程序性死亡配體PD-L1在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及其臨床意義.pdf

1、目的：
　　通過檢測非小細(xì)胞肺癌患者組織中程序性死亡配體（programmed death ligang-1，PD-L1）的表達(dá)情況，探討程序性死亡配體-1（PD-L1）在非小細(xì)胞肺癌組織中的表達(dá)與肺癌患者臨床病理特征的關(guān)系及其作為一種新的生物標(biāo)志物在肺癌中的應(yīng)用價(jià)值。
　　方法：
　　1.采用蛋白印跡技術(shù)（western-blot）檢測PD-L1蛋白在肺癌組織、癌旁組織（距離切除腫瘤邊緣3cm內(nèi)的非癌組織）及切緣正常

2、肺組織（手術(shù)切除肺標(biāo)本近切緣組織）中的表達(dá)情況；
　　2.采用免疫組織化學(xué)染色法檢測41例肺癌組織中 PD-L1蛋白的表達(dá)和分布，并和15例肺部良性病變組織中 PD-L1的蛋白表達(dá)水平作為對(duì)照，分析肺癌組織中PD-L1的表達(dá)水平與肺癌患者臨床病理特征的相關(guān)性。
　　3.采用流式細(xì)胞術(shù)法（FCM）檢測19例非小細(xì)胞肺癌患者肺癌組織、相應(yīng)的癌旁組織中PD-1在CD4+T細(xì)胞上的表達(dá)（CD4+-PD-1）、PD-1在CD8+T細(xì)胞

3、上的表達(dá)（CD8+-PD-1）、PD-L1在CD14+單核細(xì)胞（CD14+-PD-L1）和CD68+巨噬細(xì)胞上的表達(dá)（CD68+-PD-L1）。
　　結(jié)果:
　　1. western-blot結(jié)果顯示：PD-L1蛋白表達(dá)量的灰度值在肺癌組織明顯高于癌旁組織（102.90±8.66 vs.46.17±4.85，P<0.05）和切緣正常肺組織（102.90±8.66 vs.12.75±2.64，P<0.05）。與正常肺組織相比較

4、，癌旁組織中 PD-L1蛋白的表達(dá)量的灰度值明顯升高（46.17±4.85 vs.12.75±2.64，P<0.05）。
　　2.免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示：肺癌組織中PD-L1蛋白主要表達(dá)于肺癌細(xì)胞的細(xì)胞膜上，其陽性表達(dá)率為81.25％（26/32），而15例肺良性病變組織中無1例表達(dá)PD-L1。PD-L1蛋白的表達(dá)與腫瘤患者TNM分期（?2=4.606，P<0.05）、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（?2=3.903，P<0.05）和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移（

5、?2=4.615，P<0.05）相關(guān)，與腫瘤患者年齡、性別、有無吸煙史及腫瘤病灶大小等無明顯相關(guān)（均P>0.05）。
　　3.流式細(xì)胞術(shù)檢測結(jié)果顯示：非小細(xì)胞肺癌組織中PD-1在CD4+淋巴細(xì)胞表達(dá)（CD4+-PD-1）和CD8+淋巴細(xì)胞表達(dá)（CD8+-PD-1）的百分率分別為（59.02±29.35）%和（57.41±34.53）%，其比例均高于癌旁組織中CD4+-PD-1表達(dá)的百分率（43.79±28.17）%及 CD8+-P

6、D-1表達(dá)的百分率（40.24±28.46%）%，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=5.735, P<0.001及 t=5.904, P<0.001）。非小細(xì)胞肺癌組中PD-L1在CD14+單核細(xì)胞（CD14+-PD-L1）和CD68+巨噬細(xì)胞上的表達(dá)（CD68+-PD-L1）所占的比例雖均高于癌旁組織，但結(jié)果無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　結(jié)論：
　　1.與癌旁組織和正常肺組織相比，PD-L1蛋白在肺癌患者組織中存在明顯高表達(dá)，可成為一種新的肺