.62%（P<0.05），胃癌組織中PD-1蛋白表達(dá)和PD-L1蛋白的表達(dá)與患者術(shù)前有無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和腫瘤的浸潤深度密切相關(guān)，其中癌間質(zhì)細(xì)胞中PD-L1蛋白的表達(dá)與腫瘤的分化程度密切相關(guān)。
　　然而胃癌組織中PD-L1表達(dá)和

10、PD-1表達(dá)與病人年齡、性別、腫瘤大小、腫瘤部位及有無脈管瘤栓均無顯著相關(guān)性。
　　4.對可能影響胃癌患者預(yù)后的因素（年齡、性別、腫瘤直徑大小、分化程度、手術(shù)胃切除部位、有無脈管瘤栓、腫瘤浸潤深度、PD-L1蛋白過表達(dá)及術(shù)前有無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等）進(jìn)行單因素COX回歸分析，結(jié)果顯示，胃的切除范圍（P<0.05）、PD-L1蛋白過表達(dá)（P<0.05）及術(shù)前有無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移（P<0.05）是影響胃癌患者預(yù)后的不良因素。同時多因素COX回歸分析，結(jié)

11、果顯示，癌細(xì)胞中PD-L1蛋白表達(dá)及術(shù)前有無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移是影響患者生存期的獨立因素。根據(jù)Kaplan-Meier生存曲線分析，癌細(xì)胞中PD-L1蛋白表達(dá)與患者術(shù)后生存期呈顯著相關(guān)，PD-L1陽性表達(dá)者較陰性者術(shù)后生存時間短，Log-Rank檢驗生存率差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；而癌間質(zhì)中PD-L1蛋白陽性表達(dá)與術(shù)后生存期無顯著關(guān)系。胃癌組織中PD-1表達(dá)與患者術(shù)后生存時間無顯著相關(guān)性。
　　結(jié)論：
　　1.PD-1和PD-

12、L1分子能夠表達(dá)在胃癌組織中，其中PD-L1的表達(dá)主要定位在癌細(xì)胞和癌間質(zhì)浸潤淋巴細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜上，PD-1的表達(dá)主要定位在TIL的細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞膜上。
　　2.胃癌組織中PD-1表達(dá)和PD-L1蛋白表達(dá)與患者術(shù)前有無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和腫瘤的浸潤深度密切相關(guān)。而與病人年齡、性別、腫瘤大小、腫瘤部位及有無脈管瘤栓均無顯著相關(guān)。
　　3.胃癌患者中，PD-L1陽性表達(dá)者較陰性表達(dá)者的術(shù)后生存時間短，提示PD-L1表達(dá)是患者預(yù)后的獨立