SIRT3基因與代謝綜合征并心肌肥厚的關(guān)系研究.pdf

1、隨著發(fā)病率的不斷提升及發(fā)病譜的改變，目前代謝綜合征(MS，metabolicsyndrome)已成為全世界所面臨的重大衛(wèi)生問題。研究已經(jīng)證實(shí)代謝綜合征可通過多種途徑導(dǎo)致心血管疾病。SIRT3作為煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)Ⅲ類組蛋白脫乙?；?histone deacetylases，HDACs)基因，不僅參與調(diào)節(jié)線粒體能量代謝、抗氧化應(yīng)激、減少細(xì)胞凋亡、延長(zhǎng)機(jī)體壽命等眾多生物活性的調(diào)節(jié)，同時(shí)已被證實(shí)在心血管系統(tǒng)疾病中對(duì)心肌具有保護(hù)

2、作用。前期研究發(fā)現(xiàn)心肌組織SIRT3表達(dá)與高血壓左心室肥厚密切相關(guān)，且隨著心肌肥厚的加重，SIRT3的表達(dá)進(jìn)一步增加。而有關(guān)SIRT3基因與代謝綜合征(metabolic syndrome，MS)并心肌肥厚的研究國(guó)內(nèi)外均尚未見報(bào)道。本研究擬探討SIRT3基因在MS及MS并心肌肥厚患者中的表達(dá)，為代謝綜合征并心肌肥厚尋求新的治療靶點(diǎn)。
　　目的：
　　(1)研究SIRT3基因在代謝綜合征患者中的表達(dá);
　　(2)研究SI

3、RT3基因與代謝綜合征各組分的關(guān)系;
　　(3)探討SIRT3基因與代謝綜合征心肌肥厚的關(guān)系及可能機(jī)制。
　　方法：
　　1.研究對(duì)象的選擇及分組
　　隨機(jī)連續(xù)選取2014年5月-2015年12月在山東大學(xué)第二醫(yī)院心內(nèi)科住院患者共74例，按照2007年中國(guó)成人血脂異常防治指南制訂聯(lián)合委員會(huì)對(duì)代謝綜合征的診斷標(biāo)準(zhǔn)，及2007年歐洲高血壓指南提出的左室肥厚診斷標(biāo)準(zhǔn)(男性LVMl＞125 g/m2，女性LVMI＞110

4、g/m2)進(jìn)行分組，其中代謝綜合征組37例，平均年齡64.81歲，男性20例，女性17例;代謝綜合征并心肌肥厚組37例，平均年齡65.95歲，男性20例，女性17例。正常對(duì)照組31例，為在我院健康管理中心查體的健康體檢人員，平均年齡65.48歲，男性16例，女性15例，入選人員須經(jīng)詳細(xì)詢問病史、常規(guī)體格檢查及輔助檢查無異常發(fā)現(xiàn)（如心電圖、超聲心動(dòng)圖、實(shí)驗(yàn)室檢查），排除各種器質(zhì)性疾病。
　　2.各指標(biāo)測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)
　　(1)測(cè)定所

5、有受試者次日清晨空腹血糖、血清總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇、高密度脂蛋白膽固醇等與代謝綜合征的發(fā)生關(guān)系密切的指標(biāo)。測(cè)量晨起病人清醒后且未進(jìn)行任何肢體活動(dòng)時(shí)的右上肢血壓，連續(xù)測(cè)量?jī)纱?，中間間隔10分鐘，取兩次測(cè)量的平均值作為血壓指標(biāo)。測(cè)量身高、腹圍、腰圍、體重的最小測(cè)量單位分別為1cm和0.1kg。
　　(2)所有受試者入院后常規(guī)行超聲心動(dòng)圖檢查，測(cè)量舒張末期室間隔厚度(IVST)，舒張末期左室后壁厚度(LVPWT)，左心

6、室舒張末內(nèi)徑(LVId)，左室射血分?jǐn)?shù)(LVEF)，并計(jì)算LVMI。
　　3.實(shí)驗(yàn)方法
　　(1)收取MS患者與正常對(duì)照組的空腹外周靜脈血標(biāo)本，分離出血漿及白細(xì)胞。
　　(2)提取白細(xì)胞內(nèi)的總mRNA，將mRNA逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。
　　(3)應(yīng)用熒光實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)，從mRNA水平，檢測(cè)正常人、MS患者、MS并心肌肥厚患者中SIRT3基因的表達(dá)情況。
　　(4)應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附方法(ELISA)測(cè)定正常人

7、、MS患者、MS并心肌肥厚患者血漿中SIRT3基因的有無表達(dá)。
　　4.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
　　數(shù)據(jù)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件分析，計(jì)量資料以均值±標(biāo)準(zhǔn)差（(x)±s)表示，計(jì)量資料間比較采用單因素方差分析及兩兩均數(shù)比較的q檢驗(yàn)，兩組計(jì)量資料的比較用兩獨(dú)立樣本的T檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料采用x2檢驗(yàn);直線相關(guān)(Person相關(guān))分析用以研究?jī)勺兞恐g的相關(guān)性， P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1.應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附

8、法(ELISA)在MS組、MS并心肌肥厚組及健康對(duì)照組的外周靜脈血血漿內(nèi)均未檢測(cè)到SIRT3的表達(dá)，表明在MS并心肌肥厚及單純MS的病理生理?xiàng)l件下，SIRT3基因始終定位于細(xì)胞內(nèi)的線粒體中。
　　2.MS并心肌肥厚組、MS組白細(xì)胞內(nèi)SIRT3的mRNA表達(dá)水平較健康對(duì)照組顯著升高(P均＜0.05）。
　　3.MS并心肌肥厚組SIR T3的mRNA表達(dá)水平較代謝綜合征組顯著升高，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05）。
　

9、　4.直線相關(guān)分析證實(shí)，SIRT3的表達(dá)量與總膽固醇、低密度脂蛋白、腹圍S呈顯著相關(guān)，且均成正相關(guān)(P均＜0.05); SIRT3mRNA表達(dá)量與LVM、LVMI、LVEF呈相關(guān)性（P均＜0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.在基因水平上，MS并心肌肥厚患者SIRT3的表達(dá)水平較單純MS患者及健康人群表達(dá)量均顯著升高。
　　2.SIRT3基因可能參與抑制MS及MS并心肌肥厚疾病的發(fā)生發(fā)展過程，但具體詳盡的機(jī)制有待后續(xù)的實(shí)驗(yàn)