莨菪烷類衍生物拮抗M3受體的持續(xù)性和亞型選擇性(M3-M2)研究.pdf

1、目的：
　　慢性阻塞性肺疾?。╟hronic obstructive pulmonary disease，COPD）是一種嚴(yán)重危害人類健康的常見病。長效M3受體拮抗劑是目前臨床治療COPD的首選藥物，但是因亞型選擇性（M3/M2）不高，副反應(yīng)不容忽視。本課題在原有工作基礎(chǔ)上，設(shè)計(jì)、合成系列莨菪烷類化合物，同時開展目標(biāo)物對M3受體的拮抗活性、持續(xù)性和亞型選擇性（M3/M2）研究。通過建立定量結(jié)構(gòu)-活性關(guān)系（Quantitative

2、Structure-Activity Relationship，QSAR）、定量結(jié)構(gòu)-解離速率關(guān)系（Quantitative Struture-Offrate Relationship，QSOR）和定量結(jié)構(gòu)-選擇性關(guān)系（Quantitative Structure-Selectivity Relationship，QSSR）模型，指導(dǎo)后續(xù)長效、高活性和選擇性莨菪烷類M3受體拮抗劑的結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)，以提高成藥性。其中，QSOR研究屬首次報(bào)道。此

3、外，建立3α-酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷類化合物對映異構(gòu)體的手性拆分方法，為開發(fā)光學(xué)純的臨床治療藥物打下扎實(shí)的基礎(chǔ)。
　　方法：
　　經(jīng)酰化反應(yīng)合成3α-酰氧基莨菪烷（C系列）、3α-酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷（E系列）、（3S，6S）-3α-酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷（ES系列）和（3R，6R）-3α-酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷（ER系列）。分別選取豚鼠離體支氣管（M3）、左心房（M2）為生物測試樣本，以噻托溴銨作

4、對照，評價目標(biāo)物對M3受體的拮抗活性、持續(xù)性和亞型選擇性（M3/M2）。分別以目標(biāo)物和課題組現(xiàn)有莨菪烷類化合物對 M3受體的拮抗活性參數(shù)pA2（M3）、拮抗持續(xù)性參數(shù)log(t1/2(offset))和亞型選擇性（M3/M2）參數(shù)ΔpA2(M3/M2)[pA2(M3)-pA2(M2)]為生測數(shù)據(jù)，建立QSAR(M3)、QSOR(M3)和QSSR(M3/M2)模型，預(yù)測化合物對M3受體的拮抗活性、持續(xù)性和亞型選擇性（M3/M2），獲得結(jié)構(gòu)

5、優(yōu)化信息。采用高效液相色譜法，以不同配比的正己烷-異丙醇為流動相，在正相條件下，考察(±)-3α-酰氧基-6β-乙酰氧基莨菪烷在手性固定相Chiralpak AD、Chiralcel OD-H上的拆分情況。
　　結(jié)果：
　　共合成13個莨菪烷類化合物，其中7個為新化合物（包括4個旋光異構(gòu)體）。13個目標(biāo)物均對M3、M2受體產(chǎn)生拮抗作用。其中，C06對M3受體的拮抗活性最大[pA2(M3)=8.538]，但低于噻托溴銨的活性。

6、3個目標(biāo)物具有顯著的拮抗持續(xù)性。C06的持續(xù)時間最長[t1/2(offset)>720.0 min]，與噻托溴銨的相近。7個目標(biāo)物具有至少5倍的亞型選擇性（M3/M2）。其中，C13的亞型選擇性最高[?pA2(M3/M2)=1.883]。QSAR(M3)模型的交叉驗(yàn)證系數(shù)平方（q2）為0.730、非交叉驗(yàn)證系數(shù)平方（r2）為0.986、標(biāo)準(zhǔn)誤（SE）為0.106、F值為395.428。QSOR(M3)模型的q2、r2、SE、F值分別為0

7、.682、0.990、0.075、241.026。QSSR(M3/M2)模型的q2、r2、SE、F值分別為0.738、0.990、0.093、167.113。三類模型均具有較好的預(yù)測能力。對映體 E06在Chiralpak AD手性柱上實(shí)現(xiàn)完全分離。對映體E03、A14、A10在Chiralcel OD-H柱上，分別實(shí)現(xiàn)完全分離、基線分離和基本分離。
　　結(jié)論：
　　定性研究結(jié)果表明，當(dāng)C-3α位的取代基中含有2個苯環(huán)時，化

8、合物拮抗M3受體的時間較長；當(dāng)含有3個苯環(huán)時，亞型選擇性(M3/M2)最大。當(dāng)苯環(huán)上連有鹵素原子時，對延長化合物與M3受體的作用時間有利。在C-3α位的取代基團(tuán)中引入羥基或者O原子，與M3受體形成額外氫鍵，增加分子間的作用力，能顯著提高化合物的拮抗活性和延長持續(xù)作用時間。C-6β位的乙酰氧基對化合物拮抗 M3受體的活性和持續(xù)性、亞型選擇性(M3/M2)均不利。QSAR(M3)、QSOR(M3)和QSSR(M3/M2)模型提示，在C-3α

9、位中上方區(qū)域，即酰氧基附近，增大取代基的體積或負(fù)電荷，有利于提高化合物的拮抗活性。在C-3α位的中、下方區(qū)域，增大取代基的體積，分別有利于延長化合物的作用時間和亞型選擇性（M3/M2）。但取代基的體積過大，對延長作用時間不利。在C-3α位取代基的苯環(huán)附近，增加取代基的體積或正電荷將降低化合物的拮抗活性，總體上卻有利于延長化合物的作用時間。苯環(huán)附近減小取代基的體積或增加正電荷，有利于提高化合物的亞型選擇性（M3/M2）。在氮甲基附近，增加