程序性死亡配體PD-L1在非小細胞肺癌中的表達及其臨床意義.pdf

1、目的：
　　通過檢測非小細胞肺癌患者組織中程序性死亡配體（programmed death ligang-1，PD-L1）的表達情況，探討程序性死亡配體-1（PD-L1）在非小細胞肺癌組織中的表達與肺癌患者臨床病理特征的關系及其作為一種新的生物標志物在肺癌中的應用價值。
　　方法：
　　1.采用蛋白印跡技術（western-blot）檢測PD-L1蛋白在肺癌組織、癌旁組織（距離切除腫瘤邊緣3cm內(nèi)的非癌組織）及切緣正常

2、肺組織（手術切除肺標本近切緣組織）中的表達情況；
　　2.采用免疫組織化學染色法檢測41例肺癌組織中 PD-L1蛋白的表達和分布，并和15例肺部良性病變組織中 PD-L1的蛋白表達水平作為對照，分析肺癌組織中PD-L1的表達水平與肺癌患者臨床病理特征的相關性。
　　3.采用流式細胞術法（FCM）檢測19例非小細胞肺癌患者肺癌組織、相應的癌旁組織中PD-1在CD4+T細胞上的表達（CD4+-PD-1）、PD-1在CD8+T細胞

3、上的表達（CD8+-PD-1）、PD-L1在CD14+單核細胞（CD14+-PD-L1）和CD68+巨噬細胞上的表達（CD68+-PD-L1）。
　　結(jié)果:
　　1. western-blot結(jié)果顯示：PD-L1蛋白表達量的灰度值在肺癌組織明顯高于癌旁組織（102.90±8.66 vs.46.17±4.85，P<0.05）和切緣正常肺組織（102.90±8.66 vs.12.75±2.64，P<0.05）。與正常肺組織相比較

4、，癌旁組織中 PD-L1蛋白的表達量的灰度值明顯升高（46.17±4.85 vs.12.75±2.64，P<0.05）。
　　2.免疫組織化學染色結(jié)果顯示：肺癌組織中PD-L1蛋白主要表達于肺癌細胞的細胞膜上，其陽性表達率為81.25％（26/32），而15例肺良性病變組織中無1例表達PD-L1。PD-L1蛋白的表達與腫瘤患者TNM分期（?2=4.606，P<0.05）、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（?2=3.903，P<0.05）和遠處轉(zhuǎn)移（

5、?2=4.615，P<0.05）相關，與腫瘤患者年齡、性別、有無吸煙史及腫瘤病灶大小等無明顯相關（均P>0.05）。
　　3.流式細胞術檢測結(jié)果顯示：非小細胞肺癌組織中PD-1在CD4+淋巴細胞表達（CD4+-PD-1）和CD8+淋巴細胞表達（CD8+-PD-1）的百分率分別為（59.02±29.35）%和（57.41±34.53）%，其比例均高于癌旁組織中CD4+-PD-1表達的百分率（43.79±28.17）%及 CD8+-P

6、D-1表達的百分率（40.24±28.46%）%，差異具有統(tǒng)計學意義（t=5.735, P<0.001及 t=5.904, P<0.001）。非小細胞肺癌組中PD-L1在CD14+單核細胞（CD14+-PD-L1）和CD68+巨噬細胞上的表達（CD68+-PD-L1）所占的比例雖均高于癌旁組織，但結(jié)果無統(tǒng)計學差異。
　　結(jié)論：
　　1.與癌旁組織和正常肺組織相比，PD-L1蛋白在肺癌患者組織中存在明顯高表達，可成為一種新的肺