普洱茶與其它茶葉保健功效的比較及與儲存時間的相關性研究.pdf

1、【目的】:
　　 將普洱茶與滇紅茶（紅茶）、龍井（綠茶）、鐵觀音進行比較，以茶氨酸、表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)及咖啡因作為茶葉中抗疲勞成分及功能成分指標，以小鼠抗疲勞經(jīng)典實驗為動物試驗指標對普洱茶的抗疲勞效果進行了深入的研究，并比較了隨儲存年代，普洱茶抗疲勞效果的變化，為普洱茶的保健價值的評定提供了依據(jù)。
　　 建立了茶葉中未衍生化高效液相色譜法測定茶氨酸含量及非梯度洗脫的HPLC分析方法測定EGCG及咖啡因含

2、量的方法，為茶葉中抗疲勞有效成分的研究提供了可行的分析方法。
　　 【方法】:
　　 1．茶葉中茶氨酸、EGCG及咖啡因的測定方法
　　 1.1茶氨酸、EGCG和咖啡因的提取方法茶葉樣品粉碎過80目篩，茶葉中的茶氨酸以水提取，超聲30min，溫度設定70℃，提取2次。EGCG及咖啡因以50％的乙醇超聲提取30min，溫度設定70℃，提取2次。
　　 1.2色譜條件采用Inertsil ODS-C18柱(5

3、μm，4.6×250mm)，HPLC-DAD方法進行測定，流速為1.0ml/min。測定茶氨酸為50％乙腈-0.1％磷酸（pH為2.5）(5:95，v/v)，測定EGCG及咖啡因為甲醇-1.5×10-4mol/L KH2PO4溶液(磷酸調(diào)pH為3)(25:75，v/v)；
　　 2.2008年產(chǎn)滇紅茶、龍井（綠茶）、鐵觀音及普洱茶抗疲勞功效的比較研究
　　 健康雄性小鼠200只，18～22g，分成四批進行試驗，每批隨機分

4、為5組，4個實驗組和1個對照組，劑量根據(jù)預試驗確定為1.34g/kg·bw。每組10只，分別灌胃給予滇紅茶、龍并、鐵觀音、2008年普洱茶樣品處理液，對照組給予蒸餾水；30d后實驗一批進行負重游泳實驗，實驗二批進行血清尿素氮測定，實驗三批進行肝糖元和肝組織中銅、鋅、鐵(Cu、Zn、Fe)元素的測定，實驗四批進行血乳酸值測定。
　　 3.1996年、2000年、2004年、2008年四個不同貯藏年份普洱茶抗疲勞功效的比較研究

5、>　　 健康雄性小鼠100只，18-22g，分成兩批進行試驗，每批隨機分為5組，4個實驗組和1個對照組，劑量為1.34g/kg·bw。每組10只，分別灌胃給予1996年、2000年、2004年、2008年普洱茶樣品處理液，對照組給予蒸餾水；30d后實驗一批進行負重游泳實驗，實驗二批進行血清尿素氮測定。
　　 【結(jié)果】:
　　 1．茶葉中茶氨酸、EGCG及咖啡因含量的測定結(jié)果
　　 三種成分在10～300μg/m

6、l濃度范圍內(nèi)，各組分峰面積與相應濃度均呈良好線性關系，r＞0.999。各組分的加標回收率在87％～102％之間，方法精密度相對標準偏差在0.42％～5.87％之間。滇紅茶、龍井、鐵觀音的茶氨酸含量分別為：5.11±0.21、14.43±0.65、5.93±0.32mg/g；1996年、2000年、2004年、2008年普洱茶的茶氨酸含量分別為：3.86±0.15、2.55±0.17、6.10±0.11、9.76±0.21mg/g；滇紅茶

7、、龍井、鐵觀音的EGCG含量分別為：13.41±2.35、64.60±3.38、49.85±7.76mg/g；1996年、2000年、2004年、2008年普洱茶的EGCG含量分別為：36.88±5.66、28.82±4.07、41.80±5.40、51.79±6.30mg/g；滇紅茶、龍井、鐵觀音的咖啡因含量分別為：27.72±0.67、24.19±2.21、18.28±0.36mg/g；1996年、2000年、2004年、2008年

8、普洱茶的咖啡因含量分別為：27.75±1.10、29.48±2.74、24.58±0.61、27.11±0.92mg/g。
　　 2.2008年產(chǎn)滇紅茶、龍井、鐵觀音及普洱茶抗疲勞功效的比較結(jié)果
　　 四個實驗組與對照組比較，其中紅茶組以滇紅茶為代表，綠茶組以龍井為代表；經(jīng)比較，紅茶組小鼠的游泳時間與對照組差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），其余三個實驗組的負重游泳時間均高于對照組(P＜0.05)，時間的長短順序為：綠茶組

9、＞鐵觀音組＞2008普洱組＞紅茶組；四個實驗組的血清尿素氮含量均低于對照組（P＜0.05），其中綠茶組的血清尿素氮水平最低，其余三個實驗組的血清尿素氮水平間差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；紅茶組小鼠的肝糖元含量與對照組差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），其余三個實驗組的肝糖元含量均高于對照組，高低順序為：2008普洱組＞綠茶組＞鐵觀音組＞紅茶組；四個實驗組與對照組所取肝臟組織的Cu，F(xiàn)e，Zn的含量差別均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，四

10、個實驗組所取肝臟組織Cu，F(xiàn)e，Zn的含量間差別也無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；綠茶組與對照組的血乳酸曲線下面積差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），其血乳酸曲線下面積低于對照組，其余三個實驗組與對照組間差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。
　　 3.1996年、2000年、2004年、2008年四個不同貯藏年份普洱茶抗疲勞功效的比較結(jié)果
　　 與對照組比較，四個年份的普洱茶組均能延長小鼠游泳時間(P＜0.05)，不同年份茶葉

11、之間的差別無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)；與對照組比較，四個實驗組均能降低小鼠運動后血清尿素氮水平(P＜0.05)。其中1996年組的血清尿素氮水平高于2004年組和2008年組(P＜0.05)；2000年組的血清尿素氮水平高于2008年組（P＜0.05）。
　　 【結(jié)論】:
　　 1．本文所測四種茶葉中，總體上龍井（綠茶）的茶氨酸、EGCG、咖啡因含量最多，2008普洱茶成分含量低于龍井（綠茶），鐵觀音居中，滇紅茶（紅茶

12、）最低；根據(jù)2003年頒布的《保健食品檢驗與評價技術規(guī)范》，通過負重游泳實驗、血清尿素氮實驗、肝糖元測定、血乳酸測定四項抗疲勞指標，在所確定的同一實驗劑量(1.34g/kg·bw)下，2008年產(chǎn)龍井（綠茶）、鐵觀音、普洱茶都有抗疲勞功效，其中龍井的抗疲勞功效最佳，滇紅茶的抗疲勞功效尚不確定。初步分析，四種茶葉抗疲勞功效的差異與其中所含的茶氨酸、EGCG、咖啡因三種抗疲勞成分的含量差異有一定的關系。
　　 2．通過測定負重游泳實

13、驗和血清尿素氮實驗兩個主要抗疲勞指標，在所確定的同一實驗劑量下(1.34g/kg·bw)，2008年和2004年普洱茶的抗疲勞效果優(yōu)于1996年和2000年普洱茶，說明普洱茶的抗疲勞效果隨儲存年代呈下降趨勢，并非如市場炒作時所宣傳的普洱茶越陳，功效越強。
　　 3．通過對各實驗組及對照組小鼠肝臟組織中必需微量元素Cu、Zn、Fe含量的測定，其結(jié)果表明：在實驗時間內(nèi)四種茶葉對小鼠肝臟組織中Cu、Zn、Fe的儲存含量均無明顯影響。<