Vc二步發(fā)酵新菌系的太空誘變選育及其發(fā)酵條件優(yōu)化.pdf

1、二步發(fā)酵法生產(chǎn)Vc的工藝中，第二步發(fā)酵為混菌發(fā)酵，由伴生菌蘇云金芽孢桿菌(Bacillus thuringiensis)和產(chǎn)酸菌氧化葡萄糖酸桿菌(Gluconobacter oxydans)協(xié)同完成從L-山梨糖到2-酮基-L-古龍酸的轉(zhuǎn)化。目前，維生素C的國(guó)際市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)十分激烈，提高發(fā)酵轉(zhuǎn)化效率、降低生產(chǎn)成本是企業(yè)提高競(jìng)爭(zhēng)力的根本選擇。而選育并獲得高效二步發(fā)酵菌系，則是提高發(fā)酵效率的一個(gè)重要途徑。
　　本文以伴生菌1514和生產(chǎn)小菌

2、搭配構(gòu)建的二步發(fā)酵新菌系為研究對(duì)象，通過神州7號(hào)飛船搭載開展太空誘變，選育獲得高效菌系，并對(duì)其發(fā)酵條件進(jìn)行了優(yōu)化。
　　在飛船搭載、選育過程中，分別挑取大、小菌單菌落1010個(gè)和3000個(gè)作為出發(fā)菌株。通過初篩、復(fù)篩和搖瓶篩選，最終獲得3株高效伴生菌320#、433#、988#和3株高效產(chǎn)酸菌2264#、2194#、444#。高效菌株經(jīng)過大小菌之間互相搭配，考察其產(chǎn)酸量，獲得一組最佳組合BG320-2194。新組合比生產(chǎn)菌株（對(duì)照

3、組）轉(zhuǎn)化率高3.8％。對(duì)新組合菌BG320-2194的生長(zhǎng)和發(fā)酵特性進(jìn)行了考察，發(fā)現(xiàn)該組合菌在制種階段，小菌的數(shù)量和產(chǎn)酸能力在18小時(shí)后達(dá)到了最佳狀態(tài)。
　　新組合菌系和出發(fā)菌系發(fā)酵結(jié)果比較，發(fā)現(xiàn)新組合菌的古龍酸積累速率在發(fā)酵的0-36小時(shí)一直高于出發(fā)菌株，最高轉(zhuǎn)化速率提前4小時(shí)達(dá)到最高值，表明新菌系較生產(chǎn)菌系和出發(fā)菌系均具有顯著的促進(jìn)古龍酸積累的能力。經(jīng)5批連續(xù)搖瓶考察，平均轉(zhuǎn)化率達(dá)到92.4％，且具有良好的穩(wěn)定性。優(yōu)化結(jié)果表明