KM原料藥質(zhì)量控制方法研究.pdf

1、目的：
　　通過對(duì) KM原料藥的性狀、鑒別、檢查和含量測定方法的研究，為該藥物的質(zhì)量控制建立一套合理的分析方法，繼而為穩(wěn)定性試驗(yàn)研究奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)和條件，為制定準(zhǔn)確可靠的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)和支撐。
　　方法：
　　依據(jù)《中國藥典》2010年版凡例和附錄相關(guān)內(nèi)容，采用 HPLC、GC等方法對(duì)該藥物的性狀（外觀、臭，溶解度，熔點(diǎn)，比旋度）、鑒別（紅外鑒別、高效液相色譜法保留時(shí)間鑒別）、檢查（水分、氯化物、硫酸鹽、酸度、熾灼殘?jiān)?/p>

2、、重金屬、砷鹽、有關(guān)物質(zhì)和殘留溶劑等項(xiàng)目）以及含量測定方法進(jìn)行了研究；穩(wěn)定性試驗(yàn)（影響因素試驗(yàn)、長期試驗(yàn)、加速試驗(yàn)）中，針對(duì)該藥物的性狀、酸度、比旋度、對(duì)映異構(gòu)體、有關(guān)物質(zhì)和含量等指標(biāo)進(jìn)行了研究，考察各指標(biāo)的變化。
　　在含量測定中，確定的高效液相色譜法的色譜條件Ⅰ為：色譜柱：Symmetrix ODS-R C18(4.6×250 mm，5μm)；流動(dòng)相:乙腈-水（6:94， v/v）；檢測波長：254 nm；流速：1.0 mL/

3、min；柱溫：35℃；進(jìn)樣量：10μL。
　　在有關(guān)物質(zhì)檢測中，采用HPLC色譜系統(tǒng)Ⅱ：色譜柱：Symmetrix ODS-AQ C18(4.6×250 mm，5μm)，檢測波長：254 nm，流速：1.0 mL/min，柱溫：35℃，流動(dòng)相B：乙腈，流動(dòng)相A：乙腈-水（3:97， v/v），進(jìn)樣量：10μL；梯度洗脫。
　　本品的對(duì)映異構(gòu)體作為特殊雜質(zhì)，則采用色譜系統(tǒng)Ⅲ：色譜柱：Daicel CHIRALPAK AD手性柱

4、（4.6×250 mm，10μm），柱溫：40℃，流動(dòng)相：正己烷-無水乙醇（53:47，v/v），流速：1.3 mL/min，檢測波長：254 nm，進(jìn)樣量：10μL。
　　對(duì)本品中的殘留溶劑苯甲醇和氯芐的測定采用 GC法的色譜系統(tǒng)Ⅰ：色譜柱：HP-5（30 m×0.32 mm×0.25μm），載氣流速（氮?dú)猓?.0 mL/min，柱溫：115℃保持6 min，檢測器溫度：300℃，進(jìn)樣口溫度：260℃，分流比：3:1，進(jìn)樣方式

5、：手動(dòng)進(jìn)樣。
　　本品中甲醇、四氫呋喃、乙酸乙酯和二氯甲烷四種殘留溶劑的測定，則采用 GC法色譜系統(tǒng)Ⅱ：色譜柱：DB-624(30m×0.32mm×0.18μm)，載氣流速（氮?dú)猓?.0mL/min，柱溫：60℃保持10min，然后以每分鐘30℃的速度升至220℃，保持5分鐘。檢測器溫度：250℃，進(jìn)樣口溫度：200℃，分流比：5:1，進(jìn)樣方式：自動(dòng)頂空，頂空條件：平衡溫度為80℃，平衡時(shí)間30 min，傳輸管溫度為130℃，加

6、壓時(shí)間為6 s，進(jìn)樣體積為1.0mL。
　　結(jié)果：
　　1、本品為白色結(jié)晶性粉末，無臭；在二甲基甲酰胺（DMF）、0.1mol/L鹽酸或0.1mol/L氫氧化鈉中略溶，在乙醇或甲醇中微溶，在水中極微溶解，在乙腈中不溶。本品在248℃左右時(shí)開始融化，但是熔點(diǎn)較高，熔距較長，并且270℃尚未完全熔融，與熱分析結(jié)果一致；在25℃時(shí)比旋度為+25°～+29°。
　　2、紅外光譜和高效液相色譜法鑒別都顯示：多批樣品與對(duì)照品鑒別結(jié)

7、果均一致。
　　3.含量測定比較了兩種測定方法（高相液相色譜法和電位滴定法）的測試結(jié)果，綜合考慮成本、操作可行性和簡便性等因素，最終選用了高效液相色譜法來測定本品的含量。建立的色譜系統(tǒng)Ⅰ為：Symmetrix ODS-R C18(4.6×250mm，5μm)色譜柱，流動(dòng)相為乙腈-水（6:94），檢測波長為254nm，流速為1.0mL/min，柱溫為35℃，進(jìn)樣量為10μL。
　　4、本品多批樣品的水分含量均在5.9％-6.5

8、%之間；氯化物殘留量均小于0.02%；硫酸鹽的殘留量均小于0.04%；pH值在6.2-6.3之間；熾灼殘?jiān)淮笥?.1%；重金屬均小于20ppm；砷鹽檢查均無砷斑出現(xiàn)，而且1ppm的標(biāo)準(zhǔn)砷斑明顯。另外，對(duì)有關(guān)物質(zhì)、光學(xué)異構(gòu)體及殘留溶劑進(jìn)行了研究，由于無法在同一色譜條件下完成所有雜質(zhì)的分離測定，因此采用了多個(gè)色譜系統(tǒng)進(jìn)行檢查，方法學(xué)驗(yàn)證均符合要求。有關(guān)物質(zhì)測定：已知雜質(zhì)（非對(duì)映異構(gòu)體）均未檢出，單個(gè)最大雜質(zhì)均不大于0.1%，總雜質(zhì)不大于

9、0.3%；對(duì)映異構(gòu)體均未檢出；殘留溶劑測定：苯甲醇、氯化芐、乙酸乙酯、二氯甲烷、四氫呋喃均未檢出，甲醇有三批樣品中檢出，但殘留量均小于0.002%，符合ICH和《中國藥典》2010年版的規(guī)定。
　　5.影響因素試驗(yàn)、加速試驗(yàn)和長期試驗(yàn)主要考察了性狀、酸度、水分、比旋度、對(duì)映異構(gòu)體、有關(guān)物質(zhì)和含量測定等項(xiàng)目。影響因素試驗(yàn)比較了0天、5天和10天，加速試驗(yàn)考察了0、1、2、3和6月，長期試驗(yàn)考察了0、3和6月，所有指標(biāo)均無明顯變化，質(zhì)